应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品，是生物科学技术转化为生产力的重要体现。
请回答下列问题：
（1）在培育转基因牛的过程中，需要的工具酶是 和 ，基因工程的核心步骤是 。在基因表达载体中，目的基因的首端必须含有 ，它是 识别和结合的部位。
（2）动物细胞培养过程中，培养环境中除须提供O2外还须混入一定量的CO2，CO2的主要作用是 。为保证被培养的动物细胞处于无菌、无毒的环境，可以在细胞培养液中添加一定量的 ，以防培养过程中的污染。
（3）单克隆抗和血清抗体相比较，其最主要的优点在于 。
（4）植物组织培养的关键步骤为 和 。
（5）动物体细胞核移植技术得到的动物，称为 动物，试管动物需要通过 、早期胚胎培养和胚胎移植步骤获得。
（6）生态工程建设所遵循的基本原理有：物质循环再生原理、 原理、 原理、整体性原理和系统学和工程学原理。
(12分)某二倍体植物花的颜色由两对非等位基因A（a）和B（b）调控。A基因控制色素合成（A：出现色素，AA和Aa的效应相同），B为修饰基因，淡化颜色的深度（B：修饰效应出现，BB和Bb的效应不同）。现有亲代P1（aaBB、白色）和P2（AAbb、红色），杂交实验如图：
（1）若对F1植株进行花药离体培养，得到的基因型是aaBB的植株出现的几率是 。
（2）F2粉花植株中杂合体出现的几率是 。若对杂合的红花植株幼苗用秋水仙素处理，那么形成的植株为 倍体。
（3）F2白花植株的基因型有 种，其中纯合体所占比例是 。
（4）F2白花植株中A的基因频率是 。
（5）请写出题干中杂交实验对应的遗传图解 。
下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。
(1)X、Y、Z细胞的名称分别是________、________、________。
(2)①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较________。②过程的实质是________。
(3)③过程中需用到的生物诱导剂是_____________________
___________________________________________________。
(4)④处需要筛选，其目的是______________________________
__________________________________________。
(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性32P的细胞器是________、________。
生物工程在人类遗传病的研究和治疗有较大的突破。阅读下列资料，回答相应问题。
资料一 通过转入特定基因可将体细胞诱导形成多能干细胞（iPS细胞），可以产生各种类型的体细胞。下图是应用iPS细胞技术治疗镰刀型细胞贫血症的技术流程，请回答：
（1）过程①是体外培养由患者身体分离的体细胞，需要在配制的 培养基中，加入一定量的血液、血浆。在上述培养液中除加入一定量的抗生素外，还应注意 操作，以防止培养过程的污染。
（2）过程②中，科研人员首先要利用PCR技术，把所需的c-Myc（c-Myc属于Myc家族的原癌基因）等四种目的基因扩增，然后将目的基因与逆转录病毒结合，以构建 ，然后导入人体的体细胞，诱导形成iPS细胞，并在 培养箱中依次进行 培养、 培养，获得iPS细胞系。
（3）科研人员在iPS细胞中，用健康的基因取代了镰刀型细胞贫血症的致病基因，并使其定向 成造血干细胞，移植入患者体内，使患者能够产生正常的红细胞。
资料二 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
（4）子代大鼠如果 和 ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（5）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是 、早期胚胎培养和胚胎移植。
在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答相关问题：
注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的________________有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加_____________则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（2）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。
实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到__________培养基上；
②________________________________________________________。
③________________________________________________________。
预期实验结果和结论：
④________________________________________________________。
⑤________________________________________________________。
⑥________________________________________________________。
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题：
（1）为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用 酶和 酶去除细胞壁，获得具有活力的 ，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成 组织，然后经过 形成完整的杂种植株。这种培养技术称为 。
（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指 。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是 。
（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
回答下列有关生物工程的问题：
(1)在基因工程中，利用 筛选出含目的基因(或重组DNA分子)的受体细胞；基因工程最终获得成功的标志是
(2)在植物组织培养的再分化过程中，若要将愈伤组织诱导生根，则植物生长调节剂的浓度配比应为生长素浓度 (填“大于”、“小于”或“等于”)细胞分裂素浓度。
(3)动物细胞培养要取得成功，首先要对培养液、培养用具进行 处理，在使用合成培养基时，还应该在培养基中加人 等天然成分以支持生长。动物细胞培养时，需要一定的气体环境，其中C02的主要作用是 。
(4)在胚胎工程中，若要获得多个卵细胞，则需对母畜作 处理，若要出现“不同的母体产下性状相同的后代”这一现象，则应使用的技术为 。
（生物选做题 选修三：现代生物科技专题）以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。
（1）上图中过程①的完成采用的方法有： ，依据的生物学原理 ；
（2）过程④要用到的酶有 ，过程⑥采用的方法叫 。
上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。
| 分子量（kb） |
1．0 |
2．0 |
3．0 |
4．0 |
5．0 |
6．0 |
7．0 |
8．0 |
9．0 |
10．0 |
| 酶M |
+ |
|
|
|
+ |
|
|
|
|
+ |
| 酶N |
|
|
|
|
|
|
+ |
|
+ |
|
| 酶M+酶N |
+ |
+ |
+ |
+ |
|
+ |
|
|
|
|
| 凝胶电泳结果（１kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在 |
（3）该质粒长度为 kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有 、 个。
（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
（5）在表达载体中，启动子的作用是： 识别和结合的部位，驱动V1基因的 。
人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。
大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）重组细胞①和②中 （①／②）实现了基因的重组。
（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
（3）实验过程b利用的技术是 ，胚胎工程操作中最后环节是 。
（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型（相同／不同） ，理由是 ，此项技术称为 。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中作为饲养层的是 细胞。
（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及 等物质
下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。
（1）Z细胞既具备X细胞 的特点，又具备Y细胞 的特点。
（2）①过程类似于植物组织培养技术中的 过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较 。
（3）④处需要筛选，其目的是筛选出 。
Ⅰ、马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答。
(1)马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可将马铃薯茎尖接种在培养基中，培养基中添加生长素和细胞分裂素，诱导离体细胞经过_______________和_____________完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。此过程说明植物细胞具有________________。
(2)为获得抗病毒的马铃薯植株，往往采用转基因技术，将病毒复制酶基因转移到马铃薯体内。其过程大致如下图所示。
①上述过程中，将目的基因导入马铃薯细胞使用了______________法。导入农杆菌时，首先要构建基因表达载体，这里需要的工具酶有_______________和_____________，还要用________处理土壤农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。目的基因导入马铃薯细胞后，是否可以稳定维持和表达，要通过检测与鉴定，马铃薯的DNA上是否插入了目的基因的检测方法是_______________________________,目的基因是否转录出了mRNA的检测方法是_______________________，目的基因是否翻译成蛋白质的检测方法是__________________________；通过做抗病毒接种实验，可以检测马铃薯是否具有抗病毒的特性，属于________水平的检测。
②该转基因马铃薯产生的配子中____________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。
Ⅱ、1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请根据图回答问题：
(1)病原体注入小鼠体内后，要经过__________细胞处理后形成抗原—MHG复合体，才能被免疫细胞识别。
(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后以__________________作诱导剂，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养，获得的杂交瘤细胞具有的特点是：
___________________________________________________________。
(3)单克隆抗体的特点是_____________________________________________________。
两场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。
请回答下列问题：
(1)小白鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有 的特点，融合的细胞要在选择培养基上培养筛选出 。
(2)B淋巴细胞和T淋巴细胞都是起源于 细胞。这种相同细胞的后代,在形态、结构和生理功能上产生稳定差异的过程,叫做 。
(3)鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过 （有丝/减数）分裂方式大量繁殖。细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？ ；要观察融合后的细胞中的染色体形态、数目,可用一定浓度的 处理。
(4) 融合的细胞具有两种细胞的特性,即 和 ；单克隆抗体的优点是 。
在植物组织 培养过程中,激素的添加已成为一种常规的实验手段 ,在植物组织培养过程中已研究过的植物激素有:生长素、细胞分裂素、赤霉素等。下表为某同学为研究激素的使用顺序对实验结果的影响，请回答相关问题：
| 使用顺序 |
实验结果 |
| 先使用NAA, 后使用KT |
有利于细胞分裂，但细胞不分化 |
| 先使用KT, 后使用NAA |
A |
| 同时使用 |
B |
（1）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 和 的关键性激素。该实验中属于细胞分裂素的是 。
（2）请将表格中空白处A和B补充完整，A为 ，B为 。
若NAA和KT的用量比值适中时，促进 的生长。
（3）用于离体培养的植物器官或组织称为 。若该实验材料为菊花，则应对其进行 （消毒/灭菌）。
（4）接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养环境应注意调节合适的 和 。接种过程中要注意在 旁进行。
如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题。
(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是__________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是__________。
(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。
(3)图3中过程①是植物细胞形成__________的阶段，该阶段所用的酶是__________。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________。
在20世纪初，科学家用植物体细胞杂交的方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄马铃薯”杂种植株。如下图，其中①——⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
（1）实现过程②的技术是________。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为__________。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是_____________，其中过程④相当于____________过程，⑤涉及的分裂方式为_______________。
（3）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含__________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？__________。
（4）如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是__________________________________。
（5）若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，那么该方案的目的是 。
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