已知玉米因受到玉米螟危害而减产，玉米螟食用某种原核生物分泌的ɤ-蛋白后死亡。因此，可将ɤ-蛋白基因转入到玉米体内，使玉米获得抗玉米螟危害的能力。请据此回答下列问题：
（1）为了获得ɤ-蛋白的基因，在已知ɤ-蛋白的氨基酸序列的基础上，推测出ɤ-蛋白的 序列，据此可利用 方法合成目的基因。获得ɤ-蛋白的基因还可用 、 方法。
（2）如下图，若用限制酶E和F从原核生物基因组DNA上切下ɤ-蛋白的基因，并将之取代质粒Z1上相应的E—F区域 (0.4kb，1kb=1000对碱基)。（图中E、F、G、H是4种识别序列完全不同的限制酶及其部分识别位点）
①此时所形成的重组质粒Z2的大小为5.4kb，问目的基因的大小是_________；
②若用限制酶E和F处理Z2，则会出现Z2____________；
| A．既能被E也能被F切开 | B．能被E但不能被F切开 |
| C．既不能被E也不能被F切开 | D．能被F但不能被E切开 |
③若用限制酶G切割Z1，可得到一种2.5 kb的DNA片段；若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4 kb和0.1 kb三种片段，问Z2上有 个限制酶G识别位点。
（3）若用含有重组质粒的土壤农杆菌直接感染玉米植株的根部伤口，则该植株的种子中 （填“含有”或“不含”）ɤ-蛋白基因。
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请据图回答下面的问题。
(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶________，对 ________进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有______________，作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的________。
科学家设法将生长激素基因导人其它生物体（细胞）内，从而获取大量的生长激素，应用于侏儒症的早期治疗，如下图所示。请据图回答：
（1）过程①采用的方法是 ，过程②之前需用 处理目的基因和质粒。
（2）过程③需事先对大肠杆菌用 处理，使其处于感受态，接着 完成转化过程。
（3）过程④动物细胞培养中使用的工具酶是 ，与植物组织培养的培养基相比，动物细胞培养液中通常需加入 。
（4）过程⑤一般先将生长激素基因导人奶牛的 ，然后进行 ，再进行胚胎移植，生下转基因牛犊。
某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列经BclⅠ酶切后，可产生大小不同的片段(如图1，bp表示碱基对)，据此可进行基因诊断。图2为某家庭该病的遗传系谱。下列叙述错误的是
| A．h基因特定序列中BclI酶切位点的消失是碱基序列改变的结果 |
| B．Ⅱ-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲 |
| C．Ⅱ-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXh |
| D．Ⅱ-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2 |
如图7－16－5是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解，请据图回答：
图7－16－5
(1)图中①所示的结构是________；②所示的结构是________________________。
(2)图中③所示的生物工程技术是__________；④所示的生物工程技术是____________。
(3)在图中④所示的生物工程技术中，健康胰岛B细胞基因在进入②之前要构建________，这是基因工程的核心，除含目的基因外，还必须含有启动子、终止子、标记基因。
(4)重组细胞b在一定的细胞分化诱导剂的作用下，可以定向分化形成胰岛B细胞，其根本原因是________________。培养重组细胞b的培养液中除加入各种营养物质外，还必须加入________。
(5)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是______________________。
红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。目前临床使用的是重组人红细胞生成素(rhEPO)，其简易生产流程如图7－16－3所示。请回答问题：
图7－16－3
(1)图中①所指的物质是________，②所指的物质是________。
(2)基因表达载体导入中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)最常采用的方法是____________，它的启动子是__________的识别和结合部位。
(3)CHO是仓鼠的卵巢细胞经过细胞培养过程中的____________________培养获得的无限增殖细胞。重组CHO细胞培养需要____________的环境，及营养、温度、pH和气体环境适宜的条件。
(4)检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。单克隆抗体的优点是____________________，并可大量制备，它是由小鼠的骨髓瘤细胞与其特定B淋巴细胞通过____________技术获得的杂交瘤细胞分泌的。
2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在 上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，可以对其基因进行检测，检测的原理是 。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是 ，该基因只在 细胞中表达。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射 ，使其子宫适合于胚胎的着床，囊胚时期的 细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术有 、 、 。
动物乳腺生物反应器是一项利用转基因动物的乳腺代替传统的生物发酵，进行大规模生产可供治疗人类疾病或用于保健的活性蛋白质的现代生物技术。目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品。大致过程如图所示：
(1)在过程③中需要用到的工具酶有 。要使人的药用蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、标记基因等部分。
(2)要实现超数排卵，应在性成熟雌牛发情周期的某一阶段用 处理。通过①采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，原因是 。
(3)将获得的重组细胞培养成早期胚胎后，移植到经过 处理的受体母牛子宫内。因为我们对细胞所需的营养条件还没有完全搞清楚，所以，在早期胚胎的培养基中，往往还需要添加 。
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛，应采用胚胎分割移植技术。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将 均等分割。胚胎分割移植后发育成小牛，这些小牛的基因型 (填“相同”或“不同”)。
下图为某转基因小鼠培育过程示意图，①～⑦表示相关过程。请回答：
（1）过程①注射的激素是____________，
（2）过程③用到的工具酶有_____________，过程④常用的方法是______________。基因工程的核心步骤是__________________。
（3）⑥筛选过程通常采用的检验方法是_____________。
请回答有关下图的问题：
(1)图甲中①～⑤所示的生物工程为________________。该工程通过对__________的修饰或合成，对现有的________进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产生活的需求。
(2)图甲中序号④所示过程叫做________________，该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是________(请将模板碱基写在前)。
(3)如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]________；图中[3]________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体________的精子。
(5)为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用激素对供体做________处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对________动物做________处理。若图甲中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢，则其在⑧之前需进行体外培养到________期方能受精。
(6)用________技术处理发育到________期或囊胚期的早期胚胎，可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理，要注意将________均等分割。
图①表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图②表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MpsⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：
(1)图①的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由________________连接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图①中DNA片段，产生的末端是________末端，其产物长度为________________________。
(3)若图①中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图①及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有________种不同长度的DNA片段。
(4)若将图②中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。
长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答： 
(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。
（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是： (填字母序号)。
A.启动子 B.终止子 C.复制原点 D.标记基因
（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为 。
（5）欲检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可采用的技术是 ，欲检测目的基因是否转录出了mRNA，可采用的技术是 ，欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术 (填字母序号，各1分)。
A.分子杂交技术 B. DNA分子杂交技术 C. 抗原-抗体杂交技术 D. PCR
登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖。蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家拟用以下方法控制病毒的传播。
(1)将S基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达S蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制。为了获得转基因蚊子，需要将携带S基因的载体导入蚊子的________细胞。如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出__________________、__________和__________。
(2)科学家获得一种显性突变蚊子(AABB)。A、B基因位于非同源染色体上，只有A基因或B基因的胚胎致死。若纯合的雄蚊(AABB)与野生型雌蚊(aabb)交配，F1群体中A基因频率是________，F2群体中A基因频率是________。
(3)将S基因分别插入到A、B基因的紧邻位置(如上图)，将该纯合的转基因雄蚊释放到野生型群体中，群体中蚊子体内病毒的平均数目会逐代________，原因是__________________________________。
科学家从某耐盐植物中得到耐盐基因（R），培育出耐盐转基因农作物。回答下列问题：
（1）在基因工程中，耐盐基因（R）被称为 。
（2）如果用农杆菌转化法将R基因导人农作物细胞，应先将R基因插入农杆菌的 中，然后用该农杆菌感染农作物细胞，将R基因插入农作物细胞的 上。
（3）上述过程中用到的DNA连接酶分为两类，其中T4DNA连接酶既能连接双链DNA分子片段的 ，也能连接 。DNA连接酶的功能是连接两个脱氧核苷酸之间的 。
（4）若得到的耐盐转基因农作物的基因类型有甲、乙两种，R基因的整合位点如图（只考虑其中的两对染色体，R基因都能正常表达）。让植株自花传粉（植株的减数分裂正常，且不考虑交叉互换），会产生含两个R基因配子的植株为图 类型；若子代耐盐植株所占比例为100%，则R基因的整合位点属于图 关型。
由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽抱杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。
（1）图甲中，过程①需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是 。
（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ；推测该同学接种时可能的操作失误是 。原因是：在 足够高的菌液里，聚集在一起的酵母菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成 的菌落。
（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同且适宜的条件下密闭发酵，接种工程酵母菌的发酵罐需要先排气，其原因是 。
粤公网安备 44130202000953号
