根据所学知识回答问题：
（1）基因工程中基因表达载体除包括目的基因外，还必须有__________及标记基因等。
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的___________中。植物组织培养的主要原理是植物细胞具有____________，具体过程是在____________和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过____________产生愈伤组织，最终形成完整的植株。
（3）在哺乳动物的核移植实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到____________阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项） 。
下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程,请据图分析回答下列问题。
（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射 ：超数排卵的母牛发情后,既可以通过配种或人工授精获得胚胎,也可以通过体外受精的方法获得胚胎。若要通过体外受精获得胚胎,则在体外受精前,要对精子进行 处理。
（2）A到E中,牛胚胎移植的适宜时期是 。
（3）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对早期胚胎进行 处理,再植入受体内。
（4）利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:该奶牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、终止子、 、 和复制原点等;该过程用到的工具酶有 ：该基因表达载体应导入的受体细胞是 。
科研人员利用相关技术改变了胰岛素B链的第9位氨基酸，从而避免了胰岛素结合成无活性的二聚体形式。下列相关叙述中，不正确的是
| A．胰岛素的本质是蛋白质，不宜口服使用 |
| B．可通过测定DNA的序列确定突变是否成功 |
| C．对胰岛素结构的改造属于蛋白质工程 |
| D．该过程的操作对象是胰岛素分子 |
采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。下列有关叙述，正确的是
| A．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，小于凝血因子氨基酸数目的3倍 |
| B．可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 |
| C．在该转基因羊中，人凝血因子基因只存在于乳腺细胞，而不存在于其他细胞中 |
| D．人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA |
基因治疗是指
| A．对有缺陷基因的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的 |
| B．把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 |
| C．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常 |
| D．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的 |
下列关于基因工程载体的叙述中，正确的是
| A．构建基因文库时不需要载体 | B．载体都是环状DNA分子 |
| C．有一至多个限制酶切割位点 | D．只来自于原核细胞 |
下列用于判断目的基因是否转移成功的方法中，不属于分子检测的是
| A．通过害虫吃棉叶看其是否死亡 |
| B．转基因生物基因组DNA与DNA探针能否形成杂交带 |
| C．转基因生物中提取的mRNA与DNA探针能否形成杂交带 |
| D．转基因生物中提取的蛋白质能否与抗体形成杂交带 |
下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是
| A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 |
| B．限制性核酸内切酶的活性受温度影响 |
| C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNA |
| D．限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 |
某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表，限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示，下列有关说法正确的是
| 酶a切割产物（bp） |
酶b再次切割产物（bp） |
| 2100 1400 1000 500 |
1900 200 800 600 1000 500 |
A．在该DNA分子中，酶a与酶b的识别序列分别有3个和2个
B．酶a与酶b切出的黏性末端不能相互连接
C．酶a与酶b切断的化学键不相同
D．用酶a切割与该线性DNA碱基序列相同的质粒，得到4种切割产物
胰岛素 A、B 链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。 图 1 是该方法所用的基因表达载体，图2 表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程（融合蛋白A、B 分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白）。 请回答下列问题:
（1）图1 基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。
（2）图1 中启动子是 酶识别和结合的部位,有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
（3）构建基因表达载体时必需的工具酶有 。
（4）β-半乳糖苷酶与胰岛素A 链或B 链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于 。
（5）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的 A 链或 B 链,且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段，这是因为 。
（6）根据图2 中胰岛素的结构，请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。 你的推测结果是 ，理由是 。
人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大，通常从人血中提取。但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
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已经甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题：
（1）为了获得丙种蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙种蛋白质的______序列，据此可利用_____ _____方法合成目的基因。获得丙种蛋白质的基因还可用__________和_______方法。
（2）在利用上述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需要使用________酶和________酶。
（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗________的危害。
（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子________（填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。
栽培的玉米品种抗旱、抗倒伏能力差。假设A、b代表玉米的抗旱、抗倒伏优良基因，这两种基因是自由组合的。现有AABB、aabb两个品种，为培育优良品种AAbb，可采用的方法如右图所示。请回答相关问题：
（1）经过①、②、③过程培育出新品种的育种方法称之为 。
（2）方法④还能够从其他物种获取目的基因转入玉米，该方法的优点是 。
（3）⑦过程育种方法为 。
（4）⑥过程在实验室最常用试剂的作用机理是 。
（5）①、⑤、⑥过程育种方法的优点是 。
下列不属于基因工程的是（ ）
| A．培养出抗烟草花叶病的番茄植株 |
| B．在大肠杆菌中获取人的干扰素 |
| C．培养出兼有鲤鱼与鲫鱼特点的鲤鲫移核鱼 |
| D．利用“工程菌”生产乙肝疫苗 |
科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以农杆菌的质粒为载体，采用转基因方法培育出了汞吸收能力极强的转基因烟草。下列有关该烟草培育的说法正确的是
| A．金属硫蛋白基因需插入到质粒的T-DNA上，才能转移到受体细胞中 |
| B．为培育出转基因烟草植株，应选择的受体细胞一定是烟草的受精卵 |
| C．同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒，因此不具有专一性 |
| D．转基因烟草与原烟草相比基因组成发生变化，导致两者出现生殖隔离 |
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