法国科学家巴斯德发现导致葡萄酒变质的根源是发酵物中混入了杂菌。请回答下列关于微生物的分离、培养等一些问题。
（1）研究和应用微生物的前提是： 。
（2）微生物的培养基配制一般都含有水、 和无机盐，在主要营养物质的基础上还要满足微生物生长对 以及氧气的要求。
（3）微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和 进行消毒。在微生物培养中，对培养基常用 方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能 。
（4）微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式： 。
（5）微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是 和 。
（6）微生物的计数：根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是 。
下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是( )
| A．微生物培养前，需对培养基进行消毒 |
| B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法 |
| C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 |
| D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源 |
请分析回答有关微生物及其应用的问题：
Ⅰ、柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如图1）。
（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的微生物M，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的 。（填编号）
A．蛋白胨、柠檬酸铁铵 B．橄榄油、硫酸铵 C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨
（2）微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测酶活性来确定其应用价值。为降低生物柴油生产成本，可利用________________技术使脂肪酶能够重复使用，比较图2中的三种工艺，最好选择_________ 工艺。
Ⅱ、苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图3所示，①为土壤样品。
（3）④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于 ；使用 法可以在⑥上获得单个菌落。
（4）采用固体培养基培养细菌时为什么要倒置培养？ 。
Ⅲ、急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。
（5）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；
（6）分别取0.1mL已稀释了103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为 个。
（7）噬菌斑（如图4）是在长满细菌的培养基上，由一个噬菌体侵染细菌后，不断裂解细菌产生的一个不长细菌的透明小圆区，它是检出噬菌体数量的重要方法之一。现利用连续取样、在培养基中培养的方法，测得噬菌体在感染大肠杆菌后数量变化曲线（图5）。下列有关该曲线的叙述中错误的是( ) (多选，填编号)
A．曲线a～b段噬菌体数量不变，说明此阶段噬菌体还没有开始侵染细菌
B．曲线a～b段细菌细胞中正旺盛地进行细菌 DNA 的复制和有关蛋白质的合成
C．由b到c对应时间内噬菌体共繁殖了10代
D．限制c～d段噬菌斑数量增加的因素最可能是细菌已经绝大部分被裂解
酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的生物。
（1）制作固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和的______溶液中形成凝胶珠。若形成凝胶珠颜色过浅，则说明________。酵母细胞的固定化技术是包埋法，而制备固定化酶则不宜用此方法，原因是______。
（2）利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可观察到的现象为______，同时会闻到酒味。利用酵母菌发酵产生酒精时要控制的必要条件是______。
（3）利用玉米秸杆生产酒精时，水解秸杆所用的纤维素酶可来自微生物。分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为________（按功能分），培养基中的碳源为______。微生物培养时对培养基常用________灭菌。
下表为某培养基的配方，下列叙述不正确的有几项
| 成分 |
蛋白胨 |
葡萄糖 |
K2HPO4 |
伊红 |
美蓝 |
蒸馏水 |
琼脂 |
| 含量 |
10g |
10g |
2g |
0.4g |
0.065g |
1000mL |
20g |
①从物理性质看该培养基属于固体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基
②培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨
③该培养基中的蛋白胨可提供特殊营养物质
④该培养基调节合适的pH和消毒后就可以接种使用
⑤该培养基可以用于培养HIV病毒。
⑥该培养基可以用于大肠杆菌的鉴定，其菌落出现黑色。
A．1项 B．2项 C．3项 D．4项
右图是某生物研究小组在“探究果酒制作过程中酵母菌种群数量变化因素”时，获得的两组实验数据（图中O、M、N、P代表相应发酵时间）。下列有关分析中，正确的是
| A．M点前酵母菌不进行细胞呼吸 |
| B．终止发酵时间应选择在P点时 |
| C．酒精浓度过高会抑制酵母菌繁殖 |
| D．N点时酵母菌种群增长速率最大 |
[生物——选修1：生物技术实践]（16分，每空2分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：
（1）苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用______________ 来检验。
（2）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括 。
| A．温度控制 | B．溶氧控制 | C．pH控制 | D．酶的控制 |
（3）苹果酒在 的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是 。
（4）腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是 。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于 。
（5）在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加 。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是 。
回答有关微生物和植物组织培养的问题：
（1）在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成此现象的生物是____________。腐乳外部有一层致密的“皮”，这是__________的匍匐菌丝形成的。制作泡菜时，有时坛内会长一层白膜，这是__________繁殖形成的。
（2）微生物的接种方法很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种等方法，虽然这些技术的操作方法各不相同，但是其核心都是要_______________，来保证培养物的纯度。
（3）从土壤中分离出分解尿素的细菌之后，对其进一步鉴定，要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，如果指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
（4）下图为花粉植株的培育途径
为了挑选到单核期的花药，通常选择_______________的月季花蕾。选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，采用的染色剂是___________，它可以将细胞核染成蓝黑色。①表示的生理过程是_____________________。
农田土壤的表层，自生固氮菌的含量比较多，将用表层土制成的稀泥浆，接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其它细菌分开，对培养的要求是（ ）
①加抗生素 ②不加抗生素 ③加氮素 ④不加氮素 ⑤加葡萄糖
⑥不加葡萄糖 ⑦37℃恒温箱培养 ⑧28 ℃--30℃温度下培养
| A．①③⑤⑦ | B．②④⑥⑧ | C．②④⑤⑧ | D．①④⑥⑦ |
关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（ ）
| A．操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌 |
| B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 |
| C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 |
| D．待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置 |
请回答下列与植物有效成分的提取及微生物相关的问题：
（1）适合玫瑰精油提取的常用方法为 法；橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用 法提取橘皮精油。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是 法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成 比。
（3）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基应以________作为唯一碳源。
（4）分离土壤中的纤维素分解菌时，经常用加入了______ __的鉴别培养基，在该培养基上，纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现____ ____。
下列关于高中教材中生产果酒、果醋、工业上生产果胶酶、格里菲斯实验、赫尔希和蔡斯实验中涉及微生物的说法中错误的是
| A．上述所涉及的微生物依次是酵母菌、醋酸菌、霉菌、肺炎双球菌、T2噬菌体和大肠杆菌 |
| B．上述微生物中只有酵母菌和霉菌具有核膜，但遗传物质都是DNA |
| C．鉴别肺炎双球菌（R、S型）可以用显微镜观察是否有荚膜或者用固体培养基培养观察菌落表面是粗糙还是光滑来判断 |
| D．赫尔希和蔡斯将T2噬菌体的蛋白质和DNA直接分离进行实验，证明了DNA是遗传物质 |
(8分)下图是生物兴趣小组为研究“某品牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。
请分析回答：
(1)与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是 。
(2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在 (生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙反应生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析，本研究使用的培养基属于 (类型)。
(3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，锅内水加热煮沸后，必须 ，以保证锅内气压上升，达到l21℃。灭菌后的培养基应适当冷却后，在 附近倒平板。
(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：
步骤l：分别取 加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并已经冷却到 ℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。
步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。
步骤3：将接种后的三组培养基和一个 都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。
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