某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答：
（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉，分别为细菌培养提供了和。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是和。
（2）对培养基进行灭菌，应采用的方法是。
（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于中培养，培养温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一个平板上接种作为对照进行实验。
（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭细菌污染的程度越。
（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐细菌，这种培养基被称为。
下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图。请回答下列问题：
(1)过程甲中使用的微生物是。在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约的空间。
(2)过程乙中使用的微生物是，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下：
第一步：配制（固体／液体）培养基。对培养基进行高压蒸汽灭菌。
第二步：接种。微生物常用的接种方法有平板划线法和。
第三步：培养。温度控制在℃范围内。
第四步：挑选符合要求的。
(3)某同学用葡萄制作的葡萄酒带有明显的酸味，最可能的原因是。
在家庭装修过程中会产生甲醛、酚类等对人体有害的物质。甲醛和酚类可以当作一些微生物生长的碳源，经微生物代谢分解后变成无毒物质或形成二氧化碳和水。某研究小组研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，请回答下列问题：
（1）在培养该细菌的培养基中必须含有水、碳源、和。该实验所用的培养基从功能上属于培养基。②中应加入作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基（会/不会）影响细菌的数量。
（2）从②到③进行微生物接种的最常用方法是和。④中微生物不生长，其作用是。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是。
（3）若在该实验中统计菌落数目时得到4个平板，数目分别为21、213、257、27 8，则应计数为，该方法往往比活菌的实际数目（高/低）。
酵母菌群体生长状况可用660nm光吸收量来表示，培养液中菌体越多(不包括死亡个体)，光吸收量越高，光吸收量和酵母菌干重之间的关系如下左图所示。为了验证恒定容积液体培养基中酵母菌的群体生长规律，某小组在一个装有0．5 L葡萄糖溶液的锥形瓶中进行了酵母菌的培养实验，实验结果如下右图所示。请分析回答下列问题：
(1)培养至第8 h后，酵母菌种群开始进入＿＿＿期。培养至第24 h时，锥形瓶中酵
母菌的干重为＿＿＿g。
(2)培养至第＿＿＿h之后，酵母菌种群将进入衰亡期。在生产实践中，为了提高酒精的产量，应该延长＿＿＿期，常采用＿＿＿法进行培养。
(3)为使以上实验方案更科学严密、数据更准确，上述实验方案还应作怎样的完善? ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿
食品卫生是关系千万人健康和生命的大事，为检测某食品厂乳制品中总菌量和大肠杆菌量是否超标，常采用微生物培养的方法，请回答下列问题：
(1)应配制哪种物理性质的培养基？________，在接种之前，一般对培养基采取________方法灭菌，灭菌后才能保证培养得到的菌落全部来自待测样品。培养基中是否应该加入全部五大类营养要素？________，为什么？__________________________________
________________________________________________________________________。
(2)培养基制备好以后，应该将一定量的________的稀释液接种到培养基上，并将接种好的培养基在________________等条件下培养。
(3)待培养一定时间后，对________________进行计数，以得出总菌量的数据，若要得到大肠杆菌量的数据，应该在配制培养基时向培养基中加入________________试剂。
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，
即和。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和。无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请分析回答：
(1)上图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________到培养基的表面。除此方法外，常用的微生物接种方法还有________________(写一种)。
(2)如果要对培养的菌落进行纯化，在培养基上划线操作中，操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环，目的是对接种环进行________，灼烧的接种环冷却后才能接种的原因是____________________________________________________________________。
(3)下面是两种培养基的配方：
表1：A培养基配方
| KH2PO4 |
Na2HPO4 |
MgSO4·7H2O |
葡萄糖 |
尿素 |
琼脂 |
H2O |
| 1.4 g |
2.1 g |
0.2 g |
10.0 g |
1.0 g |
15.0 g |
1 000 mL |
表2：B培养基配方
| 纤维素粉 |
NaNO3 |
Na2HPO4·7H2O |
KH2PO4 |
MgSO4·7H2O |
KCl |
酵母浸膏 |
H2O |
| 5 g |
1 g |
1.2 g |
0.9 g |
0.5 g |
0.5 g |
0.5 g |
1 000 mL |
①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。
a．倒平板 b．计算 c．溶化 d．称量 e．灭菌
②通常培养基采用________________法灭菌，在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是____________________________。
③如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
④据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是________。
某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题：
（1）培养基中加入化合物A的目的是筛选______________，这种培养基从功能上分属于__________培养基。
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_______________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是__________。
（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________________。
（4）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量_________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量______________。
（5）转为固体培养时，常采用平板划线的方法进行接种，操作时应对接种工具采用_____________灭菌的方法。
（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________________，此对照实验的目的是_____________________。
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行_____________处理后，才能倒掉。
有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于培养基。
(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。
(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。
(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和
。
【生物一选修1：生物技术实践】（15分，第1空1分，其余2分）请回答下列生物技术方面的问题。
Ⅰ. 微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和___________法,后者则是将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，然后进行。菌落是在固体培养基上由繁殖而来的形态可见的子细胞群体。
Ⅱ. 菊花的组织培养的大致过程如下图所示，请回答下列问题：
图中B C依次表示过程（填名称），添加的关键激素是。该实验操作成功的关键是，所以要对外植体、超净工作台等消毒，对等灭菌。
【生物——选修I：生物技术实践】（共15分）
回答下列关于腐乳制作的问题：
（1）、腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为
和；其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和。
（2）、发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制生长。
（3）、腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的。
【生物—选修模块1：生物技术实践】
I、苯胺是致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。
| KH2PO4 |
1.4g |
| Na2HPO4 |
2.1g |
| MgSO4·7H2O |
0.2g |
| FeCl3 |
0.1 g |
| X |
1g |
| 维生素 |
微量 |
| 琼脂 |
15g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL |
（1）此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供和，该培养基从作用看属于。
（2）下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是，图B效果的接种方法是。
II、根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题：
（1）菊花的组织培养常用的培养基是，原理是。
（2）月季的花药离体培养，从花粉粒的选择上看，应选择期的花粉粒为宜。
（3）从茶籽中提取茶油一般最好采用法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是法。
【生物——选修模块1：生物技术实践】
家蝇体内存在一种具有极强抗菌能力的抗菌蛋白，请回答下列有关分离和提取抗菌蛋白的问题：
（1）分离该抗菌蛋白可用法，其原理是根据蛋白质分子的带电性质差异、大小及形状不同，不同而实现分离。
（2）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、、、和。
（3）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白质的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛乳膏和蛋白胨主要为细菌生长提供和。
（4）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的___________，确定该蛋白质的抗菌效果。
（5）抗菌培养常用的接种方法有___________和_____________。实验结束后，对使用过的培养基应进行处理。
从土壤的嗜碱性短小芽孢杆菌中首先分离选育到一株产生低温型碱性蛋白酶的高产菌株。该菌珠具有嗜碱性强、不易染菌、生产性状稳定等特点。该菌产碱性蛋白酶能力强，每毫升发酵活力达9 000单位(28℃测定)、5 000单位(20℃测定)和18 000单位(40℃测定)，在全国五种碱性蛋白酶的性能比较中，该蛋白酶在28℃下所具有酶活力高于国内同类产品，表明具有低温型酶的特性。该产品用于加酶洗衣粉，可提高去污力1～2倍，特别在常温下对血渍、奶渍等蛋白质污垢有专一性的去污效果。根据材料回答下列问题：
(1)从土壤中分离嗜碱性短小芽孢杆菌应用________(用途)培养基。
(2)为什么该菌株产的碱性蛋白酶活性在不同温度下发酵活力不同？____________________________________________________________________。
(3)试分析该产品在常温下对血渍、奶渍等蛋白质污垢有专一性的去污效果的原因。
_____________________________________________________________________。
(4)若要比较添加该蛋白酶的洗衣粉与普通洗衣粉的洗涤效果，应注意控制实验中的无关变量，请列举均衡无关变量的措施(至少2条)：
_____________________________________________________________________
(5)在日常生活中使用洗衣粉时，有人先用沸水溶解洗衣粉再浸泡衣物，该种方法能否用于题目中所说的加酶洗衣粉？为什么？_________________________________________________________________________
如图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题：
(1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明________________________________________________________________________。
(2)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用_______________法。
(3)用稀释涂布平板法统计菌落数目时，最好选择菌落数在___________间的平板进行计数。若统计出在一稀释倍数为105的平板上的平均菌落数为30个，所用稀释液的体积为0.2 mL，则每克样品中的菌落数为__________________________________。
(4)在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入___________________指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现____________
粤公网安备 44130202000953号