紫杉醇是从红豆杉属植物中提取的最有效的抗癌制剂之一，目前生产紫杉醇的主要原料是天然生长的红豆杉树皮，而大量剥取树皮会造成树木的死亡和资源的破坏。科研人员为寻找更多紫杉醇原料的来源，尝试利用基因工程技术和植物组织培养技术，快速培育具有抗病特性的红豆衫树苗，经栽培形成人工红豆衫林，从而扩大提取紫杉醇的原料来源，实验过程如下图表所示，请据图回答相关问题：
(1)图中将目的基因结合到质粒A形成重组质粒时需要的酶有_______，将经过导入处理的红豆衫顶芽离体细胞接种于MS培养基中，培养基中需添加的抗生素为_______，其目的是_______，这种培养基为_______培养基。
(2)己导入目的基因的红豆衫顶芽离体细胞能在MS培养基中发育为幼苗，利用了细胞的_______性，形成愈伤组织后，经再分化可形成各种组织细胞的原因是_______。
(3)配制的MS培养基在接种前需采用_______进行灭菌处理，该培养基中还需添加______________两种植物激素，添加激素时还需控制好两种激素的_______。
(4)将红豆杉顶芽切段分离成单个的顶芽离体细胞时，常用方法是酶解法，所需酶为_______。
请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。
(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 (脱落酸、2，4-D)。
（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要。
(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
基因工程和植物细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答：
（1）图中③④过程是利用了植物的 技术，其原理是 ，该过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加________等物质，作用是_________。
（2）若要获取转基因植物人工种子，需培养到________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______阶段即可。
（3）目前可采用茎尖组织培养技术来进行作物脱毒，原因是 。
细胞融合技术有着广泛应用。下图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题
（1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr 两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。
①这两个品种的花粉可用化学诱导剂 诱导融合，共可产生 种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过脱分化形成 ，再经培养可以得到 种不同于亲本表现型的玉米新品种。
②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用yyRr植株的花粉培养，再经过 处理并筛选获得，这种方法叫做 。
（2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，请据图回答：
①在“番茄—马铃薯的培育过程中，运用了植物细胞工程中的 技术，植物体细胞融合完成的标志 。
②a、b细胞融合之前，要用到的酶是 _____，酶处理后得到 。
（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞，请据图回答：
①为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的d细胞，d细胞的特点是 ______。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有 等特点。
(6分)科研人员为了解胰岛素样生长因子1 ( IGF1) 对体外培养的兔关节软骨细胞增殖以及细胞超微结构的影响，进行了相关实验。
(1)取动物的软骨，切碎后用 处理使之分散成单个细胞，加入细胞培养液制成细胞悬液进行培养。将配制好的一定浓度的第2代软骨细胞接种到七块细胞培养板上，待细胞贴壁生长后，将每块细胞培养板上的一半细胞加入浓度为100µ g·L-1的IGF1，另一半用 培养。每24h取出一块培养板进行细胞的计数，绘制曲线如下图。
根据曲线分析，加入IGF1后可使 缩短。
（2）取第4代生长良好的软骨细胞两瓶,弃去原培养液,实验组加入含IGF1 的细胞培养液,与对照组一起继续培养48h。电镜下观察细胞的超微结构发现，实验组细胞中线粒体变丰富,表明IGF1处理后， 细胞内供能充足，活跃；粗面内质网增多,核糖体数量增加,表明IGF1处理后细胞内 旺盛；细胞核体积增大，说明在IGF1作用下细胞持续增殖，细胞核中 均合成旺盛。
如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题。
(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是__________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是__________。该过程所用的生物技术有____________________
(2)图3中过程①是植物细胞形成__________的阶段，该阶段所用的酶是___ ____。
(15分) [生物——选修3：现代生物科技专题]
克隆猪成功率较低，与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2 基因是细胞凋亡抑制基因，用PCR 技术可以检测该基因转录水平。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。
请回答：
（1）将良种猪的组织块分散成单个细胞的过程中，一般先剪碎，然后用 处理。
（2）用_______处理以获取更多的卵母细胞，成熟的卵母细胞在核移植前需要通过显微操作进行_________处理。
（3）在培育克隆猪的过程中，由囊胚的 细胞分离获得的胚胎干细胞（ES），在形态上具有 等特点，要维持它们的增殖而不分化的状态，通常在 细胞上培养。
（4）通过 等技术可以得到“试管猪”，也可以得到“试管婴儿”。“设计试管婴儿”技术与“试管婴儿”技术的区别是
（5）在PCR 过程中可检测出cDNA 中Bcl-2 cDNA 的分子数，进而计算总mRNA 中Bcl-2 mRNA 的分子数，从而反映出Bcl-2 基因的转录水平。
①图中X 表示 过程。
②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA 的核苷酸序列，以便根据这一序列设计合成 ，用于PCR 扩增。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。右图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、______、将目的基因导入受体细胞、__________。
（2）A过程需要的酶有 和 。
（3）要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用__________处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为__________态；然后将 在缓冲液中混合培养完成转化过程。
（4）含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植株要经过［C］_________________和［E］_________________。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中加入_________________。
（5）目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_____________。这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是_________________。
如图表示两种制备单克隆抗体的实验方案。已知调控细胞增殖的基因在骨髓瘤细胞的细胞质中，回答相关问题：
（1）若图1中A是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自 体内的浆细胞，促进d过程的常用诱导剂是 。
（2）假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，通常首先是用选择培养基对C细胞进行筛选，筛选出 细胞，然后再设法筛选出 (填特点)的D细胞用于培养。
（3）若以细胞核移植技术制备单克隆抗体（图2），a为去核的 细胞，e是从d中分离出的 细胞，V过程类似于植物组织培养中的 过程。
（4）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优点是 。
人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。+大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入“雌性奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）重组细胞①和②中 （①／②）实现了基因的重组。
（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
（3）实验过程b利用的技术是 ，胚胎工程操作中最后环节
是 。
（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型
（相同／不同） ，理由是 ，此项技术称为 。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中作为饲养层的是 细胞。
（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及 等物质。
[生物——选修3：现代生物科技专题]
图是植物体细胞杂交过程示意图,如果A,B植物均为二倍体,据图分析回答（除注明外，每空2分）:
（1）图中所示过程的原理有: 。
（2）植物体细胞融合成功的标志是 ,其产生与细胞内 （细胞器）有关。
（4）③和④过程分别是 和 的过程。则该杂交植物有 个染色体组。
人的HPRT基因缺陷（HPRT－）细胞和小鼠的TK基因缺陷（TK－）细胞在HAT培养基中都不能存活。杂种细胞在分裂中随机丢失人的染色体，但保留所有的鼠染色体。因此，利用人—鼠细胞融合技术可以将人类基因定位于特定的染色体上。
（1）将人的HPRT－细胞与小鼠的TK－细胞用________促进融合，然后培养在________培养基（HAT）中，最终筛选出人—鼠杂种细胞。
（2）将存活下来的杂种细胞进行单克隆培养，获得不同的细胞株，用________染色后镜检，观察结果如下：由此可推测________基因在________染色体上。
| 细胞株编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
| 所含人染色体编号 |
11，14，17，22 |
7，11， 14，17 |
5，7， 17，21 |
2，9， 11，17 |
5，17， 18，20 |
2，5， 17，19 |
（3）如果要确定人鸟苷酸（UMP）激酶基因所在染色体，应选择UMP激酶缺陷的____（填“人”或“鼠”）细胞与相应细胞杂交，这样的方法_____（填“能”或“不能”）对小鼠的基因进行定位。
（4）经过基因测序发现UMP激酶缺陷是因为编码它的基因中部的部分碱基替换造成的，结果可能导致（ ）
A.转录不能进行
B.合成的蛋白质分子缺少部分氨基酸序列
C.合成的蛋白质分子增加部分氨基酸序列
D.合成的蛋白质分子氨基酸数目不变
(8分)应用生物工程技术可获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
(1)在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是 ，②过程常用的方法是 。
(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有 。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用 技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是 细胞，Ⅲ代表的细胞具有 的特点。
(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是 ，⑤过程采用的技术是 。
[生物一选修3:现代生物科技专题](15分)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用 H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示:
(1)过程③常用的方法是_______________。
(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生__________免疫。从小鼠体内分离的细胞I是__________，细胞Ⅱ应具有的特点是_________________________。
(3)体外培养细胞II，首先应保证其处于__________的环境，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是____________________。
(4)对于转基因成功的细胞II还要进行克隆化培养和__________检测。
(5)若要预防H7N9 禽流感，可用图中的__________作为疫苗。
(15分)如图为培育转基因抗虫棉的技术流程。请据图回答：
（1）进行过程①，先要运用的酶是 。
（2）基因工程核心步骤的名称是 。
（3）在培育成功的转基因抗虫棉的传种接代过程中，抗虫基因和标记基因是否遵循基因的自由组合定律 。为什么？ 。
（4）过程②采用最多的方法是 。在实验室中，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞的DNA分子上的方法是 。
（5）经过③过程形成愈伤组织的细胞分裂方式是 。
（6）过程④所表达的两个重要的生理现象是 。
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