(16分)最近媒体曝光的毒胶囊事件中，问题胶囊铬超标，最高超标90倍。工业明胶中的六价铬是一种毒性很大的重金属，容易进入人体细胞，对肝、肾等内脏器官和DNA造成损伤。有资料称，重铬酸钾(含六价铬)0.1一0. 5μg/kg可使培养的细胞产生变异。某医院病理室为确诊一摄入过量重铬酸钾患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题:
(1)培养之前，肿瘤组织必须先用_____________等处理成单个细胞。
(2)某科研单位研制出一种新型治癌药物X，但不知对此类肿瘤是否有疗效，现提供以下实验材料：培养瓶、CO2培养箱、含有肿瘤细胞的培养液、生理盐水、光学显微镜、药物X等，请你完成相关实验步骤加以验证。
步骤一：取两只培养瓶，编号1号、2号，两瓶中装人等量的_____________。
步骤二：1号培养瓶中加入_____________,2号培养瓶中加入_____________。
步骤三：____________________________________________________,。
步骤四：一段时间后取出用_____________观察并记录细胞分裂生长情况。
(3)写出(2)的预期实验结果及相应结论:
①____________________________________________________。
②____________________________________________________。
（1）下列有关现代生物技术的有关叙述正确的是
| A．基因工程与蛋白质工程都能制造出新的蛋白质 |
| B．动物细胞培养时不一定需要添加血清 |
| C．动物的早期胚胎发育依次经过受精卵、卵裂、桑椹胚、孵化、囊胚、原肠胚等阶段 |
| D．DNA连接酶和DNA聚合酶都能使核苷酸之间形成磷酸二酯键，属于同一种酶 |
（2）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是 ；PCR技术扩增目的基因是基因工程中常用的技术手段，这一技术的原理是 。
（3）植物组织培养的主要原理是植物细胞具有 ，具体过程是在 和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过 产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
（4）克隆动物实际上是用 方法得到的动物，也就是将一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的 细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。
（5）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）： 。
如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题。
(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是__________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是__________。该过程所用的生物技术有____________________
(2)图3中过程①是植物细胞形成__________的阶段，该阶段所用的酶是___ ____。
“试管婴儿技术”不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生优育开辟了新的途径。据此回答：
（1）在体外受精时，精子首先要进行________处理；卵细胞则要培养到_________ (时期)才能与精子结合。
（2）采用__________________技术，能得到“同卵双胞胎”。
（3）如果滥用试管婴儿技术设计婴儿性别，将会破坏人类正常的_______。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家将___________和乳腺蛋白基因的________、终止子等重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的受精卵中。
（5）动物细胞工程中，重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物外，还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、___________等物质，恒温箱中加入CO2的作用是__________________________。
（1）动物细胞培养时需用 处理组织块使其分散开以获得单个细胞，动物细胞培养时培养液和培养用具要 处理，培养时所需的气体主要有 ，作用分别是 。
（2）在单克隆抗体制备过程中，应用到两项重要细胞工程技术是 。
（3）植物体细胞杂交技术的最大优势是 。
人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。+大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入“雌性奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）重组细胞①和②中 （①／②）实现了基因的重组。
（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
（3）实验过程b利用的技术是 ，胚胎工程操作中最后环节
是 。
（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型
（相同／不同） ，理由是 ，此项技术称为 。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中作为饲养层的是 细胞。
（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及 等物质。
科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，用转基因方法培育了抗枯萎病的金花茶新品种。
(1)将图中“2”连接到“1”上并形成“3”，常用到的酶有____________和____________。
(2)经检测，被图中“3”侵染的金花茶叶片细胞具备了抗病性，这说明“2”已经在金花茶细胞内得到_________。该项科技成果在环境保护上的意义是______________________。
(3)将具有抗病基因的金花茶细胞培养成试管苗的过程中，愈伤组织再分化时，除必要的营养供应、激素、适宜的温度和PH值外，还必须给予光照，原因是_____________；有的锥形瓶中培养失败还长出很多细菌菌落，其原因是________________。
下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答下列问题。
（1）先给小鼠注射HCG，一段时间后，若小鼠血清中检测的抗HCG的抗体，说明小鼠体内产生了 反应，再从小鼠的 中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的 细胞融合，使用的不同于植物原生质体融合的方法是 ，该融合过程说明了细胞膜具有 性。融合后的杂交瘤细胞既能 ，又能产生 。
（2）将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的 （填“上清液”或“沉淀细胞”），应用相关技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
（3）培养杂交瘤细胞时，若开始培养时取一滴培养液观察有100个细胞，经24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴（设三次的“一滴”等量）观察，发现有64个细胞，则此细胞的细胞周期约为 h。
请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。
(2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 (脱落酸、2，4-D)。
（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要。
(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
(1)过程A表示 ，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由① 细胞提供细胞质，进行人工重组。
(2)经过程B得到的结构中，④是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持 状态。自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或 中分离出来的一类细胞。胚胎干细胞在形态上表现为体积小，细胞核大， 明显，在功能上具有 。
(3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞核 。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是 的结果。
(4)对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？
[生物－选修3：现代生物科技专题]研究发现，转基因抗虫植物能杀死昆虫的原理是该基因控制合成的蛋白质被昆虫取食后，在消化道中被蛋白酶水解后产生具有毒性的活性肽，与昆虫细胞上的受体结合，使渗透压失衡，导致昆虫死亡。下图表示利用细菌中抗虫基因获取抗虫玉米的部分过程。其中①—⑧表示操作流程，a、b表示分子，c—e表示培养过程,其中d过程表示细菌与玉米细胞混合培养。(括号内填编号，横线上填字母或文字)
(1)在图示的过程中，涉及到的生物技术包括基因工程和____ __。
(2)在图示过程中，需要用到限制酶的是流程[ ]
(3)在流程⑤中，细菌不断分裂产生更多细菌，该步骤的主要目的是___________。
(4)从细胞、个体水平判断该基因工程成功的依据分别是 ___、 ____ 。
(5)结合题意，分析美国批准种植该转基因抗虫玉米的生物学原理：____________。
请根据下图回答相关问题：
(1)①过程中使用了__________________酶，以使植物原生质体相互分离，此处使用的溶液浓度较大，保证植物细胞会发生________，以保护细胞原生质体不被破坏；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__ ___。
(2)③处的细胞与④处的细胞相比，最大的区别是不具有____ ____；
(3)过程____和____属于再分化；动植物细胞发生分化的根本原因都是_______。
(4)③处的细胞在化学药剂________ __的作用下，会发生细胞融合。
(5)(多选)下列关于细胞工程的叙述中，错误的是
| A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 |
| B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 |
| C．⑥处的细胞都必须通过细胞分裂才能形成愈伤组织 |
| D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 |
E．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。
(1)①②过程使用了__________酶，以使植物原生质体相互分离，在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__________。
(2)过程③在化学药剂_______的作用下会发生细胞融合；动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是________。
(3)过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是__________。当愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的芽点，但继续出芽，通常在培养基中添加________，以促进幼苗形成。植物体细胞杂交的研究在________方面，取得了巨大突破。
(4)培育过程中用显微镜可以观察到的现象是________。
| A．①②发生质壁分离 | B．③刚融合的杂交细胞发生质壁分离 |
| C．胚状体细胞中有叶绿体 | D．分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致 |
下图为通过花药培养获得月季花粉植株的一种途径。请回答下列相关问题。
（1）选择花药时一般要通过 来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。一般来说，在 期，细胞核由中央移向细胞的一侧。为此，通常会选择 的花蕾，成功率最高。
（2）胚状体也叫 ，一般是由某些脱分化的细胞转变而来，在形态上具有与 发育成的胚非常相似的结构，胚芽、胚轴、胚根等结构完整，具有发育成完整个体的能力。
（3）上述途径是通过胚状体阶段发育成植株，还可以将花粉在诱导培养基上先形成 ，再将其诱导分化成植株。
（4）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入 染料，培养几种菌后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含有纤维素分解菌。
（5）在培养过程中为了检验制备的培养基是否合格，采取的措施是 ，如果 ，说明培养基制备成功，否则需要重新制备。
下图是植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：
（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步聚最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。
（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是：利
用 等（至少写出两种）促使原质体融合；化学方法是
用 等试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。
（3）③表示融合后的原生质体再产生样的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内________(细胞器)有密切关系。
（4）在④⑤过程中,细胞分裂的主要方式是___________。
（5）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以 。目前，动物细胞融合技术最重要的用途是 。
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