生物技术实践与人们生产和生活密切相关，也为许多学生将来就业奠定了知识基础和能力基础。请回答下列有关生物技术实践中的问题。
（1）无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有 灭菌、干热灭菌和灭菌。人们常常是从土壤中分离纤维素分解菌。分离纤维素分解菌常用的方法是 。其实验流程是；土壤取样→ 选择培养→ →将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生 的菌落。该培养基从功能上看属于 培养基。
（2）在果醋、果酒、腐乳、泡菜的制作过程中，需要氧气的是 ；在酒精发酵时一般将温度控制在 ℃。发酵后是否有酒精产生，可以用 来检验。
（3）进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、 、接种、培养、移栽、栽培。花药离体培养时，选择 期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是 。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中 。
（4）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、____________和________。
[生物——选修1：生物技术实践]如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：
| 成分 |
含量 |
成分 |
含量 |
| NaNO3 |
3 g |
FeSO4 |
0．01 g |
| K2HPO4 |
1 g |
C6H12O6 |
30 g |
| 琼脂 |
15 g |
H2O |
1 000ml |
| MgSO4·7H2O |
0．5 g |
青霉素 |
0．1万单位 |
（1）依用途划分，该培养基属于 培养基，能在此培养基繁殖的微生物具有的特点是 。
（2）根据培养基原料，所培养微生物的同化作用的类型是 。
培养基中的碳源是 。
（3）若用该培养液培养纤维素分解菌，除了要去除一些成分外，还应加入的物质是 ，在筛选纤维素分解菌过程中常用 法。
【生物——选修1生物技术实践】请利用相关的知识回答下列问题：
（1）制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是_____________。为了缩短制作时间，可在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入少量陈泡菜液的作用是______________。泡菜发酵过程中会产生多种酸，其中主要的是乳酸，还有少量的亚硝酸。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_____________，原因是_____________。
（2）实验材料的选择直接关系到实验的成败。菊花的组织培养，一般选择未开花植株的茎上部_______的侧枝；月季的花药培养时间一般选在月季的_________期，一般来说，选择_____________期的花粉，花药培养成功率最高。
（3）平板划线操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物_____________；划线操作结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌___________。
请回答下列有关生物技术实践的相关问题：
Ⅰ．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ，培养基灭菌采用的最适方法是 法。测定培养液中微生物数量，可选用 法。
Ⅱ．三七是一种名贵中药，其有效成分是三七皂苷，可用萃取法提取。
（1）为了提高提取率，提取前应对三七材料进行预处理，即对其进行 。采用萃取法提取某有效成分时需要加热，一般不用酒精灯直接加热而用水浴加热，因为 。
（2）工业化大量而快速生产三七以提取相关成分，可应用 技术，此过程会使用到 等植物激素，对形成的愈伤组织应当测定其 的含量。
【选修1生物技术实践】微生物强化采油（MEOR）是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术．以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作．请回答下列问题：
（1）土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自______________的土壤．
（2）为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用_____培养基．常用的接种方法是_____或 ．
（3）接种后，应密封培养的原因是______________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取______________就可获得高效菌株．
（4）扩大培养过程中需要对微生物进行计数．取0．2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为___个/mL．该统计结果_____（低于、高于）实际值．
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）
（1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_______、_______方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供______，培养基灭菌采用的最适方法是________法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的__________技术。
【生物——选修：生物技术实践】回答下列有关微生物发酵技术的相关问题:
（1）酿制葡萄酒首先要选葡萄，通常要选糖分和酸度都很高的，用 试剂检验还原糖的含量。其次要选酵母菌。课外小组用同一种葡萄汁对三种酵母菌进行发酵能力测试，结果如下：
| |
原重（g） |
第一天 |
第二天 |
第三天 |
第四天 |
第五天 |
第六天 |
| 菌种1 |
150．5 |
151．83 |
150．85 |
149．38 |
148．34 |
147．32 |
145．94 |
| 菌种2 |
158．4 |
156．73 |
154．78 |
152．99 |
152．10 |
151．24 |
150．04 |
| 菌种3 |
164．8 |
163．82 |
161．51 |
159．43 |
158．24 |
157．25 |
155．49 |
从表格中培养基重量的变化分析，发酵能力最强的是 。进行发酵前，发酵瓶要注意清洗干净，并且要使用 消毒。
（2）某同学在制作果酒之后,欲进一步制作果醋。他先接种优良的醋酸杆菌，再持续通入无菌空气，进一步发酵。请分析能否得到果醋？ ，原因是 。
（3）制作腐乳、泡菜时，需要氧气的是 ，该过程中起主要作用的微生物是 。
（4）利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。可以从土壤微生物中筛选，制备培养基时，常用 做唯一碳源，制成 （固体、半固体或液体）培养基。
（10 分）从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集 培养→纯 种分离→性能测定。请回答筛选过程中的问题。
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从合适的环境采集菌样，然 后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从 的环境采集，培养厌氧菌的菌样应从 的环境采集。
（2）富集培养是指创设仅适应该条件的微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分离微生 物在群落中的数量大大增加，从而实现从自然界中分离出所需的特定微生物的培养方法。对 固氮菌富集培养的培养基应是 培养基；对耐高温淀粉酶菌的富集培养应选择 的培养基，并在 条件下培养。
（3）实验室最常用的灭菌方法是利用高温处 理达到杀菌的效果。高温灭菌的原理是高温使微生物的 等物质发生 。在微生物研究和教学中应用最 广、效果最好的湿热灭菌法是 灭菌法。
（4）下图中 A、B 是采用纯化微生物培养、用两种接种方法接种产生的效果图解，请分析 接种的具体方法：
AB获得图 A 效果的接种方法是 ；获得图 B 效果的接种方法是 。
下图为T2噬菌体侵染大肠杆菌的实验。据图回答下列问题：
（1）锥形瓶内的培养液是用来培养________________。
（2）能否直接用含有32P的培养基直接培养噬菌体使噬菌体标记上32P？___________________。
（3）用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌，经过离心后，放射性物质较高的部位在离心管的__________。若用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌，经过离心后，放射性物质较高的部位在离心管的___________。
（4）实验过程中需要用搅拌器进行搅拌，其目的是____________。
（5）噬菌体侵染大肠杆菌的实验证明了___________________。
I．回答下列问题：
（l）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_____________分解成________________。
（2）果醋制作往往在果酒制作的基础上进行，其相关的反应式为：________。
II．回答下列有关植物有效成分提取的问题：
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和_______，以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用_______法。
（4）用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是____。
（5）橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解、同时又会产生________的问题，所以一般采用_________法。
（每空1分，共10分）自然界中的酵母菌种类繁多、分布很广，是人类在发酵中常用的菌种。回答下列相关问题：
（1）图甲是酵母菌的结构示意图，酵母菌是_______（填“原核”或“真核”）生物，判断依据是___________。
（2）酵母菌繁殖时，主要进行________呼吸，其发生的场所是_________________。
（3）实验室用两种方式以葡萄糖为原料利用酵母菌发酵生产酒精。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件均相同且适宜。实验过程中每隔1 h分别测定一次两发酵罐中氧气和酒精的物质的量，记录数据并绘成如图所示的坐标图。
①在实验结束时甲、乙两发酵罐中产生的二氧化碳量之比为________；甲、乙两发酵罐分别在_________（填时间）的无氧呼吸速率最快。
②要鉴别发酵罐中是否有酒精产生需用酸性 色 试剂，若有酒精，则发酵罐中液体的颜色变为___________。
③由甲、乙发酵罐中的实验结果可以得出，要提高酒精的产量需_________________。
生物技术与我们的生活息息相关。请回答下列问题：
（1）PCR技术能把某DNA分子片断进行扩增，依据的原理是 ；每次循环需要经过 、复性、延伸三步。
（2）在果醋制作时，运用醋酸菌在供应____ __和糖源充足时，将糖分解成醋酸;在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸。请写出酒精生成醋酸的化学反应式：_________________．
（3）制作泡菜时蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐．在_____________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生___________反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成__________色溶液．
（4）进行月季花药离体培养，一般选择在五月初到五月中旬开的花．对于花粉而言，要采用__________期的花粉，为了鉴定该时期的花粉，常采用醋酸洋红法进行染色鉴定．若是某些植物花粉细胞不易着色，常采用____________法染色，能将花粉的细胞核染成____________色．
（5）分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用 法和 法接种。
如图为利用农作物秸秆生产燃料酒精的工艺流程，请回答：
（1）过程①常加入能分解 的微生物，其作用是把秸秆颗粒分解，从而产生__ __。
（2）从土壤中获取①所需微生物的过程称为微生物的 ，所选用的培养基应该以___ _为唯一碳源，并向培养基中加入 以筛选出所需菌种。
（3）酒精发酵中常用的菌种是____ ，生产酒精阶段的必要条件是__ 。在酸性条件下，可用 溶液来检测发酵产物中是否有酒精产生。
为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员作了如下实验。
（1）取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入________制成1：10稀释液，再梯度稀释到10-6的稀释液，涂布于添加了CaCO3的乳酸细菌培养基（MRS培养基）平板上，在________条件下恒温静置培养48小时。挑取具有________的菌落，用________法接种在MRS培养基上纯化。可通过观察菌落的________判断是否达到了纯化。
（2）纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定________中胆固醇的含量，以________作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出目的菌株。
【生物—选修1生物技术实践】某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株。请回答：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）为避免培养基污染，需将培养皿呈 状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行 处理。为了排除 ，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。
（3）为了筛选出菌株，可将适量的 试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是 ，则说明此种菌能够分泌脂肪酶。
（4）纯化菌种时，为了得到菌落，可采用 法接种于新的培养基平板上。
（5）试验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是 。
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