为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答下列问题。
（1）试管牛的培育属于 （“有性繁殖”或“无性繁殖”）；试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有早期胚胎培养、______________________等；克隆牛的培育依据的原理是 。
（2）促使B牛多排卵的激素一般是 。对B牛和D牛要进行
处理。
（3）在受精的过程中，判断卵子是否受精的标志是 。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，即科学家将
和乳腺蛋白基因的 、 等调控组件重组在一起，该过程需要用到的酶是 ，再通过 法导入牛的 中。
(15分)人们预防与诊疗传染性疾病经常使用疫苗和抗体，已知禽流感传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，相应疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
(1)过程②代表基因工程操作步骤中的 ；基因工程的核心步骤是 (填序号)，该过程所需的工具酶有 。
(2)过程⑦利用的生物学原理是 ，获得的X称为
(3)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行 比较，或用图中的______ 进行特异性结合检测。
如图是某单基因遗传病的家系图。
(1)为研究其发病机理，通常采用 获得大量致病基因，该技术成功的关键是要有 酶。
(2)为诊断2号个体是否携带致病基因，通常采用的分子生物学检测方法是 。
(3)该病会导致病人免疫能力下降，被病毒感染后的治疗需要大量的抗体。临床使用的小鼠免疫后制备的鼠源性单抗，具有___ 、 的特点，并可能 ，但存在一些弊端，其中之一是会引起人体抗鼠源抗体反应。5号个体在连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病，开始病毒量明显减少，一段时间后，这种病毒量又开始上升，排除病毒变异的因素，上升原因还可能是人体产生了 ，使鼠源抗体不能发挥抗病毒的作用。
(4)目前，研究人员可应用 技术，改造鼠源性抗体分子的结构，降低鼠源性抗体的人体反应。
下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答：
（1）①的名称是 ，②所示的生物技术的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，这是因为 。重组细胞A培养过程中所需要的基本条件包括充足的营养、 、 、气体环境。
（2）图中③所示的结构名称是 。若实现重组细胞B定向诱导分化，需要在培养基中加入 。
（3）④所示的生物技术名称是 ，若想得到大量健康的胰岛B细胞基因，可利用 技术，该技术利用的工具酶是 。
（4）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是 。该种基因治疗所属类型为 。
眼虫是一种含有叶绿体的原生动物：据此，某同学认为动物细胞与植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的：他设计了一个具体的实验方案如图：
请回答下列有关问题：
（1）实验方案中，步骤A为除去细胞壁得到的 ，步骤B为 。
（2）植物材料经 后形成愈伤组织，诱导该过程的关键物质是 。
（3）进行动物胚胎细胞培养时，需要用胰蛋白酶将 分散成单个细胞：制成的细胞悬液，通常置于含95%空气加5% 的混合气体的培养箱中进行培养。
（4）一般选用传代培养 代以内的细胞用于诱导融合，因为它们具有 。诱导融合的物理法包括 。
下图是某人工鱼塘生态系统能量流动图解(能量单位：J·cm－2·a－1)，请回答下列问题。
(1)如图所示，输入该生态系统的能量主要是由__________固定的太阳能，图中A代表
____________。
(2)植食性动物的能量有________J·cm－2·a－1传递到肉食性动物体内。
(3)草鱼以水草为食，白鲢以绿藻和水草为食，草鱼与白鲢的种间关系是________。调查鱼塘中草鱼的种群密度，最好采用____________法。
(4)由于食性不同，鱼塘中鱼类等生物在高度上具有分层现象，群落的这种空间结构称为____________。
(5)建立“桑基鱼塘”，发展现代生态农业，体现的生态学基本原理是：实现了对能量的________________________________________________________________________。
运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现：用人的细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类染色体则逐渐丢失，只剩一条或几条。右图是人的缺乏 HGPRT 酶突变细胞株（ HGPRT - ）和小鼠的缺乏 TK 酶细胞株（ TK-）融合后并在 HAT 培养液中培养的过程，结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有 3 号染色体或 17 号染色体或两者都有。已知只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可在 HAT 培养液中长期存活与繁殖。
（1）体细胞杂交的优点是 ，过程 ① 常用的生物方法是 。
（2）过程 ② 中，需还要定期用 处理细胞，使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。
（3）从培养过程看， HAT 培养液不仅能提供养料，还起 作用。
（4）从图示结果看，可以确定人的 基因位于 号染体；该方法可以对鼠基因定位吗？_______________
Ⅰ.甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题：
（1）为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的 ，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成 组织，然后经过 形成完整的杂种植株。这种培育技术称为 。
（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指 。
假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是 。
（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
Ⅱ.科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 ，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为 。
（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为 ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过 后进行早期胚胎培养获得。
（3）图中重组囊胚通过 技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的 分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向 后用于疾病的细胞治疗。
请阅读下列几段文字后回答：
（一）A．有人把蚕的DNA分离出来，用一种酶“剪切”下制造丝蛋白的基因，再从细菌细胞中提取一种叫“质粒”的DNA分子，把它和丝蛋白基因拼接在一起再送回细菌细胞中，结果，此细菌就有生产蚕丝的本领。
B．1991年，我国复旦大学遗传所科学家成功的进行了世界上首例用基因疗法治疗血友病的临床实验。
（1）这些实验属于___________工程，所有这些实验的结果，有没有生成前所未有的新型蛋白质？____________。
（2）A段中实验结果的细菌能生产蚕丝，说明__________。在将质粒导入大肠杆菌时，一般要用____________处理该菌，以使处于 ____________ 细胞状态，以便吸收周围环境中的DNA分子。
（3）人类基因组计划（HGP）测定了人体中 ___________ 条染色体的双链DNA分子的脱氧核苷酸序列，B段中血友病基因疗法中有关的染色体是 ____________ 染色体。
（二）科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。
(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与________融合，形成____________细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于__________________________，可大量制备。
(2)与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用________________________诱导融合。
(12分)如图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程，请回答问题。
(1)①过程表示_____________，②过程用到的工具酶是______________。
(2)构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有_____________，③过程常用的方法是_____________，目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是______________。
(3)从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用____________技术，对于转基因成功的细胞II还要进行克隆化培养和____________检测，经多次筛选获得足够数量的该类细胞。
(4)细胞I是_____________，细胞II的特点是__________________________________。
(5)若要预防H7N9禽流感，可用图中的_____________作为疫苗。
请回答下列有关生物工程的问题：
（1）用基因工程的方法提高绵羊的生长速率，可将人的生长素基因导入绵羊的 中，或导入通过 技术形成的重组胚胎中，在体外培养到 期，移入绵羊的子宫内。若要获得同卵双胎或多胎的个体，则应采用 技术和 技术，后者也是胚胎工程的最后一道“工序”。
（2） 技术是单克隆抗体技术的基础。制备单克隆抗体过程，选出的杂交瘤细胞具备 的特点。单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答下列问题。
⑴ 先给小鼠注射HCG，一段时间后，若小鼠血清中检测的抗HCG的抗体，说明小鼠体内产生了_______免疫，再从小鼠的______中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的______细胞融合.
⑵ 培养杂种细胞时,根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基,此外经常会在培养基中加入_______________。培养过程中细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养,CO2的主要作用是维持培养液的________。获得的杂种细胞有________种（只考虑两个细胞融合），应用_________技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到_______________的杂交瘤细胞。
(11分)“白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点。如图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图，请完成下列问题：
(1)培育成白菜—甘蓝植株，采用的技术手段是________。该过程应用的原理是＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(2)要制备“白菜—甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根、发芽能力的________结构，包裹上人工种皮即可。
(3)在d过程培养中，培养基的成分通常包括水、______、有机营养和________等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证__________________。
(4)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是______________．
(5)要获得图中白菜和甘蓝的原生质体，首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。用以下材料和用具：紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等,可除去细胞壁。在实验过程中要选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是
_______________________________________________________(2分)。
（6）采用特异性引物对另两种植物花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种及纯种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1—4 中后代性状不分离的是 。
(10分)下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。
（1）X、Y、Z细胞的名称分别是 、 、_ 。
（2）①过程类似于植物组织培养技术中的 过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较 。②过程的实质是 。
（3）③过程中需用到的生物诱导剂是 。
（4）④处需要筛选，其目的是 。
（5）用32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，细胞质中能测到32P的细胞器有 和 。
下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)__________技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的________，以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是________________________________________________。
（4）选出的杂交瘤细胞具备____________________特点。
（5）淋巴细胞是由动物体__________中的__________细胞分化、发育而。
（6）下图表示从正常人和患者体内获取的P53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P53基因部分区域（见下图），那么正常人的会被切成__________个片段，而患者的则被切割成长度为__________对碱基的两种片段。如果某人的P53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是__________（以P+表示正常基因，Pn表示异常基因）
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