十九世纪中期，法国科学家巴斯德证明食品发酵是由于微生物的作用。如今，形形色色的发酵食品在食品业中占有重要的地位。回答下列与微生物发酵、培养相关的问题：
（1）苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用______________来检验。
（2）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括。
| A．温度控制 | B．溶氧控制 | C．pH控制 | D．酶的控制 |
（3）苹果酒在的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是。
（4）腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于。
（5）在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是。
回答有关微生物和植物组织培养的问题：
（1）在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成此现象的生物是____________。腐乳外部有一层致密的“皮”，这是__________的匍匐菌丝形成的。制作泡菜时，有时坛内会长一层白膜，这是__________繁殖形成的。
（2）微生物的接种方法很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种等方法，虽然这些技术的操作方法各不相同，但是其核心都是要_______________，来保证培养物的纯度。
（3）从土壤中分离出分解尿素的细菌之后，对其进一步鉴定，要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，如果指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
（4）下图为花粉植株的培育途径
为了挑选到单核期的花药，通常选择_______________的月季花蕾。选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，采用的染色剂是___________，它可以将细胞核染成蓝黑色。①表示的生理过程是_____________________。
请回答下列与植物有效成分的提取及微生物相关的问题：
（1）适合玫瑰精油提取的常用方法为法；橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用法提取橘皮精油。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成比。
（3）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基应以________作为唯一碳源。
（4）分离土壤中的纤维素分解菌时，经常用加入了________的鉴别培养基，在该培养基上，纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现________。
(8分)下图是生物兴趣小组为研究“某品牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。
请分析回答：
(1)与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是。
(2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙反应生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析，本研究使用的培养基属于(类型)。
(3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，锅内水加热煮沸后，必须，以保证锅内气压上升，达到l21℃。灭菌后的培养基应适当冷却后，在附近倒平板。
(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：
步骤l：分别取加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并已经冷却到℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。
步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。
步骤3：将接种后的三组培养基和一个都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。
请分析回答下列问题:
(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。实验室常用的灭菌方法有灭菌、干热灭菌和灭菌。
(2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是( )
①土壤取样 ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 ③吸取0.1mL溶液进行平板涂布
④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
A.①②③④ B.①③②④
C.①②④③ D.①④②③
(3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生,可以用重铬酸钾来检验,在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈色。在发酵过程中,随着酒精度的提高,发酵液逐渐呈现深红色,原因是。
(4)从野生酵母菌群中分离纯化酵母菌,最常使用的接种方法是和两种。酵母菌适合生活在偏酸性环境中,而放线菌则适合生活在偏碱性环境中,分离二者所用的培养基称为。
(5)在腐乳制作的过程中,起主要作用的微生物是。
(6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些( )
①盐的用量 ②酒的种类和用量 ③发酵温度 ④发酵时间 ⑤香辛料的用量
A.①②③④⑤ B.①②③
C.①②⑤ D.③④
氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌,培养基配方如表1。
表1 培养基的组成
| 液体培 养基 |
蛋白胨 |
牛肉膏 |
氯苯 |
氯化钠 |
硝酸铵 |
无机盐 (无碳) |
蒸馏水 |
| Ⅰ号 |
10 g |
5 g |
5 mg |
5 g |
- |
- |
1 L |
| Ⅱ号 |
- |
- |
50 mg |
5 g |
3 g |
适量 |
1 L |
| Ⅲ号 |
- |
- |
20~80 mg |
5 g |
3 g |
适量 |
1 L |
(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的。
(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是。
(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于培养基和培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(如图2)。从图2可知SP1菌在培养条件下最早停止生长,其原因是。
二口恶英是持久性有机污染物,其毒性强,降解难。某种白腐真菌能利用二口恶英中的碳元素作为碳源。为了降解废水中的二口恶英,研究人员从土壤中筛选获得了能降解利用二口恶英的白腐真菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品,⑧为筛选出的目的菌株。请回答下列问题:
(1)⑤中培养目的菌株的选择培养基中应加入作为唯一碳源,如果要测定②中活菌数量,常采用法。
(2)④、⑥为对照组,⑤为实验组,④、⑥中加入马铃薯琼脂培养基(培养真菌的培养基)。若⑥在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有;若④中的菌落数目明显(填“多于”或“少于”)⑤,说明⑤已经筛选出一些菌落。
(3)在提取白腐真菌细胞内的分解酶时,通常先将菌株细胞制取粗酶液,再进一步获得相应的酶;从中分离提取的酶通常需要检测,以确定其应用价值;为降低生产成本,可利用技术使白腐真菌重复利用。
(4)提取白腐真菌细胞内的蛋白质过程中,为了保证蛋白质不变性,需要对样品进行洗脱,措施一般是需要加入;在装填凝胶柱时,如果有存在,会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。该真菌可以产生某种挥发性强、易溶于有机溶剂的芳香化合物,适于采用法提取。
回答下列关于微生物和酶的问题。
高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如图所示。
(1)①过程称为,②过程是为了。
(2)Ⅰ号培养基称为(按功能分);该培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分。
A.琼脂 B.葡萄糖
C.硝酸铵 D.碳酸氢钠
(3)一般对配制的培养基采用高压蒸汽灭菌,其中“高压”是为了。
在高温淀粉酶运用到工业生产前,需对该酶的最佳温度范围进行测定。图中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间,再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性,由此得到的数据为酶的热稳定性数据,即图中的曲线②。
(4)根据图中的数据,判断该酶使用的最佳温度范围是。
A.40~50 ℃ B.50~60 ℃
C.60~70 ℃ D.70~80 ℃
(5)据图判断下列叙述错误的是。
A.该酶只能在最佳温度范围内测出活性
B.曲线②35 ℃数据点是在80 ℃时测得的
C.曲线①表明80 ℃是该酶活性最高的温度
D.曲线②表明该酶的热稳定性在70 ℃之后急剧下降
临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:
(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用法或法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。
(2)取该单菌落适当稀释,用法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。
(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明;
含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的。
(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选用抗生素。
科学家采用“影印培养法”研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的。具体操作步骤如下：
①首先将大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的培养基平板1上，待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基平板2上，随即再影印到含有链霉素的培养基平板3上。经培养后，在平板3上出现了个别抗链霉素的菌落。
②对培养皿2和3进行比较，在平板2上找到与平板3上相对应的抗性菌落，挑取其中一个菌落接种至不含链霉素的培养液4中，经培养后，再涂布在平板5上。
③重复以上各步骤，最后在试管12中获得了较纯的抗性菌落。
根据以上材料回答下列问题：
（1）若要获得抗链霉素的大肠杆菌，实验设计思路是： 。
（2）大肠杆菌抗链霉素基因存在于 上，该结构在基因工程中是最常用的载体。
（3）3号、7号、11号培养皿中加入链霉素的作用是 ，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明 。
（4）该实验结论是： ，依据是 。
为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验（符合无菌操作要求）。请分析上述实验过程并回答下列问题：
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、；培养基中牛肉膏的作用主要是为微生物生长提供等营养物质。
(2)本实验样品接种时最好采用方法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的。
(3)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。
(4)请指出本实验设计中的一个明显的错误：，请加以改正：。
(5)如何证明所用培养基已经彻底灭菌？。
（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、______和渗透压等条件。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
请回答下列与植物有效成分的提取及微生物相关的问题：
（1）适合玫瑰精油提取的常用方法为法；橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用法提取橘皮精油。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的是法；一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成比。
（3）欲从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基应以________作为唯一碳源。
（4）分离土壤中的纤维素分解菌时，经常用加入了________的鉴别培养基，在该培养基上，纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现________。
根据微生物培养的相关知识回答下列问题。
(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需要进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。
(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。
(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________。
(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
孔雀石绿(C23H25N2Cl)常用作纺织业的染料，也可用作水产养殖业的杀菌驱虫剂。但它具有高毒性、高残留的危害，因此对孔雀石绿废水的处理已成为环境科学领域关注的热点。科研人员从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A。主要步骤如图7－15－3所示。
图7－15－3
请分析并回答：
(1)从①到③的培养过程中，培养液应加入________作为唯一碳源，此过程的目的是________________________和________________________。
(2)使用____________法可以在④上获得单个菌落。实验中使用的培养基可以用________灭菌法进行灭菌。
(3)从某化工厂污水池中分离获得了能降解孔雀石绿的细菌菌株A，从生物进化的角度分析，这是________的结果。菌株A在生态系统成分中属于________。
(4)研究人员进一步研究了不同金属离子对菌株A降解孔雀石绿的影响，实验结果如图7－15－4所示。
由上述结果可以看出，与不加金属离子的对照组相比，多数金属离子对菌株A降解孔雀石绿有________作用，唯有Pb2＋的作用相反。若要排除Pb2＋本身对孔雀石绿有降解作用，则应设置__________________________的培养基样本作为对照。
图7－15－4
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