材料 饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪禽等动物由于缺乏有关酶，无法有效利用植酸，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸，因此成为目前重要的饲料添加剂之一。
(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生____________，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间内____________表示。
(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如图：
Ⅰ中的主要成分为________；Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。______________________________________。
(3)为制备基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：________________________。反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________________。
根据相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：
(l)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和____，以提高萃取效率：水蒸气蒸馏法____（填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是____；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用____法，并以____样品作为对照。
(2)若要提高衣物上血渍的去除效果，可在洗衣粉中加入____酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的____或____；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加____酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是____。
在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。
__________________ __________________
(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ，并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。
(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。
(3)PCR反应过程的前提条件是________________，PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。
如图表示花药培养及单倍体育种的大致过程，据图回答下列问题：
(1)过程①是把幼小的花药分离出来，在无菌条件下放在MS培养基上进行培养，配制该培养基时，需要的物质应该有_____________________________。(至少答三种)
(2)过程②是花药在MS培养基所提供的特定条件下脱分化，发生多次细胞分裂，形成________________，此过程进行细胞分裂的方式是____________________。
(3)过程③是诱导再分化出芽和根，最后长成植株，长成的植株(不考虑核与核之间融合)是________植株，其特点是植株弱小，高度不育，生产上无推广应用的价值，若要使其结子结果，可在移栽后在幼苗茎尖滴加适宜浓度的B物质，通常用到的B物质是________。
(4)过程②与过程③所用培养基有差异，主要是________的差异。
PCR技术可扩增DNA分子，电泳技术是将待测样品放在光滑的凝胶薄膜上，并加上直流电场，可利用分子带电荷不同分离和分析氨基酸和多核苷酸片段等有机物。这两项技术综合应用于现代刑侦，可以获得最可靠的证据。
如图是一次寻找嫌疑犯的测试结果：图甲是把遗迹中含有21个氨基酸的多肽进行水解，将氨基酸混合物进行电泳的结果；图乙是通过提取罪犯B遗迹DNA和四位嫌疑犯的DNA进行扩增，并采用特定限制酶处理后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱。
(1)在同一电场下，由于蛋白质或DNA的________以及________不同而产生不同的迁移方向或速度，从而实现样品的分离。
(2)在电泳过程中，带电分子会向着________的电极移动。
(3)由甲图可知，多肽由________种氨基酸组成；由乙图可知，B最可能的对象是________。
研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。
柚皮
糊状液体柚皮精油
乳酸菌A培养液乳酸菌素
抑菌实验
(1)柚皮易焦糊,宜采用 法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过 除去其中的固体杂质。
(2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或 接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是 。实验前需对超净工作台进行 处理。
(3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供 。电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其分子量越大,电泳速度 。
(4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的 来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:
(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有 功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验,实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。
(2)甲装置中,B是血红蛋白溶液,则A是 ;乙装置中,C溶液的作用是 。
(3)甲装置用于 ,目的是 。用乙装置分离蛋白质的方法叫 ,是根据
分离蛋白质的有效方法。
在操作中加样(下图)的正确顺序是 。
(4)最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行 。
植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面。请回答相关问题。
(1)利用月季的花药离体培养产生单倍体时,选材非常重要。一般来说,在 期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药,通常选择 的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有 法,但是对于花粉细胞核不易着色的植物,需采用 法,该法能将花粉细胞核染成 色。
(2)若要进行兰花无病毒植株的培育,首先选择兰花的 作为外植体。从外植体到无病毒植株试管苗,要人为控制细胞的 和 过程。
(3)进行组织培养需配制MS培养基,在该培养基中常需要添加 等激素。欲利于根的分化,植物激素的用量比例应为 。
(4)不同植物的组织培养除需营养和激素外, 等外界条件也很重要。
(5)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素,下列各项中使用化学药剂进行消毒的是 ,采用灼烧方法进行灭菌的是 。(答序号)
①培养皿 ②培养基 ③实验操作者的双手 ④三角锥形瓶 ⑤接种环 ⑥花蕾
近几年我国柑橘大丰收，提取橘皮精油是提高其经济价值的重要途径。请分析回答提取过程的有关问题：
（1）提取橘皮精油，常采用 法而不用蒸馏法，原因是 。
（2）提取橘皮精油时，为了提高出油率，首先将橘皮 ，并用石灰水浸泡，石灰水的作用是 。
（3）压榨过程，为了使橘皮油易与水分离，常加入 。
（4）得到压榨液后，过滤除去固体物和残渣，然后 进一步除去质量较小的残留固体物，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮精油分离出来。此时，橘皮油中含有少量的水和果醋，需在5℃—10℃下 使杂质沉淀，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分过滤， 混合合并后成为最终的橘皮精油。
(15分)
（1）传统发酵技术应用十分广泛，果酒和果醋就是常见例子。当发酵装置由果酒酿造转为果醋酿造时，首先要提高 ，其次要注意通入 。
（2）微生物培养基通常在压力为100kPa，温度为 ℃条件下，灭菌15至30min，然后待培养基冷却至 ℃时，在酒精灯火焰附近倒平板。
（3）菊花的组织培养，一般选择的 的茎上部新萌生的侧枝；进行菊花组织培养时，一般将pH控制在 左右，温度控制在18至22℃，并每天光照12h。植物激素中，生长素和细胞分裂素是关键性激素。
（4）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，柑橘芳香油的制备通常使用 法。为提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用 浸泡。
下图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程，请据图回答下面的问题。
（1）对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是 ；对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于 期。为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是： 。
（2）在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有 。
（3）两种植物组织培养都需要接种，在进行接种时应注意 。
①接种室要消毒； ②只要戴口罩，操作时便可说话；③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0．1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净； ④接种操作要在酒精灯火焰旁进行；⑤接种完毕应立即盖好瓶盖
| A．①②③④⑤ | B．①②③④ | C．①③④⑤ | D．②③④⑤ |
（4）月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过 阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于___________。
（5）图中的B过程都需要 ，因为愈伤组织形成幼小植物后，植物需要叶绿素进行光合作用。
多聚酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。回答以下问题:
(1)细胞内DNA复制过程中,引物的作用是 ,而且DNA复制的前提是 。
(2)PCR利用了 原理,可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。
(3)PCR技术用到的酶是 ,与细胞内DNA复制时发挥相同作用的酶相比区别在于 。
(4)下面表格是DNA体内复制与PCR反应的部分比较结果。通过比较分析,请推导出PCR反应合成DNA子链时能量来源于 。
| |
原料 |
ATP |
| DNA体内复制 |
四种脱氧核苷酸 |
需要 |
| PCR反应 |
脱氧胞苷三磷酸、脱氧腺苷三磷酸 脱氧胸苷三磷酸、脱氧鸟苷三磷酸 |
不需要 |
(5)假如PCR反应所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,则经过n次循环,具有放射性的脱氧核苷酸链占总链数的比值为 。
根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。
（1）胡萝卜素是_________色的结晶，从胡萝卜中提取胡萝卜素，常用________作为溶剂，原因是_____________。
（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是_______法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、_______________。
（3）在胡萝卜素颗粒的加热干燥过程中，应严格将_______和________控制在一定范围内，原因是_____________。
（4）提取的胡萝卜素可通过________法进行鉴定，在鉴定过程中需要用___________对照。
（5）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成_________比。
植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面。请回答相关问题。
（1）诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低的主要影响因素是__________和培养基的组成。利用月季的花药离体培养产生单倍体时，一般来说，在 期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药，通常选择 的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有 法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用 法，该法能将花粉细胞核染成 色。
（2）若要进行兰花无病毒植株的培育，从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞
和 过程。
（3）进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要添加 、 等激素。欲利于根的分化，植物激素的用量比例应为 。
（4）在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，___________的数目常常会发生变化，因此还需要对培养出来的植株进行_______________。
（5）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列各项中使用化学药剂进行消毒的是 ，采用灼烧方法进行灭菌的是 。（答序号）
①培养皿 ②培养基 ③实验操作者的双手 ④三角锥形瓶 ⑤接种环 ⑥花蕾
利用不同微生物的发酵作用来制作腐乳、酸奶、泡菜、果酒和果醋等食品的历史悠久，遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术相关知识，回答以下问题：
（1）腐乳的制作：
①腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是 ，主要是利用这些微生物产生的 水解豆腐中营养物质，将豆腐转变成风味独特的腐乳。
②腐乳制作过程中加盐的作用是 。
（2）乳酸发酵：
①测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，
与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成 色染料。
②据图可知泡菜在腌制 天后食用最佳。
（3）果酒和果醋的制作：
①鉴定发酵液中有酒精生成：用试管取发酵液少量，加入 ，如果出现灰绿色，则鉴定有酒精生成。
②为获得高纯度的果酒、果醋等发酵产品，需要对所用的微生物进行分离和纯化，其过程为：
第一步：配制培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、 （写两项）。培养基需要进行灭菌操作，常用的灭菌方是 。
第二步：接种。微生物常用的接种方法有平板划线法和 。
第三步：培养。
第四步：挑选符合要求的菌落。
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