［选修模块3：现代生物科技专题］
回答下列有关问题：
（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用____________工程技术对其进行改造时，通过设计____________，推测____________，进而确定____________，据此获得基因，从而得到新的植酸酶，之后还要对该酶的功能进行鉴定。
（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是________。获得转基因植株的完整过程包括：获得外源植酸酶基因→构建基因表达载体→导入大豆细胞→转植酸梅基因的大豆植株再生→_________________。
（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过____________转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过____________方法，从而一次得到多个转基因猪个体。
埃博拉病毒（EBO）中EBOV是一种烈性的、泛嗜性的病毒，它首先破坏吞噬细胞，其次是肝、脾等细胞，进而导致血管通透性增加，出现严重的出血热现象。目前尚无针对该病毒的特效药或疫苗。
（1）EBOV感染者的血清中很难形成高浓度的抗体，这是因为 。
（2）较难制作EBO疫苗的原因与其遗传物质的种类以及表达方式有关。EBO病毒容易变异，这是因为 。
（3）下图示利用“细胞技术”研制抗击EBO的药物与疫苗：过程①获得的甲细胞是 细胞；图中所用瘤细胞的作用是 。要获得纯净的单一品种抗体，上述操作的要点是 。
（4）还可以利用转基因技术生产EBO蛋白疫苗。EBO结构和基因组如下图所示。EBO衣壳外的包膜上有5种蛋白棘突（包括GP蛋白和VP系列蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。该技术的目的基因是 。
（5）腺病毒（基因E与复制、转录有关；基因L是腺病毒衣壳基因）具有弱致病性，但病毒在人体细胞内增殖会导致正常细胞裂解、死亡。因此，需要对腺病毒进行改造。下图示腺病毒基因组、转基因技术生产EBO蛋白疫苗与重组病毒粒子疫苗的基本过程。
以EBO病毒包膜蛋白作为疫苗比较安全的原因是 。生产含目的基因重组病毒粒子作为目的基因的运载体，优点是 ；为保障安全，基因重组病毒粒子需要除去自身原本的一些基因，改用辅助质粒携带这些基因。则除去的基因主要是 两类基因。
（6）辅助质粒携带EBO病毒上的这些基因，与EBO携带一样，均能在真核细胞中表达，说明 。
应用生物工程技术能获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答问题：
（1）在培育转人生长激素的基因牛过程中，①过程需要的工具酶是________，②过程常用的方法是__________________________。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用_____________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
（3）在制备单克隆抗体过程中，需将prG导入Ⅱ，则Ⅱ应为___________，筛选出的Ⅲ在体外培养时，必须培养在含5%的CO2的培养箱中，CO2的作用是______________
（4）在抗虫棉培育过程中，⑤过程采用的技术中有两个关键阶段，分别为____________和___________。检验抗虫棉的DNA是否插入抗虫基因，可以采用____________技术。
关于基因工程的叙述，错误的是（ ）
| A．利用体外DNA重组技术定向改造生物的遗传性状 |
| B．在细胞水平上设计施工，需要限制酶、DNA连接酶和运载体 |
| C．打破物种界限获得人们需要的生物类型或生物产品 |
| D．抗虫烟草的培育种植降低了生产成本，减少了环境污染 |
依下图，有关工具酶功能的叙述中，不正确的是（ ）
| A．切断a处的酶是限制性内切酶 |
| B．切断b处的酶是解旋酶 |
| C．连接b处的酶为DNA连接酶 |
| D．限制性内切酶和DNA连接酶均作用于a处 |
【生物——选修3：现代生物科技专题】
嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：
Ⅰ．利用大肠杆菌表达BglB酶
（1）PCR扩增bglB基因时，选用 基因组DNA作模板。
（2）右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。
（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 。
Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响
（4）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。
A．50℃ B．60℃ C．70℃ D．80℃
Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。
（5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选）。
A．仅针对bglB基因进行诱变
B．bglB基因产生了定向突变
C．bglB基因可快速累积突变
D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变
（选修三——现代生物科技）
下图表示利用某种细菌中提取的抗虫基因培养抗虫玉米的大致过程。请回答下列问题：
（1）A过程所需的酶是 。构建重组质粒时，将抗虫基因连接到Ti质粒的 上。将重组质粒导入土壤农杆菌的方法是 。图中D过程的方法称为 。
（2）图中重组质粒，除了含有目的基因外，还必须有 和复制原点；培育转基因玉米成功的标志是 。
（3）E过程需要运用 技术，经过 过程最终形成植株，其依据的原理是 。
如图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0．7Kb）、PvuⅠ（0．8Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1kb=1000个碱基对，请回答下列问题：
（1）片段D为目的基因中的某一片段，则DNA聚合酶和DNA连接酶的作用部位依次是______________（填数字）。
（2）图中能作为目的基因运载体最理想的质粒是______________ （填A/B/C），请据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是______________、______________。
（3）用EcoR I完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒，并进行电泳观察，可出现长度分别为1．1kb和______________kb的两个片段，或者长度分别为______________的两个片段。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计）。
（4）将分别用限制酶PvuⅠ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作，之后，受体细胞的类型（对抗生素表现出抗性R或敏感性S，蓝白代表菌落颜色）包含______________ （多选）。
A．ApR、蓝色 B．ApR、白色 C．ApS、蓝色 D．ApS、白色
（5）动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是_____________。
A．受精卵能使目的基因高效表达
B．受精卵可发育成动物个体
C．受精卵基因组更易接受DNA的插入
D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作
下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，错误的是
| A．表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 |
| B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点 |
| C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 |
| D．启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 |
在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
| A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 |
| B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 |
| C．将重组DNA分子导入烟草原生质体 |
| D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 |
下列有关基因工程的叙述正确的是
| A．质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解 |
| B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同 |
| C．没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞 |
| D．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的 |
DNA指纹技术是用限制酶切割样品DNA后，并通过电泳等技术把切割后的DNA片段按大小分开。如图是一对夫妇和三个子女指纹的DNA片段，据表分析不正确的是
| A．基因Ⅰ和基因Ⅱ可能位于一条染色体上 |
| B．基因Ⅱ与基因Ⅳ可能位于一条染色体上 |
| C．基因Ⅲ可能位于X染色体上 |
| D．基因Ⅴ不可能位于Y染色体上 |
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：
（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 （基团）连接。
（2）若用限制酶Sma Ⅰ完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 末端，其产物长度为 。
（3）若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有 种不同DNA片段。
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加 的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是 。
（5）有关质粒描述错误的是（ ）
A、质粒是能够自我复制的环状DNA分子
B、质粒是唯一的运载体
C、质粒上有多个酶切位点
D、质粒可在宿主外单独复制
为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传。据图分析，正确的是（ ）
| A．图中的筛选过程不会引起番茄种群的进化 |
| B．①过程说明，抗病与高蔓均为显性性状 |
| C．过程②可以选择F1任一植株的适宜花药作培养材料 |
| D．过程③体现了所有高等生物细胞都具有全能性 |
研究发现，转基因抗虫植物能杀死昆虫的原理是该基因控制合成的蛋白质被昆虫食用后，在消化道中被蛋白酶水解产生具有毒性的活性肽，与昆虫肠道细胞上的受体结合，使细胞渗透压失衡，最终导致昆虫死亡。下图表示利用某种细菌中提取的抗虫基因培养抗虫玉米的大致过程。请回答下列问题：
（1）农杆菌中的Ti质粒上T-DNA具有___________的特点。图中D过程的方法称为__________。A过程所需的酶是___________。
（2）图中重组质粒，除了含有目的基因外，还必须有___________；培育转基因玉米成功的标志是_________；目的基因能否遗传给后代常采用的检测方法是______ _____。
（3）E过程需要运用__________技术，经过__________过程最终形成植株，其依据的原理是__________。在此操作过程中，经常使用生长素和细胞分裂素，当生长素与细胞分裂素的比值大于1时，可促进_______，当生长素与细胞分裂素的比值小于1时可促进_____ __。
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