人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV) 等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下
a．将人体血清白蛋白基因导入将来发育成雌性奶牛的胚胎细胞，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
(1)重组细胞①和②哪一个实现了基因的重组？ 。
(2)实验过程a的关键步骤是 。
(3)实验过程b利用的技术是 ，从牛卵巢中取出的卵母细胞需要体外培养到 时期再去核。
(4) 实验过程c形成的早期胚胎一般是 胚胎，胚胎工程操作中最后环节是 。
(5)血清白蛋白基因表达包括 和 两个过程。
(6)上述整个过程实现了 工程、 工程和胚胎工程的综合应用。
(9分)图甲为“番茄—马铃薯”的培育过程示意，图乙为利用小鼠制备乙肝病毒单克隆抗体过程，根据图示回答问题：
(1)图甲的培养基中除了含有一定的营养物质之外,还必须含有 从而促进脱分化和再分化；分化的实质是 。
(2)图甲中要培养突变体通常选择 细胞进行处理，原因是 ，从理论上说杂种植株应该同时具有番茄和马铃薯两种生物的性状，因为 。
(3)图乙在获得B淋巴细胞之前，对小鼠进行的处理是 ，使小鼠发生 反应，生成相应细胞。
(4)图乙所示①②③④过程表示筛选过程的有 ，两个过程中均有细胞杂交，依据的原理是 。
【生物——选修3：现代生物科技专题】 。
（1）对于基因工程来说，其核心是 ；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是 。
（2）植物体细胞杂交过程有两个关键，一个是在把植物细胞杂交之前，必须
；另外一个是 。
（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞，另外一种是 ；诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、电激、 等。
（4）胚胎干细胞在功能上具有发育的 性，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生 。
（5）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
①进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
②为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
③采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________；在PCR反应过程中，有一个环节是从较高的温度冷却到相对较低的55℃左右，其作用是 。
利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答相关问题：
注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的 有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加 则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（2）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。
实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到 培养基上；
② ；
③ 。
预期实验结果和结论： 。
抗菌肽（selvsin）能治疗癌症，不同浓度抗菌肽治疗效应不同，高浓度抑制细胞增殖，低浓度却促进细胞凋亡。表甲示抗菌肽对肝癌细胞作用的实验结果（3H-TdR即含3H放射性标记的胸腺嘧啶，活细胞数目取决于细胞增加数目与细胞凋亡数目相对值），图乙示抗菌肽的人工合成流程。请回答
表甲 梯度浓度的抗菌肽对肝癌细胞吸收3H-TdR及活细胞数目的影响（24h内）
| 抗菌肽浓度（ug/ul） |
0 |
1 |
10-1 |
10-2 |
10-3 |
10-4 |
10-5 |
|
| 实验组别及研究内容 |
||||||||
| 一 |
3H-TdR摄取量 |
4000 |
1100 |
1180 |
2400 |
4120 |
4310 |
4220 |
| 二 |
活细胞总数 |
100 |
140-153 |
180-200 |
212-240 |
148-160 |
80-92 |
20-40 |
（1）根据表甲实验一的数据分析
①抗菌肽能治疗癌症的原理是抑制细胞分裂周期中 期内 的合成从而限制细胞的增殖。
②最佳抑制作用对应的抗菌肽浓度为 （ug/ul）左右。
（2）癌细胞增殖的同时，细胞也会“自溶”出现凋亡。
①这种现象体现了膜具有 特点，当抗菌肽的浓度超过10-2（ug/ul）后，癌细胞增殖数目 凋亡数目。
②细胞凋亡的本质是 。
（3）图乙中甲醇诱导表达体现了表现型与基因的关系是 。分离与纯化抗菌肽常使用的方法有 。
【生物——选修3现代生物科技专题】人们发现小型猪的器官可用来替代人体器官进行移植，但小型猪器官表面抗原仍可引起免疫排斥反应。如图为科学家将小型猪器官表面抗原基因（Anti基因）“反向处理”并人工合成reAnti基因（ Anti基因的模板链和reAnti基因的模板链碱基序列互补），把reAnti基因转入猪纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图。请回答下列问题：
（1）若使reAnti基因和Anti基因在转基因克隆猪的同一细胞内转录，应在人工合成的reAnti基因的首段连接 。
（2）图中转基因克隆猪不含有猪抗原的实质是reAnti基因抑制了Anti基因的 （填“转录”或“翻译”）过程。
（3）图中①、②过程涉及的现代生物技术中，核心步骤是 。
（4）从猪中取出胎儿成纤维细胞，用 酶处理，然后进行分散培养。培养时，除需要适宜的营养、温度和PH、适宜的气体等条件外，还需要加入 等天然成分。
（5）过程④需要用到 法。
（6）图中④、⑤、⑥过程涉及的现代生物技术依次为 技术、 技术和 技术。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（１）过程①所需要的酶是 和 。
（２）在过程②中，用 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于95%的空气和 的混合气体环境中培养。
（３）在过程③中，可用 （激素）处理以获取更多的卵（母）细胞，还可从刚宰杀的山羊 中获取。
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
（5）下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是
| A．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 |
| B．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中 |
| C．种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性 |
| D．转基因植物的抗除草剂基因可能通过花粉传播到杂草中 |
甘蔗含糖量高．是生产燃料酒精的优质材料。为了提高酒精产量，需要优质甘蔗品种 和具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌作为理想的酒精发酵菌种。根据所学知识回答下面的问题。
(1)如果要用甘蔗的外植体作为材料对甘蔗进行大规模种植，在对甘蔗外植体细胞进行接种前，需要进行 ， 两项工作。
(2)在外植体培养获得幼苗的过程中，需要 与 等激素的作用。
(3)为了获得理想的酵母菌菌种，可以对野生菌种进行 。然后在 (A固体 B液体 C选择 D鉴别)培养基上进行培养，该培养基要比基本培养基额外添加 ，并且将pH (填“调高’’或“调低")。在该培养基中挑选 菌落，即为耐高糖、耐酸特性的突变酵母菌。
(4)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入 以催化DNA链的延伸。
(生物——选修3：现代生物科技专题)
请回答下列有关生物工程方面的问题：
（1）目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型。在哺乳动物的核移植实验中，一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行 处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至 ，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。
（3）将已免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过 培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过____________筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。
（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、 、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的 （填“受精卵”或“乳腺细胞”）。
科学家对鼠源杂交瘤抗体进行改造，生产出效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：
（1）将___________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞能产生抗该抗原的抗体。
（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合的杂交瘤细胞具有____ __________________的特性。
（3）单克隆抗体制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合的细胞工程技术手段。动物细胞培养的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有_____。在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用_____处理组织细胞使之分散开。
（4）鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有________________的特点。
（5）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠-人嵌合抗体，属于蛋白质工程的范畴，图示过程是根据预期的___________设计___________ 最终必须对_____进行操作。
下图列举了几种植物的育种方式，请据图同答相关问题。
(1)甲育种方式称为________ 。
(2)通过丁种方式可以获得脱毒苗，培养过程中c常常取用茎尖的原因是________。
(3)乙方式通常用射线处理植物的愈伤组织能获得较好效果，原因是________。
(4)丙方式将外源目的基因导人受体植物细胞，最常采用的方法是________。在通过丙方式获得转基因植株的过程中，核心步骤是________________________。
(5)甲、丙两种育种方式与传统杂交育种相比，其优点是________________________。
普通番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因，控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄易软化，不耐储藏。抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不再产生多聚半乳糖醛酸酶，从而使番茄长时间抗软化，容易储存和运输。下图是通过基因工程培育抗软化耐储藏番茄的过程及原理。请分析回答下列问题： 
（1）基因工程的核心是构建 ，其组成包括启动子、终止子、目的基因和 等。
（2）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是 。
（3）图1中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞，需要经过 技术获得转基因番茄，为防止杂菌污染，这个过程需要在 条件下进行，细胞先经 形成愈伤组织，后经再分化形成丛芽和根。
（4）根据图2分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出的mRNA结合形成 ，从而阻断了多聚半乳糖醛酸酶基因的表达过程。
应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：
（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶__________和 ，②过程常用的方法是______。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有____________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用胚胎分割和______技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是________细胞，Ⅲ代表的细胞具有_______的特点。
（4）在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______，⑤过程采用的技术______。
下图是植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：
（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步聚最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用 分解植物的细胞壁。
（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是：利用 等（写全给分）促使原质体融合；化学方法是：用 等试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。
（3）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以 。目前，动物细胞融合技术最重要的用途是 。
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