科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因。其技术过程如下(图中的■代表基因前的启动子)，据图回答：
（1）Cre酶能特异性地识别上图loxP序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的 酶。从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的 。
（2）将重组质粒导入到植物细胞中最常用的方法是 。作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原因是 。
（3）经Cre酶处理后，质粒一中的两个loxP序列分别被切开后，可得到质粒二等两个DNA分子。由于
的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失。
据胚胎工程的知识回答(4)(5)两问:
（4）胚胎工程任何一项技术获得的胚胎，还需通过 给受体才能获得后代。若要充分发挥优良母畜的繁殖潜能，可给供体注射 ，使其排出更多的卵子。
（5）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入 中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。胚胎干细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持 的状态。
材料Ⅰ：家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可提取干扰素用于制药。材料Ⅱ：毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
请依材料所给出的信息分析回答下列问题：
（1）在基因工程操作程序中， 是基因工程的核心，为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的 和 之间。
（2）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应包含：扩增缓冲液（含Mg2＋）、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、 和 。
（3）据材料Ⅱ，在过程②中，将成纤维细胞置于5％CO2的气体环境中，CO2的作用是 。在过程③中，用 处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行 处理。
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
tPA是机体在凝血平衡调节中发挥关键性作用的蛋自质，如图是利用奶牛乳腺生产tPA的图解，据图回答下列问题：
(1)如要在体外迅速扩增tPA基因可采用________技术，此技术需要________酶。
(2)要使tPA基因在奶牛的乳腺细胞中特异性表达，需在其前面加上________________。
(3)过程⑥中用于移植的胚胎是________。移入的胚胎能够在受体母牛体内存活的原因是________，同时能够在子宫内建立正常的生理和组织上的联系。
(4)乳腺生物反应器生产医用人体蛋白比工程菌有优势，是由于乳腺细胞有较强的________能力，省却了从工程菌胞内提取时的破壁、分离等程序，大大降低了纯化成本。
请回答下列有关生物工程的问题：
(1)在转基因鼠的培育过程中。目的基因导入鼠受精卵的常用方法是__________。为鉴定外源目的基因是否转录，取转基因幼鼠相关细胞的RNA，与标记的__________探针进行分子杂交。
(2)植物体细胞杂交技术中，促进细胞融合的物理方法是__________，杂种细胞形成的标志是__________，杂种细胞用__________技术培养成植株。
(3)在试管牛的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行__________处理。若需获取更多的卵细胞一般要对雌性个体注射_______ ___，使其超数排卵。防止多精入卵的两道屏障依次为__________、__________。
如图为制作奶山羊乳腺生物反应器生产某种蛋白质的流程图，请分析回答：
(1)图中A、B分别表示：__ __、__ __。
(2)①过程用激素对奶山羊a进行 ________处理，②过程中对奶山羊b产生的精子在体外受精前需用________法进行获能处理。对采集的卵母细胞要在体外培养至 ________期，才能与获能的精子受精。过程④常采用________法将目的基因导入受精卵内。为获得较多的相同的转基因奶山羊d的早期胚胎，⑤可采用 ________ 。在将早期胚胎移植入代孕奶山羊子宫内之前，需检测早期胚胎细胞是否已经导入目的基因，宜采用________技术。
(3)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是__________________________________________________。
如图甲、乙分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题。
(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是________。
(2)图甲中②过程常在________诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是___________________________________________________。
(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其________。
(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？________。原因是_____________________________________________________。
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
请回答
(1) Y、Z细胞的名称分别是________、________。
(2)①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较大。
(3)③过程中需用到的生物诱导剂是_____________________。
(4)④处需要筛选，其目的是___________________________。
(5)得到的Z细胞可进行体外培养或者在________培养，前者需用_______对Z细胞处理，使之分散开，否则在培养过程中会出现______________。
(6)对健康人进行该传染病免疫预防时，可注射图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。
下图表示利用人类胚胎干细胞(ES细胞)所做的一系列研究，请据图分析回答：
(1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的滋养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，滋养层提供干细胞增殖所需的______________，加入抗生素是为了________________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
(2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有______________的特点。在哺乳动物发育过程中，囊胚的后一个阶段是__________。
(3)过程III中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是____________。过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是____________。该过程研究的意义在于解决____________问题。
tPA是机体在凝血平衡调节中发挥关键性作用的蛋自质，如图是利用奶牛乳腺生产tPA的图解，据图回答下列问题：
(1)如要在体外迅速扩增tPA基因可采用________技术，此技术需要________酶。
(2)要使tPA基因在奶牛的乳腺细胞中特异性表达，需在其前面加上________________。
(3)过程⑥中用于移植的胚胎是________。移入的胚胎能够在受体母牛体内存活的原因是________，同时能够在子宫内建立正常的生理和组织上的联系。
(4)乳腺生物反应器生产医用人体蛋白比工程菌有优势，是由于乳腺细胞有较强的________能力，省却了从工程菌胞内提取时的破壁、分离等程序，大大降低了纯化成本。
【生物——选修3：现代生物科技专题】下图为利用相关基因（用P表示）获得转基因小白猪的简单流程图，请据图回答下列相关问题：
（1）过程①中形成重组DNA常用的酶有＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是＿＿＿＿＿＿。
（2）过程②中，常用＿＿＿＿＿＿酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒的环境、＿＿＿、适合的温度和pH、＿＿＿＿。
（3）在构成重组细胞时，将导入目的基因的细胞转入去核的卵母细胞中，该技术称为＿＿＿＿＿＿，其利用的原理是＿＿＿＿＿＿。图中的卵母细胞应在体外培养到＿＿＿＿＿＿期，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）过程③中所用的胚胎工程技术是＿＿＿＿＿＿，然后将早期胚胎移入另一头与供体＿＿＿＿＿＿、但未经配种的代孕母猪的相应部位。
.下图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题： 
(1) 细胞A的形成过程中最常用的诱导因素是 。
(2)在I图制备单克隆抗体的过程中，包括 两个过程。经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行 ，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，其最大的优越性是 。
(4)Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植，体外受精前，需要对奶牛的精子进行 处理。受精时，往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，受精过程中防止多精入卵的的生理反应包括透明带反应和 反应。进行早期胚胎的体外培养和进行胚胎移植，胚胎培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加 和动物血清。胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是 。
(5) 一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法 。若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行 ，操作过程需要特别注意的问题是 。
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a--h为操作过程，请据图回答有关问题：
（1）“试管牛”技术的操作流程是 （填字母）。
（2）图中数字标号代表的结构名称是① ；③ 。
（3）d操作的名称是 。
（4）图中用到的激素是 ，过程h常用的方法是 。
（5）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：
(1) 从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 ，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为 。
(2) 图中2细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为 ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过成熟卵子和 在体外受精后进行早期胚胎培养获得。
(3) 图中重组囊胚通过 技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
(4) 小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的 分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向 后用于疾病的细胞治疗。
随着人们生活水平的提高,乳制品需求量越来越大,为了扩大生产,提高产崽率,要进行良种牛的培育。下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育的过程,请据图回答:
(1)用 处理使供、受体母牛同期发情。
(2)用 以获取更多的卵(母)细胞。
(3)从A到E中,适宜于牛的胚胎移植的时期有 。
(4)图中标号3为 ,它将来发育为胎膜和胎盘。
(5)利用 技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎。
(6)若一次给受体母牛移入多个胚胎,产生的多个后代基因型相同吗?为什么?
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2007年，美国及日本两个研究团队证实皮肤细胞经过“基因直接重组”后可以转化成为具有胚胎干细胞特性的细胞。这项发现一方面解决了利用胚胎进行干细胞研究的道德争议，另一方面也使得干细胞研究的来源更不受限。请回答下面有关胚胎工程的若干问题。
（1）胚胎工程的理论基础是________________和_________________ ；体外受精的基本原理是人工模拟体内环境，包括营养、温度、pH等，使________________ 成熟，同时使精子获能，最终完成受精。
（2）在胚胎发育过程中，通常把在______________内进行的早期发育称为卵裂。
（3）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由_____________ 或 分离出来的一类细胞。在体外培养时，在培养液中添加____________
使ES细胞可以只增殖不分化；而在培养液中添加牛黄酸或丁酰环腺苷酸时ES细胞可以__________________ 。
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