细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如图：将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在已接种被检菌的固体培养基表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈（图中里面的圈），结果如图所示。
（1）衡量本实验结果的指标是 。
（2）上述图中最有效的是 培养皿中的抗生素。
（3）用上述最有效的抗生素对细菌进行处理，并测定细菌数量变化，如图所示。
①向培养基中加抗生素的时刻为 点。
②细菌种群的进化是定向的，而变异是 ，抗生素对细菌变异的作用是 。
③尽管有抗药性基因存在，但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染，原因在于细菌种群中 。
生物技术给社会带来了巨大的经济效益，请回答下列有关问题:
(1)微生物培养过程中，对培养基进行灭菌的常用方法是______________。鉴别尿素分解菌时应加入________指示剂。
(2)从生物体内提取天然物质，丰富了人们的生活。提取胡萝卜素常用________________法，提取玫瑰精油常用________法，薄荷油是挥发性物质，在实验室中提取薄荷精油常选用________(鲜/干)薄荷叶作原料。其原因是____________________。
(3)植物组织培养过程中，用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做________。 由于离体细胞对营养、环境要求特殊，因此需要配置________培养基，其主要包括:大量元素、微量元素、有机物等。
请分析回答下列有关生物技术专题方面的问题：
（1）表是一种培养基配方，请回答下列问题：
①该培养基高压蒸汽灭菌时要在 g/cm2压力下灭菌30分钟，为了防止尿素加热分解，需要单独用 过滤去除细菌。
②该培养基属于什么培养基（多选）___________。
A．液体
B．固体
C．鉴定
D．选择
E．天然
③如果要对培养的菌落进行纯化，一般采用 方法，操作的第一步及每次画线之前都要对接种环进行 处理，目的是对接种环进行_________。
④制备培养基的操作步骤是__________。（用下列字母排序）
a．倒平板
b．计算
c．溶化
d．称量
e．灭菌
A．a→b→c→d→e B．e→b→d→c→a
C．b→d→c→a→e D．b→d→c→e→a
（2）如图是植物组织培养的示意简图，请回答下列问题：
①B表示的是____________，它是由高度液泡化的、呈无定型状态的薄壁细胞组成。
②A能被培养成为C的根本原因是________；
③植物激素中___________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
【生物—选修1：生物技术实践】（15 分）请回答下列与发酵技术和植物组织培养技术有关问题：
（1）腐乳一直受人们的喜爱，制作过程中发挥作用的微生物主要是毛霉，其代谢类型是________；吃腐乳时，会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，其实质是微生物的__________，对人体无害；各地腐乳风味迥异，在原料和菌种相同时，可通过_____制作出不同风味的腐乳。
（2）俗话说“心急吃不了热豆腐”，泡菜也不能急着吃，从防癌的角度考虑，应等到_______时食用。
（3）人们常用化学药剂消毒法进行消毒，如碘氟擦拭伤口、氯气消毒水源；日常生活中也常用到_____，如有人每周都会将碗筷放在开水中烧泡一段时间； 实验室里使用接种室之前一般都要进行一项物理性的操作是_______，以杀死物体表面或空气中的微生物。
（4）对植物花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。为了选择单核期的花药，通常采用的方法是_____，若某些植物的花粉细胞核不易着色，则需采用的方法是_________。
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量________。
（2）细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_____。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用________消化处理。
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的________或________合成水平的差异，确定Y的药效。
已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。
【生物——选修1：生物技术实践】炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。对炭疽病疑似患者，可通过噬菌体裂解实验确诊。
（1）为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用涂布器涂匀, 这种接种方法称为____________。
（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？________。为什么？________。
（3）下图为细菌鉴定的实验流程。图中Ⅲ的液体培养基由澄清变浑浊的原因是 。在实验Ⅳ中，先用无菌滴管吸取 滴于平板培养基表面，再用涂布器涂匀，经培养得到如图中Ⅳ的6个菌落。然后在平板培养基的 （填数字标号）菌落上滴加 。观察并记录结果。
（4）用炭疽杆菌进行实验后，所有用过的培养液、培养基等必须经过______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散，污染环境。
有研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．
（1）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于 培养基，仅以淀粉作为碳源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入琼脂作为凝固剂．
（2）Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和来灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是 ；一般对配制的培养基采用 法灭菌．
（3）部分嗜热菌在I号培养基上生长时可释放 分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈；应挑出透明圈 （大或小）的菌落，接种到Ⅱ号培养基．
（4）若对样品中的嗜热菌进行计数，采用的接种方法是 ，若要长期保存嗜热菌，应采用 的方法。
氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。
（1）从用途上来说，Ⅱ号培养基属于____________培养基，在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是_________________。配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1％的____________。在Ⅱ号培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒过来放置，这样做的目的是_________________________________。
（2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是_________________________________。
实验室中，培养基灭菌常用的方法是__________________________。
（3）将Ⅰ号培养基中的微生物接种Ⅱ号培养基中，采用的最佳接种方法是 ，
到将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如下图所示，此过程
采用______________________________（方法）统计菌体数。从图中可知，SP1菌在
__________________培养条件下最早停止生长，其原因是_____________________________
____________________________。
回答下列有关果酒制作的问题：
（1）将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，瓶内空气的主要作用是____________。制作葡萄酒的过程中，要将温度严格控制在18～25℃的原因是________________________。
（2）为提高果酒的品质，需要获得纯净的酵母菌，这样需要制备培养基纯化酵母菌。
①在制备培养基过程的步骤中，下列操作不需要的是__________（填序号）。
| A．灼烧灭菌 |
| B．高压蒸汽灭菌 |
| C．在酒精灯火焰附近倒平板 |
| D．操作者的衣着和手进行消毒 |
②纯化某种微生物，常用平板划线或稀释涂布平板法，这两种方法都可以达到_______________________的目的。若要测定微生物的数量，需选用___________________________法进行计数。从功能上分析，纯化所用培养基属于____________培养基。
③在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证能从中选择出菌落数在___________间的平板进行计数。
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题：
（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是 和 。
（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于 中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越 。
烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
(1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有 、 、 和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50℃时，在 附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。
(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素 ；含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明 ；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是 ，二是 。
(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素 。
人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有 。
（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程每一步都要在 旁进行操作。接种后的培养皿 于37℃的 中培养。
（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于 培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的 使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力 。
（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数 。
| A．多 | B．少 | C．相等 | D．几乎为零 |
I一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(己知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。
(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取I mL样液至盛有9 mL无菌水的试管中，照此依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55， 56， 57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为＿＿。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是＿＿＿＿。
(3)获得纯净培养物的关键是_＿＿＿＿。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步＿＿＿＿。
(4)在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是＿＿＿＿。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，＿＿是最理想菌株。
II回答下列有关生物技术的问题:
(1)胡萝卜组织培养的MS培养基与微生物培养基的主要区别是:①＿＿＿＿＿＿＿＿＿，②前者一般还含有植物激素。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是＿＿＿＿＿＿。对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的＿＿＿和时间，以防止胡萝卜焦糊。提取后宜采用＿＿＿方式进行鉴定。
烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
(1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有 、氮源、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50℃时，在 附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。
(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用 法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素 ；含头抱菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明 ；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是 ，二是 。
(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素 。
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