（10 分）请回答下列有关生物工程的问题：
（1）对于基因工程来说，其核心步骤是________，若要培育能从乳汁中分泌人的干扰素的转基因牛，需要选择的受体细胞是____________（受精卵、乳腺细胞），为了让转入的干扰素基因高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的和之间。
（2）植物体细胞杂交过程中，在把植物细胞杂交之前，必须用纤维素酶果胶酶去除细胞壁，杂交过程的另一个环节是__________________；培育出诸如“番茄—马铃薯”这样的杂种植株利用了植物细胞全能性的原理。胚胎干细胞也有类似的特性，并且胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生。
（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，这两种细胞一种是在体外能够大量增殖的骨髓瘤细胞，另外一种是_____的B 细胞；体外培养的过程中，贴壁生长的细胞会出现_________现象。
（4）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其 。另外，培养的卵母细胞需要发育至 期。
（10分，每空1分）下面是与现代生物科技有关的问题，请回答：
Ⅰ、人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG 单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请分析回答：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到____________ 和____________ 技术。
（2）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于__________，使小鼠产生分泌相应_________的淋巴细胞。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________________________。
（3）此过程生产的单克隆抗体可以与______________特异性结合，从而诊断早孕。
Ⅱ、某研究所在“神舟四号”飞船进入太空后为一对“新人”——黄花烟草原生质体和革新一号烟草原生质体举办了特殊的“婚礼”。 将两个“新人”放入融合器中，当充满液体的融合器加上直流电场，两个原本相互游离的细胞一下子贴到一起，开始了“窃窃私语”。紧接着，在瞬间高压脉冲的作用下，两股细胞质展开了“心灵沟通”。渐渐地，细胞核也扭摆着“亲热”起来，20min后，一个新生命就这样诞生了。
（1）“细胞婚礼”中用到的诱导融合技术是 。
（2）两种烟草原生质体融合时，（只考虑两个细胞融合）可能出现 种融合结果，其中 类型是我们需要的。
（3）植物体细胞杂交技术与传统的有性杂交相比，其突出的优点是 。
白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18.以白菜为母本，甘蓝为父本，经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜—甘蓝”杂种幼苗。请回答问题：
（1）白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在 隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过 的方式产生后代。雌蕊离体培养获得“白菜-甘蓝”杂种幼苗，所依据的理论基础的植物细胞具有 。
（2）为观察“白菜—甘蓝”染色体的数目和形态，通常取幼苗的 做临时装片，用 染料染色。观察、计数染色体的最佳时期是 。
（3）二倍体“白菜—甘蓝”的染色体数为 。这种植株通常不育，原因是减数分裂过程中 。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜-甘蓝”这种变异属于 。
(10分)如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题。
(1)在图1中注射到小鼠体内的物质是________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是________。该过程所用的生物技术有____________________________________________。
(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在________(填“体内”或“体外”)完成的。
(3)图3中过程①是植物细胞形成______的阶段，该阶段所用的酶是________。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是________。
(14分)某二倍体植物是杂合子,下图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答下列问题。
(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的 过程,②表示的是 过程,X代表的是 ,③表示的是 过程,④表示的是诱导 过程。
(2)图中由未成熟花粉形成完整植株的途径有两条,具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中的______种类及其浓度配比,最后获得的来源于未成熟花粉的完整植株都称为 植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株,说明未成熟花粉具有 。
(3)对植株甲进行__________才能使其结实产生后代(乙),否则植株甲只有通过_________的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中,能产生可育花粉的是 植株,该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种,该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种。花药培养在育种上的特殊意义是 ,从而开辟育种新途径。
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量__________。
（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是___________。细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是____________________________。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长____________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用___________消化处理。
（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的_______________。
（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入_______________，B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的_______________或_______________合成水平的差异，确定Y的药效。
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：
(1)为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用 酶和 酶去除细胞壁，获得具有活力的 ，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成 组织，然后经过 形成完整的杂种植株。这种培育技术称为 。
(2)假设甲与乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是 。
(3)杂交植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的 等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
Ⅰ.囊性纤维化是一种严重的遗传性疾病，导致这一疾病发生的主要原因是编码CFTR蛋白的基因发生突变，下图表示CFTR蛋白在氯离子跨膜运输过程中的作用。
（1）图中所示为细胞膜的 结构，其中构成细胞膜的基本支架是 ，氯离子跨膜运输的正常进行是由膜上 决定的。
（2）在正常细胞内，氯离子在CFTR蛋白的协助下通过 方式转运至细胞外，随着氯离子在细胞外浓度逐渐升高，水分子向膜外扩散的速度 ，使覆盖于肺部细胞表面的黏液被稀释。
Ⅱ.(8分)甲、乙两种化学物质可能有一定致畸、致癌作用，利用动物细胞培养的方法鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请依据实验结果完成下列实验报告。
(1)实验步骤：
①制备细胞悬液：用 处理小白鼠胚胎组织离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。
②进行细胞培养：
a.取A．B．C三个洁净的锥形瓶，分别加入 。
b.向A．B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀；
C瓶加等量生理盐水，作为对照。
c.把3个培养瓶放在37℃的CO2培养箱中培养。
③制作临时装片
④镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于有丝分裂中期的细胞，与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片进行对比，以确认发生变异的细胞。统计 。
(2)实验结果：
| 培养瓶 |
A |
B |
C |
| 变异细胞占总细胞数 |
1.3% |
12.5% |
0.1% |
(3)请写出实验结论： 。
（选3，15分）慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
（1）要实现①超数排卵，需用 激素对崂山奶山羊A进行处理。
（2）过程④需将重组质粒导入受精卵可采用 方法。冲卵能把供体母牛子宫内的早期胚胎冲洗出来，这是因为早期的该结构处于________________状态。
（3）在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。由供体获得早期胚胎后，可通过 技术，得到更多的相同优良个体，在操作时，要特别注意将囊胚的___________均等分割。
（4）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。移入受体的供体胚胎遗传特征的在孕育过程中 (“受”/“不受”)影响。
请阅读下列材料并回答：
材料一、由于细胞的密度不同，在地面上受重力影响，细胞的融合非常困难，在太空进行此试验比在地面试验细胞融合率大大提高。“神舟”六号飞船上进行了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学实验，在电融合仪内经过l60min后，终于获得成功。
材料二、右图为哺乳动物生殖过程及相关细胞工程的示意图，其中b为卵细胞，c、d为体细胞。
（1）细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性在于 。在太空进行细胞融合与在地面进行细胞融合相比，其优越性在于 。（每空2分）
（2）利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造 开辟了新的途径。
（3）动物个体甲、乙的产生分别属于 生殖和 生殖。
（4）在“神舟”六号飞船上举行的“太空融合”，与上图中的方法 的原理相同。
（5）人工诱导动物细胞融合与诱导植物细胞融合的方法相同的是都可用 方法和 方法，此外动物细胞融合还可用 作为诱导剂。根据上述材料，你认为在神舟六号上所用的诱导方法是 。
(8分，除特别说明外每空1分)
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图。请回答：
（1）过程①代表的是 。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用___ 和 两种工具酶。
（3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较，或用图中的 进行特异性结合检测。
(14分，除特别说明外每空1分)
经过一个世纪的发展，植物细胞工程技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题、花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富，回答相关问题：
（1）植物细胞工程最基本的技术是 ，它所依据的生物学原理是 ，它的中心步骤是获得 (2分)结构。
（2）广东顺德的兰花、高洲的香蕉等优良植物的生产都可通过微型繁殖技术来提供试管苗，其优点是不仅可以 ，还可以高效快速地实现无病毒种苗的大量繁殖，获得无病毒种苗的方法是 (2分)。
（3）植物体细胞杂交技术的关键是获取有活力的 以及诱导其融合，诱导融合的化学方法是用 做诱导剂，植物体细胞杂交技术的重大意义是 (2分)。
（4）人工种子的主体是 。在制备人工种子时可根据需要添加防霉药物，它应加在哪一部分？ (2分)。
为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”,科研人员提出以下两套培育方案:
(1)甲方案中玉米基因能在水稻体内表达的理论依据是 。此方案所用技术的核心是 。
(2)在乙方案中,在体细胞杂交前需要除去 ,再诱导细胞融合。此方案的优点是能克服 。
(3)图中的转基因水稻体细胞、杂交细胞都能培育成“黄金大米”完整植株的原因是 。
(14分，除特别说明外每空1分)
经过一个世纪的发展，植物细胞工程技术解决了人类生存的关键问题（如粮食问题、花卉苗木生产等），为人类创造了巨大的财富，回答相关问题：
（1）植物细胞工程最基本的技术是 ，它所依据的生物学原理是 ，它的中心步骤是获得 (2分)结构。
（2）广东顺德的兰花、高洲的香蕉等优良植物的生产都可通过微型繁殖技术来提供试管苗，其优点是不仅可以 ，还可以高效快速地实现无病毒种苗的大量繁殖，获得无病毒种苗的方法是 (2分)。
（3）植物体细胞杂交技术的关键是获取有活力的 以及诱导其融合，诱导融合的化学方法是用 做诱导剂，植物体细胞杂交技术的重大意义是(2分)。
（4）人工种子的主体是 。在制备人工种子时可根据需要添加防霉药物，它应加在哪一部分？ (2分)。
【生物选修3—现代生物技术】已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有DNA合成的S途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加入聚乙二醇促进融合，获得杂种细胞（一般只考虑细胞两两融合）。请回答：
（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有 种融合细胞。
（2）设计方法是（不考虑机械方法）从培养液中分离出杂种细胞，分析回答：
方法：在培养液中添加入 再收集增殖的细胞。
原理：加入该物质后，使 合成途径阻断，仅有该合成途径的 细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的 途径合成DNA而增殖。
（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三个细胞株。各细胞株内含有的人染色体如右表（“+”有，“－”无）。
| 细胞株 |
人染色体编号 |
|||||||
| 1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
|
| A株 |
+ |
+ |
+ |
+ |
－ |
－ |
－ |
－ |
| B株 |
+ |
+ |
－ |
－ |
+ |
+ |
－ |
－ |
| C株 |
+ |
－ |
+ |
－ |
+ |
－ |
+ |
－ |
测定各细胞株中人体所具有五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。如果人的基因作用不受鼠基因影响，则支配c、d和e酶合成的基因依次位于人的第 、 和 号染色体上。
（4）下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合），请据下图回答：
若该过程是制备治疗流感的单克隆抗体，A为人的B淋巴细胞（染色体组成为2A+XX=46），B为鼠骨髓瘤的细胞（染色体组成为2A+XX=40）。A细胞来自于 人。杂种细胞C中共有 个染色体组，一个染色组可表示为 。
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