高中生物动物细胞工程的常用技术综合题

、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用，请回答下列问题：
（1）            技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是            。
（3）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂            外，还可以采用            （生物方法）或            （物理方法）
（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的            特点，又具备淋巴细胞的            特点。
（5）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是           。

直接消灭入侵的病原体，或直接清除体内出现的衰老、破损或异常细胞要依靠免疫调节。下图甲表示淋巴细胞起源以及特异性免疫发生的过程示意图解(其中字母表示不同种类的细胞)。下图乙表示单克隆抗体制备流程示意图。请分析回答下面的问题：
   
（1）免疫系统是由免疫器官、免疫细胞和免疫活性物质组成，其中免疫活性物质包括              （答出三种）。
（2）图甲中具有分裂分化能力的细胞有             。在体液免疫中具有识别能力的细胞有       （用字母表示）。
（3）图甲中通过基因治疗改造血友病女患者的A细胞，她的儿子             （会或不会）患血友病。
（4）与初次免疫比较，当机体再次接触相同抗原时免疫的特点是       。
（5）图甲中B细胞也在非特异性免疫中发挥作用，当B细胞参与非特异性免疫时，其发挥作用与     有关。
（6）图乙流程中重要的技术手段有           ，其中的筛选与检验包括                       。

克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了疾病克隆性治疗的基础，又解决了器官移植中供体不足的问题，同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展和应用图。请据图回答问题。

（1）图中所涉及的现代生物技术有________________和________________等。
（2）图中两个婴儿长大后，外貌、性格和其他特征与原型男人相似，这说明________具有全能性。
（3）使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入____________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的________和________；早期胚胎发育到________阶段以前的细胞是全能细胞。
（4）在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？________。

【生物一选修3现代生物科技专题】右图为单克隆抗体生产过程示意图，请据图回答问题：

（1）与诱导植物原生质体融合不同的是，②过程还可以使用____         诱导融合。②过程诱导后，用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞。
（2）再经过③               （填筛选方法）筛选得到的能分泌专一抗体的杂交瘤细胞注入到小鼠腹腔中，一段时间后从小鼠       中就可以提取大量的鼠源性单克隆抗体。
（3）给某患者连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病，开始病毒量明显减少，一段时间后，病毒量又开始上升，上升的原因可能是病毒发生了         ，也可能是人体产生了能与鼠源性抗体特异性结合的抗体，使鼠源性单抗不能发挥抗病毒的作用。
（4）研究人员可应用                工程，改造鼠源性单抗分子的结构，降低人体对鼠源性单抗的免疫反应。

如图表示花药培养及单倍体育种的大致过程，据图回答下列问题：

(1)过程①是把幼小的花药分离出来，在无菌条件下放在MS培养基上进行培养，配制该培养基时，需要的物质应该有________________________。(至少答三种)
(2)过程②是花药在MS培养基所提供的特定条件下脱分化，发生多次细胞分裂，形成________________，此过程进行细胞分裂的方式是_____________________________。
(3)过程③是诱导再分化出芽和根，最后长成植株，长成的植株(不考虑核与核之间融合)是________植株，其特点是植株弱小，高度不育，生产上无推广应用的价值，若要使其结子结果，可在移栽后在幼苗茎尖滴加适宜浓度的B物质，通常用到的B物质是________。
(4)过程②与过程③所用培养基有差异，主要是________的差异。
(5)被子植物花粉形成过程中，一个小孢子母细胞经过_______分裂形成小孢子，最终可以形成_______个精子。

阅读如下资料：
资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”。
资料乙：科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。
回答下列问题：
（1）资料甲属于基因工程的范畴。构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生______末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生______ (相同、不同)黏性末端的限制酶。
（2）构建的表达载体含有牛生长激素基因及其启动子等，其中启动子的作用是_________。将基因表达载体导入小鼠受精卵内常用______法。
（3）资料乙属于基因工程和细胞工程的范畴。鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与______融合，形成______细胞，并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于______，可大量制备。
（4）与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用______诱导融合。

医疗用的激素过去主要从动物（如猪、牛）体中得到。自20世纪70年代遗传工程（又称基因工程）发展起来以后，人们开始采用高新技术生产，其操作的基本过程如图所示。

（1）基因工程中，完成基因的剪切的酶是_________________，完成拼接的酶是___________________。
（2）图中质粒存在于细菌细胞内，从其分子结构看，可确定它是一种____________。
（3）细菌丙进行分裂后，其中被拼接的质粒由一个变成二个，再变成四个质粒的这种增加方式在遗传学上称为____________。若将人的生长激素基因导入细菌体内，该基因在细菌体内经过__________和__________两个过程，最终合成人生长激素，该过程可说明基因能控制_______________的合成。
（4）20世纪90年代，英国科学家成功得到克隆羊“多利”，这说明哺乳动物高度分化的体细胞的_______具有_____________性。

【下图为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，请回答。

（1）图示技术名称为      ，该技术的基础是_     __技术。
（2）操作所用的成纤维细胞应在_____代以内；诱导融合运用了     原理，该过程中区别于原生质体融合的方法是用    处理。
（3）HAT培养基属于 ____培养基，其中需要加入    等天然物质。
（4）培养时PH一般为     ；为操作中加入鸟本苷的目的是______。
（5）右表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（“+”表示存在，“-”表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码________酶的基因位于染色体2上。 

单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用，请回答下列问题：
（1）            技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是            。
（3）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂            外，还可以采用            （生物方法）或            （物理方法）
（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的            特点，又具备淋巴细胞的            特点。
（5）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是           。

玉米是一种重要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家做了人量的研究工作。下图是玉米培育过程示意图；下表是以玉米的成熟胚为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对玉米愈伤组织诱导率影响的实验结果。请问答下列有关问题：

（1）图中玉米的培育过程依据的原理是              ；其中过程A称为        。
（2）为了获得玉米某些代谢产物，可用少量         酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在         培养基中进行悬浮培养。
（3）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的     有利于胚形成愈伤组织。
（4）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，还有培养的环境条件。现给你提供200个已经消毒过的玉米成熟胚，在上述研究的基础上，请完成玉米愈伤组织的诱导是否需要光照的探究实验步骤：
①将200个已经消毒过的成熟胚平均分为甲、乙两组，接种到（填培养基代号）培养基上，分别培养；
②                             ；
③培养一段时间后，分别计数和比较甲、乙两组中                      。

Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子I（ICAM-1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。
（1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出____________反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
（2）实验用骨髓瘤细胞置于_______恒温培养箱中37℃培养，融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中_______．（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。
（3）取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有____能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择________的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中__________培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。
（4）若进一步比较实验用抗体和¹³¹I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。

2014年埃博拉病在非洲蔓延，我国派出医疗队首次在境外组建医院，帮助治疗埃博拉疫情。
（1）研究表明，埃博拉病毒侵入机体后，通过靶向感染、破坏吞噬细胞等，使其不能暴露病毒的，以致感染信息不能呈递给，阻止正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程，导致机体对该病毒的免疫功能下降。因此，病毒在体内快速增殖、致病。
（2）对志愿者接种埃博拉试验疫苗后，机体免疫系统能产生相应抗体，还能产生的免疫细胞有。
（3）用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠，通过技术获得杂交瘤细胞，用于生产单克隆抗体治疗该病。

科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如图所示。


（1）基因工程的核心是_____________________________。
（2）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了___________         法，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_________         中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的                上。这种导入方法首先必须用_____    处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态细胞。
（3）如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的卵细胞中_________    （填“一定”或“不一定”）含有抗病基因。

世界上第一只克隆绵羊“多利”的培育程序如右图所示。请看图后回答：

（1）写出图中 a 、b 所指的细胞工程名称: a:                   ，b:                    
（2）实施细胞工程a 时，所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是：___________________。
（3）“多利”面部的毛色是        ，请根据遗传学原理说明判断的原因是：______________。
（4）继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞也具有_________。

下图为单克隆抗体制备流程示意图。

(1)__________技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是________________。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的________，以保证生命活动的正常进行。
(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是________________________________________________。
（4）选出的杂交瘤细胞具备____________________特点。
（5）淋巴细胞是由动物体__________中的__________细胞分化、发育而。
（6）下图表示从正常人和患者体内获取的P⁵³基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分区域（见下图），那么正常人的会被切成__________个片段，而患者的则被切割成长度为__________对碱基的两种片段。如果某人的P⁵³基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是__________（以P⁺表示正常基因，Pⁿ表示异常基因）