家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
（1）进行转基因操作前，需用_____________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的__________________和____________________之间。
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR技术利用的原理是_______，该PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核苷酸、模板DNA、_______和__________。
（4）生物反应器培养家蚕细胞时会产生接触抑制，所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
回答下列有关果酒制作的问题：
（1）将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，瓶内空气的主要作用是____________。制作葡萄酒的过程中，要将温度严格控制在18～25℃的原因是________________________。
（2）为提高果酒的品质，需要获得纯净的酵母菌，这样需要制备培养基纯化酵母菌。
①在制备培养基过程的步骤中，下列操作不需要的是__________（填序号）。
| A．灼烧灭菌 |
| B．高压蒸汽灭菌 |
| C．在酒精灯火焰附近倒平板 |
| D．操作者的衣着和手进行消毒 |
②纯化某种微生物，常用平板划线或稀释涂布平板法，这两种方法都可以达到_______________________的目的。若要测定微生物的数量，需选用___________________________法进行计数。从功能上分析，纯化所用培养基属于____________培养基。
③在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证能从中选择出菌落数在___________间的平板进行计数。
下图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，回答下列问题：
（1）图中正确的实验操作顺序是 （用序号与箭头表示）。
（2）步骤③中加入蒸馏水的目的是 ；步骤⑤中加入蒸馏水后DNA析出，该操作的原理是 。
（3）步骤①中所用酒精最佳是经过 后再使用，该步骤的目的是 。
（4）DNA可用 试剂鉴定，沸水浴后的颜色反应为 。
（5）由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成功，其原因最可能是 。
生物技术在食品加工中的应用十分广泛，如果酒、果醋的制作就是生活中常见的例子。如图A是果酒和果醋制作的实验流程，图B是一个果酒制果醋的发酵装置。请分析回答：
（1）果醋发酵过程中起主要作用的微生物是 ，果酒发酵过程中起主要作用的微生物是 ，这两类微生物在代谢方式上的主要区别是其中 是兼性厌氧型生物。
（2）果醋是在图B的 瓶中产生的，发酵的微生物利用的碳源主要是 。
（3）图A的①过程是在图B中 瓶内进行的，发酵产物酒精要在 （选填:酸/中/碱）性条件下用 来鉴定。
(16分）如图所示为利用玉米（2N=20）的幼苗芽尖细胞（基因型BbTt）进行实验的流程示意图。据图 回答下列问题：
(1)植株A的体细胞内最多有＿＿个染色体组，过程③中能够在显微镜下看到染色单体的时期是＿＿。
(2)秋水仙素用于培育多倍体的原理是其能够抑制＿＿＿＿的形成。
(3)基因重组发生在图中＿＿＿＿（填编号）过程．
(4)利用幼苗2进行育种的最大优点是＿＿＿＿，植株B纯合的概率为＿＿＿。
(5)植株C属于单倍体是因为＿＿＿＿＿＿，其培育成功说明花药细胞具有＿＿＿＿＿＿＿＿。
I一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(己知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。
(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取I mL样液至盛有9 mL无菌水的试管中，照此依次稀释103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55， 56， 57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为＿＿。
(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是＿＿＿＿。
(3)获得纯净培养物的关键是_＿＿＿＿。在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步＿＿＿＿。
(4)在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是＿＿＿＿。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，＿＿是最理想菌株。
II回答下列有关生物技术的问题:
(1)胡萝卜组织培养的MS培养基与微生物培养基的主要区别是:①＿＿＿＿＿＿＿＿＿，②前者一般还含有植物激素。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是＿＿＿＿＿＿。对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的＿＿＿和时间，以防止胡萝卜焦糊。提取后宜采用＿＿＿方式进行鉴定。
家庭泡菜的制作方法是：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洁并用白酒擦试过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”。密封后置于阴凉处，最适环境温度为28～30 ℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”。在实验室或工厂化生产泡菜时，还要跟踪检测泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐含量。
⑴泡菜制作的原理是 。
⑵若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是 。
⑶用白酒擦拭泡菜坛的目的是 ，加入“陈泡菜水”的作用是 。
⑷在发酵初期会有气泡从坛沿水槽内的水中间歇性溢出，这些气泡来源于微生物呼吸作用产生的 ；发酵后期，乳酸含量继续增加，当达到1.2%以上时，发酵速度渐渐变缓甚至停止，主要原因是 过低抑制了乳酸菌的生长；制作泡菜的过程中，有机物的干重 。
⑸关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述，正确的是__________。
| A．泡菜制作需配制盐水，按盐水4∶1的比例配制 |
| B．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成紫红色溶液 |
| C．泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响其含量 |
| D．制备样品处理液，先加入提取剂，在摇床上振荡提取1 h，再加入NaOH溶液 |
在生物世界，微生物虽然显得过于微小，但在自然界却作用非凡，在食品生产中的应用更是十分广泛。请回答下列问题：
(1)利用苹果、梨、葡萄等水果制作果酒时，其发酵阶段所需的菌种是____________；在产生酒精时要控制的必要条件是________，此时发酵作用的反应式_____________________。
(2)图甲代表该发酵装置，如果发酵后期，通气口的开关被打开，一段时间后果酒变酸，这是由于酒精在__________的作用下生成了________。图乙中能表示该发酵过程培养液pH变化的曲线是________。
(3)民间制作腐乳时，豆腐块上生长的毛霉来自____________________。制作腐乳的卤汤中通常要加入料酒、黄酒等，含量一般控制在12%左右，其目的是________________。
(4)家庭制腐乳，常将豆腐块平放在铺有干净的粽叶盘内，摆好豆腐块后，豆腐上面再铺上干净的粽叶，将盘置于15℃～18℃的地方，大约5 d后，豆腐表面长满了白色的菌丝，粽叶所起的主要作用是( )
| A．提供菌种 | B．杀菌作用 |
| C．吸水作用 | D．没什么作用 |
(5)下列因素中能影响腐乳风味的是________(填序号)。
①豆腐含水量 ②盐的用量 ③香辛料的用量 ④酒的用量 ⑤发酵温度 ⑥发酵时间
下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题：
（1）选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用____________期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过____________来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是____________。
（2）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中____________，不管哪种途径，最终获得的完整植株都称为__________________，必须对植株进行 ，才能使其结实产生后代。
（3）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度____________的薄壁细胞，胚状体与____________发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。
（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项中需要灭菌的有___________（填编号），需要消毒的有___________（填编号）。
①培养基 ②培养皿 ③接种环 ④花蕾 ⑤实验操作者的双手 ⑥三角锥形瓶
（5）试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应如何壮苗？___________________________________。
生物组织中存在多种有机物，不同的有机物其提取与鉴定方法不尽相同。根据所学知识，请回答下列问题。
（1）玫瑰精油素有“软黄金”之称，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏法，将鲜玫瑰花瓣和清水进行水蒸气蒸馏后收集到的产物是__________，需加入一定量的氯化钠使其分层，玫瑰精油将分布于液体的________层，用分液漏斗分离的油层中还需要加入________以除去水分。玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用 技术实现玫瑰的快速繁殖。
（2）去年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，使橘农遭受到了很大的损失，有人提出了提取橘皮精油获取利润的建议。橘皮精油是食品、化妆品和香水配料的优质原料，具有很高的经济价值，一般提取橘皮精油的方法是_______法，之所以不采取水蒸气蒸馏法的原因是_____________________________________。
（3）用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率主要取决于 ，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对新鲜胡萝卜进行干燥时，要注意控制 ，否则会引起胡萝卜素的分解；提取的胡萝卜素粗品可通过 法进行鉴定，提取萃取过程采用水浴加热，不用明火加热的原因是 。
（4）下图是血红蛋白提取过程所需的一个_________装置，装置中，B是血红蛋白溶液，则A是________________，该装置的目的是去除样品中____ __ __的杂质。
DNA的粗提取与鉴定的实验
(1)本实验材料选用鸡血细胞液而不用鸡的全血，主要原因是由于鸡血细胞液中含有较高含量的 。
(2)图A中加入蒸馏水的目的是 。
(3)通过图B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是 。并在坐标系内画出DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的变化的图像
(4)图C所示加入蒸馏水的目的是 。
(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用 试剂进行检验，颜色反应为 色。
近十年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是： 。
(2)加热使DNA双链打开，这一步是打开 键，称为 ，在细胞中是在 的作用下使此键断裂。
(3)当温度降低时，引物与模板 端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中加入四种脱氧核苷三磷酸的目的是 ，遵循的原则是 。
(4) PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件. 即：液体环境、适宜的 和 。
(5)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为 、 、 三个步骤。
（共10分）请回答下列生物技术方面的问题。
（1）微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和__________________法，后者是将菌液进行一系列的________________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，再进行________________。菌落是在固体培养基上由________________繁殖而来的形态可见的子细胞群体。
（2）菊花的组织培养的大致过程如图所示，请回答下列问题：
图中B、C依次表示__________过程(填名称)，添加的两种关键激素是___________________。该实验操作成功的关键是_____________，所以要对外植体、超净工作台等进行___________，对培养基或培养器具等进行_______。
（3）同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(如图)，他在操作中加样的正确顺序是_______.
下图是用除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验装置，下列叙述不正确是( )
| A．首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质 |
| B．图乙装置的试管中收集到的液体中最先出现的是相对分子质量较小的蛋白质 |
| C．用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5mL，连续收集 |
| D．图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动 |
下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题。
⑴血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有运输功能，一个血红蛋白分子至少含有_________个游离的氨基。
⑵甲装置用于______，原理是______。
⑶乙装置中，C溶液是______。用乙装置分离蛋白质的方法叫______。
⑷用乙装置分离血红蛋白时，待______接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。
⑸血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。其中样品处理包括：红细胞的洗涤、______、分离血红蛋白溶液；纯度鉴定常采用的方法是______。
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