下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是（ ）
| A．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接 |
| B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录 |
| C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键不同 |
| D．胰蛋白酶能作用于离体的动物组织，使其分散成单个细胞 |
科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为（ ）
| A．基因工程 | B．蛋白质工程 | C．基因突变 | D．细胞工程 |
利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是（ ）
| A．过程①需使用转录酶 |
| B．过程②需使用解旋酶和PCR扩增获取目的基因 |
| C．过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 |
| D．过程④可利用DNA分子杂交法鉴定目的基因是否已导入受体细胞 |
下列有关基因工程的叙述，错误的是（ ）
| A．基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异 |
| B．在同一DNA分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出现的概率越大 |
| C．基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入 |
| D．以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态 |
蛋白质工程的基本流程正确的是（ ）
①蛋白质分子结构设计 ②DNA合成
③预期蛋白质功能 ④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列
| A．①→②→③→④ | B．④→②→①→③ |
| C．③→①→④→② | D．③→④→①→② |
线粒体是与细胞凋亡密切相关的细胞器。为研究蛋白B对家蚕细胞凋亡的影响，科研人员做了如下实验。
（1）细胞色素c是线粒体内膜上的重要电子传递体，参与有氧呼吸第_________阶段的生化反应。细胞受到凋亡信号的作用后，线粒体膜上的非特异性通道打开，引起线粒体膜的_________性发生改变，线粒体膜两侧_________的分布发生变化，导致线粒体膜电位下降或消失，使得细胞色素c释放出来，引发细胞凋亡。
（2）用生物碱H处理悬浮培养的家蚕细胞，处理不同时间后，用凝胶电泳方法测定细胞溶胶（细胞质基质）中细胞色素c的含量，结果如下图所示。
①由于细胞中微管蛋白的表达量_________，在实验中可作为标准物质，以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和细胞色素c的_________等无关变量对实验结果的影响。
②据图分析，正常细胞的细胞溶胶中_________检测到细胞色素c，由_________判断，随着生物碱H处理时间延长，细胞色素c逐渐释放到细胞溶胶中。
（3）为研究蛋白B的功能，科研人员构建蛋白B基因过量表达载体和蛋白B基因表达干扰载体，导入悬浮培养的家蚕细胞中，用_________处理转基因家蚕细胞，检测到过量表达蛋白B的细胞溶胶中细胞色素c的释放量减少，抑制蛋白B基因表达的细胞溶胶中细胞色素c的释放量显著增加，推测蛋白B_________。
下列与细胞工程技术相关的表述中，不正确的是（ ）
| A．植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 |
| B．植物体细胞杂交技术可以克服远缘杂交不亲和障碍 |
| C．动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 |
| D．动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 |
科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。
（1）A为含目的基因的（基因）表达载体，其化学本质是___ _ _。
（2）过程①中用到的工具酶有 将A导入绵羊胎儿成纤维细胞中常用的方法是___ _ 。
（3）核移植的受体应选用___ 期卵母细胞。在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是___ 。重组细胞能发育成绵羊，是因为细胞核中具有___ 。
（4）移植应选择胚胎发育到___ _ 阶段时进行；代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生___ _ ，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：
（1）完成图中A过程必需的工具是 ；该基因治疗的受体细胞为 。
（2）若要构建含GDNF基因的表达载体，则需选择图中的 限制酶进行酶切。
（3）限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如下图表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示GDNF基因运载体的是 。
（4）下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述，错误的是_______（多选）。
A．限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
B．限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同
C．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
D．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
（5）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，若是正向连接的重组载体，其产生的酶切片段数为 个，反向连接的重组载体产生片段有 （多选）。
①100bp ②200bp ③600bp ④700bp ⑤6000bp ⑥6500bp
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
（1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有 和 ．
（2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如图所示．为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 ．
（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 DNA连接酶和 DNA连接酶．
（4）反转录作用的模板是 ，产物是 ．若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术．
（5）基因工程中除质粒外， 和 也可作为运载体．
（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 ．
某研究小组欲将已知抗除草剂基因导人原生质体培育抗除草剂大豆。请回答下列问题：
（1）为获得大量抗除草剂基因，可通过_______技术进行扩增，也可将其连接到_______上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体_________。酶混合液需通过_________灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在_________中进行。
（3）可通过___________方法，直接将抗除草剂基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出__________，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗除草剂基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行___________，验证抗除草剂基因是否被整合到受体的细胞中并转录。
有关遗传变异的叙述正确的是（ ）
| A．基因型为Dd的豌豆，能产生雌雄两种配子，且数量比接近1∶1 |
| B．在基因工程中使用的DNA连接酶的作用是将互补的碱基连接起来 |
| C．自然界中的变异主要是基因重组，所以基因重组是生物变异的根本来源 |
| D．将基因型为Aabb的玉米的花粉授到基因型为aaBb的玉米的雌蕊的柱头上，所结籽粒胚的基因型为AaBb，Aabb，aaBb，aabb |
【生物----选修3：现代生物科技专题】
抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。回答问题：
（1）过程①是 ，该过程常用的方法是 。
扩增抗凝血酶 Ⅲ蛋白基因经常采用 技术。
（2）过程②包括 技术和 技术；可用 技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊。
（3）若要检测牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用 技术。
（4）如果检测发现抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被导入了受精卵，但却没有检测到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那应该考虑分别位于目的基因首端和末端的 没有设计好，应从这方面考虑改善。
下列有关实验方法或检测的叙述，正确的是
| A．用差速离心法分离叶绿体中色素和细胞质中各种细胞器 |
| B．用健那绿和吡罗红染色观察DNA和RNA在细胞中的分布 |
| C．用含有3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸的培养液培养洋葱根尖分生区细胞，可以在细胞核和线粒体处检测到较强的放射性，在核糖体处则检测不到放射性 |
| D．用人的胰高血糖素基因制成DNA探针，检测人胰岛B细胞中的mRNA，可形成杂交分子 |
【生物—选修3：现代生物科技专题】
青蒿素是治疗疟疾的重要药物。研究人员已经弄清了青蒿细胞中青蒿素的合成途径（如图中实线方框内所示），并且发现酵母细胞也能够产生合成青蒿素的中间产物FPP（如图中虚线方框内所示）。结合所学知识回答下列问题：
（1）疟疾俗称“打摆子”，是由疟原虫引起的寒热往来症状的疾病。当疟原虫寄生在人体中时，会引起人的免疫反应，使 细胞产生淋巴因子。同时B细胞在受到刺激后，在淋巴因子的作用下增殖分化成 细胞，产生抗体。
（2）根据图示代谢过程，科学家在培育能产生青蒿素的酵母细胞过程中，要向 中导入的基因是 ，具体操作中可利用 技术检测转基因生物的DNA上是否插入目的基因。
（3）构建基因表达载体时，用不同类型的 切割DNA后，可能产生 末端，也可能产生 末端。
（4）实验发现，酵母细胞导入相关基因后，该基因能正常表达，但酵母菌合成的青蒿素仍很少，根据图解分析原因可能是 。
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