转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。
下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。
⑴若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？_____，说明理由______________________________________________________________。要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？________。
⑵卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有___________基因，作为标记基因。
⑶②、③阶段是否可使用同种培养基？ _________；理由是_____________________________。
⑷④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？_________；理由是_____________________。
下图为人β—珠蛋白基因与其mRNA杂交的示意图，①～⑦表示基因的不同功能区。
据图回答：
（1）上述分子杂交的原理是 ；细胞中β—珠蛋白基因中不能翻译的序列是 （填写图中序号）。
（2）细胞中β—珠蛋白基因开始转录 识别和结合①中调控序列的酶是 。
（3）决定β—珠蛋白基因的编码区有7000个碱基对，其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，该序列叫 ；剩下的序列最多能编码 个氨基酸（不考虑终止密码子）。
（4）家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的________和________之间。
(5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液(含Mg2＋)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。
(6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以______________________________________，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
质粒能成功转入植物细胞，并将质粒上的一部分外源DNA整合到植物的染色体DNA中。下图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请据图分析回答问题。
(1)过程②将目的基因导入质粒后，需要利用DNA连接酶使质粒与目的基因切口黏合。该过程与质粒上含有____________________有关。
(2)构建基因表达载体在组成上还必须含有目的基因、________ 、_______和标记基因。其中标记基因的作用是____________________________。
(3)过程③经常采用的方法是_____________________________。
(4) 为了检测通过④过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性，可采用的方法是
____________________________________________________________________。
(5) 过程④运用了细胞工程中的植物组织培养技术，该技术的理论依据是________；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行
________和________。
（6）为了获得脱毒的抗除草剂大豆植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，其原因是 。
（7）过程④采用的技术不仅应用于花卉、果树的快速、大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于植物体细胞杂交育种和 等育种过程中。
科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体，用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答：
(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取 ，在诱导剂的作用下与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，此细胞的特点是____________________________________________________。与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用____________诱导融合。
(2) 细胞融合是随机的过程，所以需要用__________培养基筛选，目的是选择出杂交瘤细胞。对筛选出的细胞还需进行____________培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量，能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
(3) 若在体外大规模培养该细胞，首先应保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中，为了防止细菌的污染，所用培养液应该添加一定量的 ，此外还要 ________ ，防止细胞代谢产物对细胞有影响。在培养液中提供5% CO2目的是____________。
(4) 这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点是________________________，可大量制备。临床试验上借助单克隆抗体的_____________作用，将药物带到癌细胞所在位置。
（5）科学家通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因，然后导入到鼠淋巴细胞中，改造抗体属于________工程的范畴。
下图表示构建某种生物基因文库的部分过程，请观察分析并解答下列问题。
（1）图示全过程是构建 文库。
（2）完成与图中①~⑦所代表的内容相关的问题。
①是 酶；②是 键；③是 酶；④是 ；⑤具有 末端；⑥表示菌体的DNA分子。与真核细胞cDNA组成的基因相比，⑥中的编码蛋白质的基因两端含有 和
等有遗传效应的DNA片段。
⑦是 。若基因工程用到的某种“分子手术刀”识别一条链的一半序列是“-GAA”，则该“分子手术刀”识别这条链的另一半序列是 。
下图表示基因导入中的土壤农杆菌转化法等内容（其中，图中数字表示该方法的操作步骤，字母表示途中的结构）。据图解答下列问题。
（1）指出a~e所示结构的名称。
a是 ； b是 ；c是 ；
d是 ；e是 。
（2）①代表的操作步骤是 ；
④过程用到的现代生物技术是 。
（3）若用上述方法将一个c导入二倍体细胞f，则g自交产生的子代中，表现出c中基因控制的性状的个体为 % 。若用DNA探针技术检测含有c片段的g的花粉，其百分比为 % 。若g为转基因抗虫棉，这种棉花推广对环保方面所起的积极作用是 。
科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图，据图回答：
⑴过程①表示采取 的方法来获取目的基因。
⑵形成图中②含有目的基因的DNA（重组质粒）需要的酶包括： 和 。
⑶图中③过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，一般将受体大肠杆菌用 处理，使细胞成为 ，从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有 的培养基上，若细菌能够生长，说明：已导入了重组质粒或普通质粒A，理由： ____ 。
⑷基因工程的第四步中,检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质，用到的技术分别是 ___________ 、 ___________ 。
下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：
（1）在基因工程中，A表示 ，B表示 。
（2）如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程和A→B过程共同使用的酶是 ，另外A→B过程还必需用 酶,两者的作用部位是 。
（3）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中④用到的生物技术主要有动物细胞培养和 。
（4）若使用棉花的体细胞为受体细胞，⑤表示的生物技术是 。要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体水平上的鉴定过程： 。
下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白（HAS）的图解，据图回答：
（1）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法______________。
（2）基因工程中，在②进入③之前要用限制性核酸内切酶、运载体和DNA连接酶来构建__________，实现②进入③的最常用方法是_________，若②的数量太少，常用________技术来扩增。
（3）过程a是动物早期胚胎的体外培养，培养液中除了含有各种无机盐、有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸、激素等外，还要添加___________。
科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆（如下图所示），请结合图示回答下列问题：
（1）在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用 酶处理。
（2）形成重组细胞时应选用 期的卵母细胞。
（3）如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出
和 等特点。
（4）图中犊牛并不是对体细胞核供体母牛100%的复制、其原因主要有 和 。
（5）上图中所示的生物技术整体被称为 。其包括的具体生物技术有 、 等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物______ 具有全能性。
2011年11月,武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内,借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的，这一成果轰动了全世界。结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题。
（1）限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是-C↓AATTC-和-G↓AATTC-。为保证重组质粒表达载体的准确构建，应如何选择合适的酶进行切割和重组？
。
（2）②过程常用的细菌是 。
（3）③经历的生理过程主要有 和 两个阶段。培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是 。
（4）基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植物进行分子水平的检测，可检测的物质有 、 、 。
人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。
（1）目的基因的获取方法通常包括 、 和 。
（2）上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基发生了改变，这种变异被称为 。
（3）已知限制酶E的识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成 个片段；而患者的则被切割成长度为 对碱基和 对碱基的两种片段。
（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460对碱基的四种片段，那么该人的基因型是 (P+表示正常基因，P-表示异常基因)。
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～②是重组基因的合成过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：
（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶 分别对 进行切割，切割后产生的DNA片段分别为 种。
（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有 作为标记基因。
（3）研究人员通常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用 技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。
Ⅰ、科学家将人的生长素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图，据图回答：
(1)过程(1)表示的是采取____ ____法来获取目的基因。
(2)图中(1)过程是以__ ____为模板，_______形成DNA单链，再进一步合成DNA双链。
(3)图中(2)所示为 ___ ___，它含有目的基因。
(4)图中(3)过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴细菌或病毒________细菌的途径。一般将受体大肠杆菌用_________处理，以增大___ ____的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
(5)检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是__ __
原理是：________________ 。
(6)如果把已经导入了普通质粒A或重组质粒的大肠杆菌，放在含有四环素的培养基上培养，发生的现象是____ ___ _;原理是：__________ __________
（每空1分，共8）分人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
请回答：
(1)过程①代表的是 。
(2)过程②构建A基因表达载体时，必须使用 和 两种工具酶。
(3)过程③采用的实验技术是______，获得的X是________。
(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行________比较；或用图中的________进行特异结合检测。
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