下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。
(1)X、Y、Z细胞的名称分别是________、________、________。
(2)①过程类似于植物组织培养技术中的________过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较________。②过程的实质是________。
(3)③过程中需用到的生物诱导剂是_____________________
___________________________________________________。
(4)④处需要筛选，其目的是______________________________
__________________________________________。
(5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性32P的细胞器是________、________。
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题：
（1）为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用 酶和 酶去除细胞壁，获得具有活力的 ，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成 组织，然后经过 形成完整的杂种植株。这种培养技术称为 。
（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指 。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是 。
（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
(1)过程①中最常用的运载工具是 ，所需要的酶是限制酶和 。
(2)在过程②中，用 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是 。
(3)在过程③中，用 处理以获取更多的卵(母)细胞。成熟卵(母)细胞在核移植前需要进行 处理。
(4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
为研究铬（Cr）对黑麦细胞的毒性作用，科学家研究了不同浓度的铬（Cr）对黑麦根尖细胞分裂指数（即视野内处于分裂期的细胞数占细胞总数的百分比）和染色体畸变率的影响，实验结果如下。
表：K2Cr2O7对黑麦根尖细胞有丝分裂指数及染色体畸变率的影响
| 实验处理 |
有丝分裂指数（%） |
染色体畸变率（%） |
|
| 对照组 |
4.92 |
0.42 |
|
| K2Cr2O7浓度（mg·L-1） |
20 |
5.84 |
1.93 |
| 40 |
6.15 |
3.03 |
|
| 60 |
5.90 |
2.59 |
|
| 80 |
5.74 |
1.99 |
|
| 100 |
4.52 |
1.17 |
|
| 120 |
4.10 |
0.89 |
（1）制作黑麦根尖细胞临时装片，需经过 →漂洗→染色→制片等几个步骤，其中可用 溶液对染色体进行染色。
（2）由表中数据可以看出，促进细胞有丝分裂的K2Cr2O7的最适浓度为 mg·L-1,而在K2Cr2O7浓度≥ mg·L-1时，对黑麦根尖细胞的有丝分裂有抑制作用。
（3）科学家通过在显微镜下观察染色体的 和数目，统计并比较 的染色体畸变率，从而明确了铬（Cr）对黑麦细胞的毒性。
如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题。
(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是__________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是__________。
(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。
(3)图3中过程①是植物细胞形成__________的阶段，该阶段所用的酶是__________。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________。
油菜的株高由等位基因G和g决定，GG为高杆，Gg为中杆，gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因，B基因与G基因在油菜的株高上有相同的效果，并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题：
（1）可用含___________的培养基来筛选含有目的基因的油菜受体细胞。培育转基因油菜主要运用了转基因技术和___________技术。
（2）若将一个B基因连接到了矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，且B基因与g基因位于非同源染色体上，这样的转基因油菜表现为___________。写出该转基因油菜自交产生子一代的遗传图解（无目的基因表示为b）。
（3）若将一个B基因连接到了中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达，培育了甲～丁四种转基因油菜（如下图）。
①与甲的株高相同的是___________。四种转基因油菜分别自交，在不考虑交叉互换的前提下，子代有3种表现型的是___________。
②另有一种转基因油菜的自交子代也有3种表现型，请在下图中的染色体上标出B基因的位置___________
人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入“雌性奶牛胚胎”的细胞中，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）重组细胞①和②中___________（①／②）实现了基因的重组。
（2）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是___________。
（3）实验过程b利用的技术是___________，胚胎工程操作中最后环节是___________。
（4）若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型（相同／不同）___________，理由是___________，此项技术称为___________。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用___________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中作为饲养层的是___________细胞。
（6）哺乳动物的胚胎的营养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及___________等物质。
I（10分，每小题2分）请完成下列(1)~(5)题，每题只有一个选项符合题目要求，将所选选项填写在每小题的横线上。
哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成程示意图(N表示染色体组)。
（1）据图分析，下列叙述错误的是________
A．次级卵母细胞形成的过程需要激素调节
B．细胞III只有在精子的作用下才能形成成熟卵子
C.II、III和IV细胞分裂后期染色体数目相同
D．培育转基因动物应选择细胞IV作为受体细胞
(2)下列实践活动包含基因工程技术的是________。
A．水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种
B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦
C．将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株
D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆
(3)软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为HH的个体早期死亡。一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是一。
A．首先经超数排卵处理后进行体外受精
B．从囊胚中分离细胞，培养后检测基因型
C．根据检测结果筛选基因型为hh的胚胎
D．将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫
(4)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误是一
A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C．将重组DNA分子导人烟草细胞
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
(5)下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是________。
A．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离
B．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中
C．种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性
D．转基因植物的目的基因可能转入根际微生物体内
Ⅱ（8分，每空1分）
单纯疱疹病毒I型(HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题：
(1)在制备抗HSV-I的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗____的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了____反应，再从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的________细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是________。
(2)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的________中使其增殖，再从________中提取、纯化获得。
(3)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白，其原因是该抗体具有_________和________等特性。
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
⑴构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割。
⑵培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。
⑶香蕉组织细胞具有______________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。
(10分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，目前临床上使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)，其简要生产流程如右图。请回答：
⑴图中①所指的是________技术。
⑵图中②所指的物质是_______，③所指的物质是 。
⑶培养重组CHO细胞时，为便于清 除代谢产物，防止细胞产物积累对细胞自身造成危害，应定期更换_________ 。
⑷检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
I.2013年3月在人体首次发现了新禽流感病毒H7N9，该病毒不仅造成了人类的伤亡，同时重创了家禽养殖业，尤为引入关注。请分析回答下列问题
(1)在转基因微生物细胞内由抗体基因到合成H7N9抗体要经过__________两个阶段。
(2)H7N9可感染人和家畜，说明不同种类的被感染细胞表面具有相似的__________。产生抗体的细胞可以由____________________细胞分化而来。
(3)研究发现，新禽流感病毒H7N9的遗传物质中含有禽流感病毒H9N2的基因片段，推测此变异的来源是两种病毒进入同一细胞进行了__________。
II.(16分)石柱黄连因含小檗碱，黄连碱等被列为国药。研究人员为探索育种生理指标，选取同一株石柱黄连的叶肉细胞，经克隆后长期种植形成HA、HB、HD三个株系的植物群体，进行实验，得到以下研究结果：
实验一：温度影响不同株系光合作用的研究结果
| 株系 |
CO2固定量(mg·h﹣1) |
||
| 20℃ |
30℃ |
35℃ |
|
| HA |
14.32±0.83 |
12-32±0.60 |
— |
| HB |
8.78±0.95 |
10.56±0.48 |
12.77±0.98 |
| HD |
4.8±0.15 |
6.5±0.12 |
6.4±0.12 |
实验二：温度影响某株系光合作用与呼吸作用的研究结果
据图表回答下列相关问题：
(1)小檗碱，黄连碱是细胞的代谢产物，利用植物组织培养技术将叶肉细胞培养到______阶段即可生产提取。
(2)实验一自变量是__________；推测HA在35℃不能进行光合作用的原因是_________________。(答两点)
(3)在3种温度下保持较平稳状态且光合速率较高，抗高温性最好的株系是__________。
(4)实验二的研究对象是__________株系，若每天光照12小时，最有利于植物生长的温度是__________，35℃时叶绿体内产生的ATP总量__________(大、小、等)于线粒体中产生的ATP总量。
(5)就黄连根系发达可保持水土并可入药而言，该物种的存在体现了生物多样性的__________价值。
下图是细胞融合示意图，请据图回答：
(1)过程①②应使用________________________处理细胞，以去除植物细胞壁。
(2)过程③叫做________________，该过程常用的诱导方法是_______________。
(3)过程④是细胞壁的再生过程，与此过程密切相关的细胞器是__________。
(4)⑤过程中进行的细胞分裂方式是________________，该过程先诱导细胞分裂形成______________，再由它分化形成杂种植物幼苗。
(5)若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内舍B个染色体，则番茄—马铃薯细胞内含__________________个染色体；若对番茄和马铃薯采用杂交育种方法能成功的话，得到的后代应含_____________个染色体，若要得到可育的番茄一马铃薯，必须用_________________来处理幼苗。这两种方法相比，体细胞杂变方法的优点是_____________________________________。
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：
（1）为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用______酶和____酶去除细胞壁，获得具有活力的____________________，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_______组织，然后经过_______形成完整的杂种植株。这种培养技术称为_____________。
（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_________________。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是______________________________。
（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的
__________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
下图表示转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：
（1）构建的基因表达载体除含有人抗体基因、标记基因外，还应具有 。
（2）①过程进行之前，要对采集的精子进行 处理。
（3）图中②过程常用的诱导因素有 。
（4）细胞X是 ，体外培养细胞X所用的培养液必须添加 等天然成分。
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