GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：
（1）完成图中A过程必需的工具是 ；该基因治疗的受体细胞为 。
（2）若要构建含GDNF基因的表达载体，则需选择图中的 限制酶进行酶切。
（3）限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。
（4）下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述，错误的是_______（多选）。
A．限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
B．限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同
C．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
D．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
（5）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，若是正向连接的重组载体，其产生的酶切片段数为 个，反向连接的重组载体产生片段有 （多选）。
①100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有 和 ．
（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图所示．为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 ．
（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和 DNA连接酶．
（4）反转录作用的模板是 ，产物是 ．若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术．
（5）基因工程中除质粒外， 和 也可作为运载体．
（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 ．
某研究小组欲将已知抗除草剂基因导人原生质体培育抗除草剂大豆。请回答下列问题：
（1）为获得大量抗除草剂基因，可通过_______技术进行扩增，也可将其连接到_______上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体_________。酶混合液需通过_________灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在_________中进行。
（3）可通过___________方法，直接将抗除草剂基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出__________，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗除草剂基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行___________，验证抗除草剂基因是否被整合到受体的细胞中并转录。
有关遗传变异的叙述正确的是（ ）
| A．基因型为Dd的豌豆，能产生雌雄两种配子，且数量比接近1∶1 |
| B．在基因工程中使用的DNA连接酶的作用是将互补的碱基连接起来 |
| C．自然界中的变异主要是基因重组，所以基因重组是生物变异的根本来源 |
| D．将基因型为Aabb的玉米的花粉授到基因型为aaBb的玉米的雌蕊的柱头上，所结籽粒胚的基因型为AaBb，Aabb，aaBb，aabb |
【生物----选修3：现代生物科技专题】
抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。回答问题：
（1）过程①是 ，该过程常用的方法是 。
扩增抗凝血酶 Ⅲ蛋白基因经常采用 技术。
（2）过程②包括 技术和 技术；可用 技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊。
（3）若要检测牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用 技术。
（4）如果检测发现抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被导入了受精卵，但却没有检测到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那应该考虑分别位于目的基因首端和末端的 没有设计好，应从这方面考虑改善。
下列有关实验方法或检测的叙述，正确的是
| A．用差速离心法分离叶绿体中色素和细胞质中各种细胞器 |
| B．用健那绿和吡罗红染色观察DNA和RNA在细胞中的分布 |
| C．用含有3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸的培养液培养洋葱根尖分生区细胞，可以在细胞核和线粒体处检测到较强的放射性，在核糖体处则检测不到放射性 |
| D．用人的胰高血糖素基因制成DNA探针，检测人胰岛B细胞中的mRNA，可形成杂交分子 |
【生物—选修3：现代生物科技专题】
青蒿素是治疗疟疾的重要药物。研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径（如图中实线方框内所示），并且发现酵母细胞也能够产生合成青蒿素的中间产物FPP（如图中虚线方框内所示）。结合所学知识回答下列问题：
（1）疟疾俗称“打摆子”，是由疟原虫引起的寒热往来症状的疾病。当疟原虫寄生在人体中时，会引起人的免疫反应，使 细胞产生淋巴因子。同时B细胞在受到刺激后，在淋巴因子的作用下增殖分化成 细胞，产生抗体。
（2）根据图示代谢过程，科学家在培育能产生青蒿素的酵母细胞过程中，要向 中导入的基因是 ，具体操作中可利用 技术检测转基因生物的DNA上是否插入目的基因。
（3）构建基因表达载体时，用不同类型的 切割DNA后，可能产生 末端，也可能产生 末端。
（4）实验发现，酵母细胞导入相关基因后，该基因能正常表达，但酵母菌合成的青蒿素仍很少，根据图解分析原因可能是 。
为获得纯合高蔓抗病黄瓜植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传。据图分析，错误的是
| A．若F1为高蔓抗病，则高蔓和抗病性状为显性性状 |
| B．过程①的自交代数越多，纯合高蔓抗病植株的比例越高 |
| C．过程②可以取F1植株的花药作培养材料 |
| D．过程③中有染色体数目减半的过程 |
基因工程和植物细胞工程技术在科研和生产实践中有广泛应用，请据图回答：
（1）图中③④过程是利用了植物的 技术，其原理是 ，该过程须在无菌条件下进行，培养基中除加入营养物质外，还需添加________等物质，作用是_________。
（2）若要获取转基因植物人工种子，需培养到________阶段，再进行人工种皮的包裹；如用植物细胞实现目的基因所表达的蛋白质类药物的工厂化生产，培养到_______阶段即可。
（3）目前可采用茎尖组织培养技术来进行作物脱毒，原因是 。
科学家把苏云金杆菌的抗虫基因导入到棉花细胞中，在棉花细胞中抗虫基因经过修饰后得以表达。下列叙述的哪一项不是这一技术的理论依据（ ）
| A．所有生物共用一套遗传密码子 |
| B．基因能控制蛋白质的合成 |
| C．苏云金杆菌的抗虫基因与棉花细胞的DNA都是由四种脱氧核苷酸构成的 |
| D．苏云金杆菌与棉花有共同的原始祖先 |
下列有关基因工程叙述错误的是（ ）
| A．基本原理是DNA具有双螺旋结构以及遗传信息传递和表达方式相同 |
| B．最常用的载体是大肠杆菌的质粒 |
| C．工具酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶 |
| D．该技术人为地增加了生物变异的范围，实现种间遗传物质的交换 |
现有某作物资源包括: ①高产、感病； ②低产、抗病； ③高产、晚熟等纯合品种。为满足不同地区及不同环境条件下的栽培需求，育种专家要培育3类品种：A.高产、抗病；B.高产、早熟；C.高产、抗旱。下述育种方法可行的是
A．利用①、③品种间杂交筛选获得A
B．对品种③进行染色体加倍处理筛选获得B
C．A、B和C的培育只能采用诱变育种的方法获得
D．用转基因技术将外源抗旱基因导入③中获得C
科研人员培育出了比普通大豆铁含量高60%的转基因大豆，改良了大豆的营养品质。下图为培育转基因大豆过程的部分示意图。潮霉素可破坏各种细胞中核糖体的功能。请回答：
（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，图中A步骤是________，用到的载体是____质粒。
（2）获取到铁蛋白基因后常用____技术进行扩增，该技术用到的酶是____。
（3）为筛选出含重组质粒的愈伤组织，应在培养基l中添加适量的__________。目的基因进入受体细胞（如：愈伤组织细胞）内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为_ ___。
（4）培养基2中发生的过程为____ 。检测培育转基因大豆的目的是否达到，需要检测转基因大豆____。
端粒是真核细胞染色体末端的特殊结构，由DNA重复序列和结合蛋白组成。研究发现，随细胞不断增殖，端粒逐渐缩短。当细胞端粒缩至一定程度时，细胞停止分裂。端粒酶由RNA和蛋白质组成，其中RNA是一段模板序列，可指导合成端粒DNA的重复序列。人体内大多数癌细胞都表现出较高的端粒酶活性。请分析回答：
（1）端粒酶的作用相当于HIV病毒中的 酶。结合端粒酶的作用推测，癌细胞表现出恶性增殖而不衰老死亡的特点可能是由于 。
（2）和端粒酶的化学成分最接近的细胞器是_______。
A、线粒体 B、核糖体 C、中心体 D、内质网 E、高尔基体 F、溶酶体
（3）双歧杆菌是人体肠道内的自然菌群，具有抗肿瘤作用。研究人员从双歧杆菌中提取出双歧杆菌脂磷壁酸（LTA），加入细胞培养液中培养人白血病细胞株HL-60，检测LTA对细胞增殖的影响。LTA浓度和实验结果如图1所示。
①此实验中还有一组对照实验，其处理是_________________。
②选用LTA浓度为40μg/ml的培养液中培养的细胞，测定端粒酶活性，结果如图2所示。综合两个实验结果，可以得出的结论有：
结论一：LTA能通过_______________来抑制_______________。
结论二：______________。
结论三：______________。
[生物——选修3:现代生物技术]
利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。利用该技术生产的药用蛋白具有 表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶DI等 医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：
（1）上图中A表示目的基因，在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用 技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了上图中的____（填字母）。
（2）基因表达载体的构建是基因工程的核心，其中的是RNA聚合酶识别和结合的部位，它的基本组成单位是__________标记基因的作用是为了鉴别
（3）将目的基因导人受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用____方法，棉花受体细胞若为体细胞，则⑤表示的生物技术是______，在②过程中的受体细胞一般是
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