高中生物动物细胞工程的常用技术试题

将人细胞与小鼠细胞融合得到的人﹣鼠杂种细胞进行长期培养，杂种细胞随机丢失一部分人的染色体后，染色体数目会保持稳定。选取三种杂种细胞，对编码人的芳烃羟化酶（AHH）和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因进行染色体定位研究，结果如表（"+"表示有，"﹣"表示无）。

杂种细胞	人的染色体				AHH	PGK
	2号	11号	17号	X
甲	﹣	+	﹣	+	﹣	+
乙	+	+	﹣	﹣	+	﹣
丙	﹣	+	+	+	﹣	+

下列有关叙述错误的是（　　）

A．	聚乙二醇可诱导人细胞与小鼠细胞融合
B．	培养杂种细胞时，通常需在培养液中添加一定量的抗生素
C．	编码AHH的基因在11号染色体上
D．	编码PGK的基因在X染色体上

用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列步骤中错误的是 （     ）

A．将抗原注入小鼠体内，以便获得特定的B淋巴细胞

B．用聚乙二醇作诱导剂，促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合

C．B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合后，无需筛选杂交细胞

D．将能产生特定抗体的杂交瘤细胞，培养后提取单克隆抗体

图1表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂种细胞的过程（注：杂种细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的）。表1表示几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系。请回答下列问题：

表1 几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系

杂种细胞系
		A	B	C	D	E
人体基因	1	﹢	﹣	﹣	﹢	﹣
	2	﹣	﹢	﹣	﹢	﹣
	3	﹢	﹣	﹣	﹢	﹣
人体染色体	1	﹣	﹢	﹣	﹢	﹣
	2	﹢	﹣	﹣	﹢	﹣
	3	﹣	﹣	﹣	﹢	﹢

注：“﹢”表示有，“﹣”表示无
（1）图1中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有   （至少写出两种），再用特定的   培养基进行筛选，得到杂种细胞。
（2）培养杂种细胞时，根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基，此外经常会在培养基中加入   。培养过程细胞需置于含CO₂的混合气体的培养箱中培养，CO₂的主要作用是   。
（3）假如每种杂种细胞只保留了人的1条染色体，从染色体组成的角度考虑，杂种细胞可能有    种。
（4）据表1 推测，第2染色体上有第    基因，可进一步证明萨顿的假说即基因在染色体上是正确的。

下列有关生物工程的叙述，不正确的是（   ）

A．动物细胞融合过程中可用灭活的病毒、聚乙二醇（PEG）等

B．动物细胞培养过程中，常用幼龄动物为材料

C．植物体细胞杂交育种过程中，需要用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁

D．植物体细胞杂交过程中，需用相同浓度的细胞分裂素和生长素筛选杂种体细胞

下列不属于动物细胞工程应用的是（   ）

A．大规模生产淋巴因子，用于抵抗肿瘤的发展

B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞

C．大规模生产食品添加剂、香料等

D．利用单克隆抗体作为诊断试剂

细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是（   ）

A．选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞

B．选择去核的卵细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率

C．选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体

D．选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗

自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。科研人员把猪卵母细胞进行孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得成活的孤雌生殖克隆猪。请据图回答：

（1）图中获得孤雌生殖克隆猪的技术流程是        （填序号）；孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞
_，．使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。
（2）获得核移植克隆猪的技术流程中的③和④分别代表    技术和          技术。培养图示重组细胞所用的培养基中通常还需要加入适量的     等天然成分。
（3）受体对移入的外来胚胎基本上不发生   ．反应，这为胚胎在受体内存活捉供可能。
（4）通过反转录得到多种cDNA与基因组DNA相比，cDNA中    （有／无）启动子，     （有，无）内含子。

目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：

（1）获取外源基因用到的工具酶是         ，为了提高实验成功率，通常利用            技术获得大量标记的外源基因。
（2）外源基因能够整合到精子的        上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的         才能进入卵细胞中。
（3）过程②采用的是          技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行          处理。
（4）过程③需要在        (请写出4点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入           。

眼虫是一种含有叶绿体的原生动物：据此，某同学认为动物细胞与植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的：他设计了一个具体的实验方案如图：

请回答下列有关问题：
（1）实验方案中，步骤A为除去细胞壁得到的        ，常用的除去细胞壁的药品为
（2）步骤B为___       _，受体动物必须接受           处理，以确保其生理状态适合于接受胚胎。
（3）诱导融合可以采用一些物理方法，如         等，也可以使用化学药品           来进行诱导。
（4）进行动物胚胎细胞培养时，需要用            将组织块或贴壁生长的细胞分散成单个细胞。
（5）诱导植物材料形成愈伤组织的两类关键激素是            。

鼠源单克隆抗体用于疾病的治疗时。易发生不良反应，科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接。实现了对鼠源单克隆抗体的改造，生产出对人体不良反应小、效果更好的单克隆抗体。请回答：
（1）鼠源单克隆抗体是将经过免疫的小鼠__________细胞与骨髓瘤细胞融合，然后筛选出___________的杂交瘤细胞，并通过体内或体外培养生产的抗体。
（2）动物细胞融合常用___________诱导，细胞融合体现了细胞膜的___________。在体外培养杂交瘤细胞时，培养液中通常加入___________等天然成分，将其置于95％空气加5％CO₂的气体环境中，CO₂的作用是_________________________________________。
（3）基因拼接用到的工具有________________和__________________。
（4） 单克隆抗体的优点是___________________。

不同的生物材料均可能用来研究细胞的增殖。取菊花茎中中轴、侧枝、髓等部位的分生组织，测定其细胞周期的部分时间，见表。（单位：h）请回答下列问题

（1）表中侧枝分生区细胞的细胞周期的分裂期时间为_____________h。
（2）从表中看出，同种生物内的细胞周期的长短主要取决于_____________期；DNA的复制是在S期完成的，则G1期发生的变化最可能是_________________。
（3）大蒜素是从大蒜中分离出的化合物，能抑制癌细胞增多。为研究其抑制作用的具体机理，研究者提出了相应的实验思路。
①实验分组
A组：动物细胞培养液+癌细胞+1mL大蒜素+1mL生理盐水
B组：动物细胞培养液+癌细胞+1mL DNA复制抑制剂+1mL生理盐水
C组：动物细胞培养液+癌细胞+1mL大蒜素+1mL DNA复制抑制剂
D组：动物细胞培养液+癌细胞+_____？________
②每组设置若干个重复样品，在适宜条件下培养
③定期取样，检测结果；数据分析，得出结论 根据上述思路，回答下列问题：
①D组横线上“？”处应加的试剂是___________，设置D组的目的是____________。
②实验中的自变量是________。

科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄－马铃薯”杂种植株，如下图，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：

（1）实现过程②的技术是                                。如果将已除去细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？               。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是______________________，其中过程④相当于______________过程，⑤涉及的分裂方式为______________。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇，培养将进行到__________ （填图中字母）。
（3）若番茄细胞含m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。

以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

（1）上图中过程①的完成采用的特有方法         ，依据的生物学原理       。
（2）过程④要用到的酶有            ，过程⑥采用的方法叫           。
上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。

分子量（kb）	1．0	2．0	3．0	4．0	5．0	6．0	7．0	8．0	9．0	10．0
酶M	+				+					+
酶N							+		+
酶M+酶N	+	+	+	+		+
凝胶电泳结果（１kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在）

（3）该质粒长度为          kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有        、         个。
（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是         。
（5）在表达载体中，启动子的作用是：         识别和结合的部位，驱动V1基因的      。

一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件
①无毒的环境           ②无菌的环境          ③合成培养基需加血浆
④温度与动物体温相近   ⑤需要O₂，不需要CO₂      ⑥CO₂能调节培养液的pH

A．①②③④⑤⑥

B．①②③④

C．①③④⑤⑥

D．①②③④⑥

植物体细胞杂交的最终结果是

A．产生杂种植株	B．产生杂种细胞
C．原生质体融合	D．形成愈伤组织