基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答：
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人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，该疾苗生产和抗体制备的部分流程如下图：
请回答
（1）①代表的是 过程，若要在体外获得大量的A基因，常采用 技术，该技术必须用到 等酶。
（2）过程③采用的实验技术是 ，该技术的原理为 ，在此过程中特有的诱导因素为 ，获得的X是 。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以用图中的 进行特异性结合检测。
为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法：
图中两对相对性状独立遗传。据图分析，不正确的是 ( )
| A．过程①的自交代数越多，纯合高蔓抗病植株的比例越高 |
| B．过程②可以取F1中任一植株的适宜花药作培养材料 |
| C．过程③包括脱分化和再分化两个过程 |
| D．图中筛选过程不改变抗病基因频率 |
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图所示。请据图回答。
（1）口蹄疫病毒的VP1蛋白进入动物体内，能引起机体产生特异性免疫应答。VP1蛋白在免疫反应中称为 。
（2）口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VP1基因可用 的方法合成DNA，再用 将VP1基因片段切下。
（3）过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和 等激素外，还需要添加 筛选出含有重组质粒的叶片小段。
（4）获得表达VP1蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次，三次后检测豚鼠血液内产生的
的数量。为了使结果可信，应设两组对照，分别注射 和 。
正当中国各界激烈争论转基因水稻安全问题之际，在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β一胡萝卜素．它呈现金黄色泽，故称 “金色大米”。(摘自20l0年4月<新世纪>周刊) “金色大米”的培育流程如图所示．请回答下列问题。(已知酶I的识别序列和切点是一G ↓ GATCC一．酶II的识别序列和切点是一↓ GATC—)。
(1)图中a、b所示获得目的基因的方法是 ，培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是 。图中c称作 ，它的构成除了复制原点、目的基因外，还必须有 、 、 等。
(2)据图分析，在构建c的过程中，目的基因用 (限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)进行了切割。检验重组载体导入能否成功需要利用 作为标记基因。
(3)过程e运用了细胞工程中的 技术，该技术的理论依据是 ；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行 和 。
(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过 工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有__________________________________________。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________。
（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。
（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________作为探针。
（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与_________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。
②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。
植物细胞受损后通常会释放出酚氧化酶，使无色的酚氧化生成褐色的物质。例如，酚氧化酶可引起果蔬酶促褐变，也是引起果汁褐变的最主要因素。请据资料分析回答：
（1）酚氧化酶与酚类底物分别储存在细胞的不同结构中。能实现这样的分类存放是因为细胞内具有 系统,组成该系统的结构具有的功能特性是 。
（2）把含有酚氧化酶的提取液作如下表的处理， 完成下列问题：
 步骤试管 |
①酚氧化酶提取液的处理 |
②加入缓冲液 |
③加入酚类底物 |
实验后的颜色 |
| A |
不作处理 |
2ml |
2ml |
褐色 |
| B |
加入蛋白酶，10分钟 |
2ml |
2ml |
无色 |
| C |
加入三氯乙酸(强酸)，10分钟 |
2ml |
2ml |
？ |
推测实验后，试管C中的颜色是 。试管A、C对照，你能提出什么结论？ 。试管A、B对照，说明酚氧化酶的化学本质是 。
（3）基因工程已应用在抗褐变品种的改良上，目前比较成功的是反义RNA技术（反义RNA可直接作用于靶MRNA的SD序列和部分编码区，直接抑制翻译）。有人将一段cDNA片段通过 的方法导入马铃薯的细胞中，并表达得到反义的RNA，结果块茎中的酚类物质氧化受阻，表皮被擦破后不发生褐变。你认为反义RNA发挥作用的原因可能是 ，阻碍了翻译过程的进行。
白化病（由A或a控制）与某舞蹈症（由B或b控制）都是常染色体遗传病，在一家庭中两种病都有患者，系谱图如图所示，请据图回答：
（1）舞蹈症由 基因控制，白化病由 基因控制 （“显性”或“隐性”）
（2）2号和9号的基因型分别是 和
（3）7号同时携带白化病基因的可能性
（4）若13号与14号再生一个两病兼发的女孩的可能性是 ．
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种偶蹄动物传染病，目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPI。科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，过程如下图1所示。图2表示目的基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程，E、F、G、H分别为A、B、C、D四种不同限制酶的酶切位点。请据图回答。
⑴口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，要获得VPI基因可通过 方法获得。
⑵如图2所示，若限制酶A、B切割出的末端完全不同，那么用这种双酶切的方法构建重组质粒的优点是 。
⑶已知质粒pZHZ1的长度为3.7kb，（1kb=1000对碱基)其中EF区域长度为0.2kb，GE区域长度为0.8kb，FH区域长度为0.5kb。现分别用限制酶C、D切割重组质粒pZHZ2样品，结果被酶C切割成1.6kb和3.1kb两个片段，被酶D切割成1.2kb和3.5kb两个片段。据酶切结果判断VPI基因大小为 kb，并将目的基因内部的酶C、酶D切割位点用相应的字母标注在下图对应位置。
(每小格代表0.1kb)
⑷过程⑥的培养基中除了加入各种必需营养物质和 等激素外，还需要添加 -筛选出含有重组质粒的叶片小段。
⑸获得表达VPI蛋白的番茄植株以后，需要进行免疫效力的测定。具体方法是：将转基因番茄叶片提取液注射到豚鼠体内，每半个月注射一次，三次后检测豚鼠血液内产生的 的数量。
已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：
（1）实验步骤③需要用 作为受体细胞。
（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制酶和 酶，后者的作用是将限制性内切酶切割的 和 连接起来。
（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能 ，也不能 。
（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用 与 进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列 （相同、不同），根本原因是 。
干扰素是治疗癌症的药物，成分是一种糖蛋白，它必须从血中提取，每升人血只能提取0.05 μg，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚的基因公司用如图的方式生产干扰素，试分析原理和优点。
(1)从人的淋巴细胞中取出 ，使它同质粒相结合，然后移植到酵母菌体内，让酵母菌 。
(2)酵母菌能用 方式繁殖，速度很快，能大量生产 ，不但提高了产量，也降低了成本。
(3)有人尝试将干扰素基因与大肠杆菌的质粒重组，转入大肠杆菌体内后，形成“工程菌”，此种操作能制备到干扰素吗？ ，请说明理由：
。
(4)中国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因移植到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：
①人的基因之所以能接到植物体内，其物质基础是 。
②烟草有了抗病能力，这表明烟草体内产生了 。这个事实说明，人和植物共用一套 ，蛋白质合成方式 。
油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高秆，Gg为中秆， g g为矮秆。B基因是另一种植物的高秆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）步骤①中用到的工具酶是 ，可用含 的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞，目的基因能在植物体内稳定遗传的关键是 。
（2）若将一个B基因连接到了矮秆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜表现为 ，该转基因油菜自交产生的子一代中，高秆植株应占 。
（3）若将一个B基因连接到了中秆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲~丁四种转基因油菜（如下图）
①这四种油菜中，丙植株的表现型与其余三种植株不同。理由是 。
②在不考虑交叉互换的前提下，这四种转基因油菜分别自交，子代有3种表现型的是 ，另外还有一种转基因油菜的自交子代也有3种表现型，请在下图中的染色体上标出B基因的位置。
人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，通常从血液中提取。应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白会安全、高效地满足人类需求。下图是利用牛奶乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
（1）以上过程涉及到的动物细胞工程技术有 。
（2）在此基因工程中，获取血清白蛋白基因的主要方法有 （至少答两种）。在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有 ，将①导入③的常用方法是 。
（3）图中②一般经过 处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用 作为受体细胞，但要进行去核处理，一般选择在 时期进行。
（4）将⑤送入⑦的最佳时期是 。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是 ，所需要的酶是限制酶和 。
(2)在过程②中，用 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是 。
(3)在过程③中，用 处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
DNA亲子鉴定测试原理是：从被测试者的血滴或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA，用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段，放进凝胶内，用电泳推动DNA小片段分离，再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起，然后利用特别的染料在X光下，便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。反复几次过程，每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码，便可得到超过99.9％的分辨概率。 请回答：
（1）限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段，这主要体现了酶的 （ ）
A．专一性 B．高效性 C．多样性 D．作用条件温和
（2）“探针”是指 （ ）
A．某一个完整的目的基因
B．目的基因片段的特定DNA
C．与目的基因相同的特定双链DNA
D．与目的基因互补的特定单链DNA
（3）条码一半与其母亲的条码吻合，另一半与其父亲的条码吻合。为什么?
（4）样品DNA经PCR技术扩增，可以获取大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA分子半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)。在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验室所需的遗传物质不再受限于活动的生物体。
①图中A过程表示 。
②某样品DNA中共含3000个碱基对，碱基数量满足：(A+T)：(G+C)=1/2，现欲得到100个与样品相同的DNA，至少需要向试管中加入 个腺嘌呤脱氧核苷酸。
③A过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90~95℃时才能完成，说明DNA分子具有 性。
④由图中信息分析可知，催化C过程的酶是 ，它与正常细胞里的酶区别是
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