高中生物动物细胞工程的常用技术试题

下图表示培育转基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字母代表有关结构或个体，数字代表过程、方法。下列有关说法错误的是（）

A．图中过程1－7所涉及的全部生物技术是早期胚胎培养、胚胎移植、细胞核移植

B．通过1、2过程获取分散的细胞时，用到的酶是胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)，培养的细胞在充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为接触抑制

C．图中动物细胞培养过程中应将细胞置于5%CO2的气体环境中。此培养过程中为防止杂菌感染，需要添加一定量的抗生素

D．通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它含有促进细胞核全能性表达的物质

想要获得既高产又抗病毒、抗寒、抗旱、抗除草剂等多重优点的农作物，以下哪种方法能做到( )

A．细胞融合技术	B．转基因技术
C．组织培养技术	D．人工诱变

下面哪一项生物技术与细胞全能性是无关的（）

A．克隆羊的培育	B．干细胞培育出器官
C．无籽西瓜的培育	D．胚胎分割移植

以下不能说明细胞全能性的实验是( )

A．玉米花粉粒培育出植株

B．转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株

C．烧伤病人的健康细胞培养出皮肤

D．柳树的嫩枝插入土中能逐渐长成一株大树

科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄-马铃薯”杂种植株，如图1所示，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。育种工作者还利用番茄进行了如下三组实验如图2.。据图回答下列问题：

(1)实现过程②的技术是，在此之前使用酶处理细胞以除去细胞壁。过程③原生质体经过再生，与此密切相关的细胞器为_。
(2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄-马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄-马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是。
(5)若杂种植株在有丝分裂在过程中，仅保留番茄的染色体而马铃薯的染色体会不断丢失，采用特异性引物对番茄和马铃薯基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。图3是用该引物对双亲及4棵再生植株1～4进行PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有（多选）。

(6)图2 Ⅰ过程培育植物体A主要应用了技术。
(7)用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，培育植物体B的方法(Ⅱ)称为__________________。植物体C的基因型有_________________。（细胞A为两两融合细胞，写出具体的基因型。）
(8)三种育种得到的植物体A、B、C中一定为纯合体的是。

酵母菌菌种A能耐高温，但产酒精率较低，而菌种B不耐高温，产酒精率却较高。为获得耐高温、产酒精率高的酵母菌（目的菌种），进行了如图所示的实验。请回答下列相关问题。

（1）步骤①需要加入蜗牛酶，其作用是。步骤②需加入试剂诱导融合。
（2）利用A、B两菌种对某一药物抗药性的差异，对融合子进行选择。实验中，应将含有融合子的培养液利用方法接种于含有相关药物的培养基上。下表为A、B两种菌种在几种药物的作用下，生长状况的实验结果。因为A种不能独立在基本培养基上生长，所以，据表可以判断，加入（药物），可筛选出融合子。

	多菌灵	三唑酮	霜霉狂杀	放线菌酮
菌种A	+	+	–	–
菌种B	+	–	+	–

注：“+”可以良好生长，“–”不能生长。
（3）将配制好的麦芽汁分装到若干个下图所示的装置中，每个装置中的麦芽汁应该，然后再分别接种筛选出的融合子，密闭培养。一段时间后，观察比较并记录每个装置中，可初步判断融合子的发酵能力。进一步做条件下产酒精能力的测定，以获得所需的目的菌种。

名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后，给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本，再让其在特殊的膜片上增殖。5～7天后，将膜片敷在患者的伤口上，膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口，并促进新生皮肤层生长，达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中，不正确的是( )

A．“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程

B．人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降

C．种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人

D．膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口，加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的HLA有关

【生物——现代生物科技专题】
图为转基因烟草培育过程流程图，

回答问题：
(1)携带外源基因的质粒除了含有外源基因外，还包括_____、______复制原点和标记基因，其中标记基因的作用是__________。
(2)图示过程中，将目的基因导入烟草细胞使用了_______法，①过程要用______处理农杆菌，使之转变为感受态，然后将它们在缓冲液中混合培养以完成转化过程。
(3)②过程叫做___________技术，其理论基础是______________________。
(4)该转基因烟草产生的配子中________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因．

生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。请据图回答：

（1）在培育转入人的生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是、。②过程常用的方法是。③过程培养到阶段。可以采用技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
（2）在抗虫棉培育过程中，常用作为目的基因的载体，目的基因需插入中，以便目的基因能进入受体细胞。④过程中的受体细胞可采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是。⑤过程采用的技术是。
（3）体外培养动物细胞时，需通入一定量的CO2，目的是，培养液中除添加各种营养物质以外，还常常要添加等天然成分。

某实验室做了下图所示的实验研究,请据图回答:

(1)与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较。
(2)过程②是诱导干细胞中基因的结果。
(3)过程③需要用性培养基进行筛选,得到的Z细胞还需进行培养和,经多次筛选,就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(4)科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂,通过基因工程技术将该基因导入待定的细胞(填细胞名称),来制备单克隆抗体,基因导入并成功表达后,受体细胞将具有的特点,在上述操作中用到了PCR扩增仪,其作用是。

某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是___________。细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是____________________________。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_______________。
（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_______________，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_______________或_______________合成水平的差异，确定Y的药效。

I.已知一对等位基因控制的羽毛颜色， $BB$为黑羽， $bb$为白羽， $Bb$为蓝羽。另一对等位基因 $C^L$和 $C$控制鸡的小腿长度， $C^{L}C$为短腿， $CC$为正常，但 $C^L{C}^L$胚胎致死。两对基因位于常染色体上且独立遗传。一只黑羽短腿鸡与一只白羽短腿鸡交配，获得 $F$₁。
（1） $F$₁的表现型及比例是。若让 $F$₁中两只蓝羽短腿鸡交配， $F$₂中出现中不同的表现型，其中蓝羽短腿鸡所占比例是。
（2）从交配结果可判断 $C^L$和 $C$的显隐性关系，在决定小腿长度性状上， $C^L$是，在控制之死效应上， $C^L$是。
（3） $B$基因控制色素合成酶的合成，后者催化无色前体物质形成黑色素。研究人员对 $B和b$基因进行测序并比较，发现 $b$基因的编码序列缺失一个碱基对，据此推测， $b$基因翻译时，可能会出现或，导致无法形成功能正常的色素合成酶。
（4）在火鸡（ $ZW$型性别决定）中，有人发现少数雌鸡的卵细胞不与精子结合，而与某一极体结合形成二倍体，并能发育成正常个体（注： $WW$胚胎致死）。这种情况下，后代总是雄性，其原因是。
II.科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。

（1）由过程获得的 $A$为。
（2）在核移植前，必须先去掉卵母细胞的核。目的是，受体应选用期卵母细胞。
（3）进行胚胎移植时，代孕母羊对置入子宫的重组胚胎基本上不发生，这是为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。
（4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为。

A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如下图所示（仅显示细胞核），将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是（）

A、二倍体；基因型是DdYyRr
B、三倍体；基因型是DdYyRr
C、四倍体；基因型是DdYyRr
D、四倍体；基因型是DdddYYyyRRrr

白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本，甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：
（1）白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在 隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过 的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础的植物细胞具有 。
（2）为观察“白菜—甘蓝”染色体的数目和形态，通常取幼苗的 做临时装片，用 染料染色。观察、计数染色体的最佳时期是 。
（3）二倍体“白菜—甘蓝”的染色体数为 。这种植株通常不育，原因是减数分裂过程中 。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”这种变异属于 。

下列是有关细胞的叙述，请作出判断（）
①浆细胞比效应T细胞含有较多的高尔基体和内质网；
②与硝化细菌最主要的区别是酵母菌有成形的细胞核；
③大肠杆菌细胞分裂前期时，每个细胞中含有两个中心体；
④神经干细胞分化成各种神经细胞的过程表现了细胞的全能性；
⑤将融合的异种植物花粉育成幼苗并用秋水仙素处理可得到可育植株；
⑥高等动物剧烈运动时肌肉细胞因供氧不足而进行的无氧呼吸不产生CO₂

A．有一种说法错误	B．有两种说法错误
C．有两种说法正确	D．有三种说法正确