【生物——现代生物科技专题】Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_________，此技术属于________工程范畴。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到 期时，可从其__________中分离出ES细胞。培养ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是_______________。
（3）步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的 设计引物，利用__________技术扩增Rag2基因片段。并且同时用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段，这样做的目的是： 。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________酶的酶切位点。
（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质，用 进行杂交实验。
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：
（1）为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用______酶和____酶去除细胞壁，获得具有活力的____________________，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_______组织，然后经过_______形成完整的杂种植株。这种培养技术称为_____________。
（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_________________。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是______________________________。
（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的
__________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（①至④代表过程，A至C代表结构或细胞）：
（1）图中①过程用到的酶是 ，所形成的B叫做 ，B是由 、 、目的基因和标记基因等部分构成。
（2）②过程常用 处理农杆菌，使之成为 细胞，利于完成转化过程。
（3）图中③过程叫做 ，④过程叫做 ，将叶盘培养成草莓幼苗的技术是 。
（4）在分子水平上，可采用 的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
请回答胚胎工程和细胞工程方面的问题：
（1）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精__________、________________以及在母体中发育和产出等过程。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其__________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和__________。
（3）随着转基因成果的不断涌现，人们对转基因生物是否安全表现出了担忧，在 安全、 安全和环境安全三个方面发生了激烈的争论。
（4）将胚胎干细胞置于成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的 ，加入抗生素是为了 ，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（5）在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是 。
（6）单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出 ，第二次筛选出 。
（7）通过体细胞核移植技术，从患者自身上取出体细胞，将其细胞核植入去核的卵母细胞，从而获得早期人类胚胎，然后再从中培育“患者自身的”胚胎干细胞供医学临床使用的技术叫做“ ”。这一技术也可以用来研究“克隆人”，中国政府对生殖性克隆人研究所持态度的“四不原则”是： 不接受任何生殖性克隆人的实验。
饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。
（1）培养基中除了添加植酸钙以外，应含有 、 、水、无机盐等基本营养物质。
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行 ，而且须将接种后的培养皿呈 状态放置。
（3）接种以前进行的一系列操作，目的是在培养皿表面形成 。根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数。
（4）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊。产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中， 是产植酸酶的理想菌株。
（5）获得目的菌以后，若要用于植酸酶的生产，还需要进行 。
[生物一选修3:现代生物科技专题](15分)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示:
(1)过程③常用的方法是 。
(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生 免疫。从小鼠体内分离的细胞I是 ，细胞Ⅱ应具有的特点是 。
(3)体外培养细胞II，首先应保证其处于 的环境，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是 。
(4)对于转基因成功的细胞II还要进行克隆化培养和 检测。
(5)若要预防H7N9禽流感，可用图中的 作为疫苗。
下图表示转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：
（1）构建的基因表达载体除含有人抗体基因、标记基因外，还应具有 。
（2）①过程进行之前，要对采集的精子进行 处理。
（3）图中②过程常用的诱导因素有 。
（4）细胞X是 ，体外培养细胞X所用的培养液必须添加 等天然成分。
科学家通过转入四种基因可将体细胞诱导形成多能干细胞(iPS细胞)，iPS细胞具有胚胎干细胞的类似功能。下图是设想用iPS细胞技术治疗镰刀型细胞贫血症的流程，请回答：
(1)胚胎干细胞来源于 ，具有 ，经诱导能发育成个体。
(2)iPS细胞培育过程中运用到的生物技术有过程①的 、过程②的 等。
(3)过程①的培养液中除合成培养基的成分外，还需添加 等天然成分。过程②进行时，需要先利用 技术将四种目的基因扩增，再将目的基因与逆转录病毒载体结合，以构建 ，然后将其导入患者的体细胞，诱导形成iPS细胞。
(4)经过程③、④后，改造得到的A是 ，再植入患者体内，使患者能够产生正常红细胞，这种治疗方法称为 。
(5)iPS细胞的诱导成功具有的医学价值是 。
有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：
（1）若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两 对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是 。
（2）若a、b表示两种植物体的细胞，则采用化学法形成c时，一般是用 作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是 ，这种育种方法的优 点是 。
（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是 。(2分)
用特定的 以获得d细胞，再经 和 ,然后筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来，顺序是 。(2分)
下图为培养花粉植株的两种途径的示意图，请据图回答下列问题：
（1）确定花粉发育时期的最常用方法是 ，取 期花粉较多的材料，花药培养成功率较高。
（2）图中的A是 ，C指 。
（3）这两种途径之问没有绝对的界限，主要取决于培养基中________。
（4）培养时，要控制温度，且 （填“需要”或“不需要”）光照。
（5）在花药培养中，由于 的数目常常会发生改变，因此还需对培养出来的植株作进一步的 。
肝脏是机体物质代谢的主要场所，请回答：
(1)肝脏对大部分激素具有灭活和降解作用，此作用有助于机体维持 ，从而保证机体正常的生命活动。
(2)慢性肝病患者的肝细胞膜上的胰岛素受体数目减少，导致患者血糖浓度升高，血糖浓度升高的主要原因是 。
(3)肝 脏内多种免疫细胞受神经支配，神经末梢释放的 能调节这些细胞的免疫效应。
(4)下图表示利用细胞工程技术治疗肝病患者的流程图。据图回答：
①图中的甲细胞应是取自 (患者父母／ 患者／患者的兄弟姐妹)的正常体细胞；早期胚胎细胞的分裂方式是 。胚胎干细胞可以分化为肝细胞的根本原因是 。
②图中a、b所涉及的生物工程技术分别是 。
下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①。④表示相关的操作步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。Pst I酶和Sma I酶切割基因后将产生不同的粘性末端。据图分析下列说法错误的是
| A．图中甲代表的是基因表达载体，乙可代表番茄细胞 |
| B．可用Pst I酶和Sma I酶切割鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接 |
| C．若用Pst I酶和Sma I酶切割质粒产生的DNA片段有3种 |
| D．图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的脱分化和再分化过程 |
下图单倍体育的过程示意图，请回答下列问题。
（1）图示的单倍体育种的优点是__________。
（2）在花药离体培养过程中，利用了植物细胞具有_________特点，具备该特点的根本原因是___________。
（3）花药是已经分化的细胞，必须经过_______的诱导，可以脱分化为具有分生能力的_______，进而形成愈伤组织。
（4）在A过程中，要利用的药品是________，其作用是_______________。
下图所示为培育农作物新品种的过程示意图。请回答：
（1）图中①②分别表示一个已插入外源DNA片段的重组Ti质粒的________和________。
（2）若仅用二倍体植物甲的未成熟花粉培养完整植株，称为________植株，说明未成熟花粉具有________；这些植株只有通过________________才能结实。
（3）若要大量获取紫草素，可从 组织中提取。图示育种方法与传统杂交育种相比，主要优点是 。
【生物——选修3：现代生物科技专题】(15分）
以小鼠为对象进行下列各项研究工作，请分析回答问题。
（1）在小鼠体细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长时会出现 现象而停止分裂增殖，此时瓶壁上形成细胞层数是___ ___。
（2）体外受精之后，精核与卵核融合之前，用微型吸管除去雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是__________________。
（3）培育转基因小鼠时，通常以 作受体细胞，为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因小鼠体细胞的_ __转入____ _细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。（4）动物细胞培养过程中添加 来防治污染；若保存细胞，通常在____ __条件下，因为在这种条件下，细胞中___ ___的活性降低，细胞代谢速率降低。
（5）单克隆抗体的制备中，应将___ 细胞注射到小鼠腹腔，从 中获得特异抗体。
粤公网安备 44130202000953号
