下图是单克隆抗体制备的流程图。
（1） 技术是单克隆抗体技术的基础。
（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于 培养基。
（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。
（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用 。
（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点，又具备淋巴细胞的 特点。
（6）淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化、发育而来。
（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。
克隆羊“多利”的问世，很快在全世界引发了一场大讨论，其中关于“治疗性克隆”的问题也成为人们关注的焦点。下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答：
（1）过程A表示____________，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由①________细胞提供细胞质，进行人工重组。
（2）经过程B得到的结构中，④是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持________（“分化”或“未分化”）状态。
（3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞核____________________。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是____________________的结果。
（4）对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？
下图是植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：
（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步聚最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。
（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是：利用
等（至少写出两种）促使原生质体融合；化学方法是用 等试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。
（3）③表示融合后的原生质体再产生新的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内________(细胞器)有密切关系。
（4）在④⑤过程中,细胞分裂的主要方式是___________。
（5）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以 。目前，动物细胞融合技术最重要的用途是 。
回答有关微生物和植物组织培养的问题：
（1）在生产过程中，发现葡萄酒变酸，表面观察到菌膜，造成此现象的生物是____________。腐乳外部有一层致密的“皮”，这是__________的匍匐菌丝形成的。制作泡菜时，有时坛内会长一层白膜，这是__________繁殖形成的。
（2）微生物的接种方法很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种等方法，虽然这些技术的操作方法各不相同，但是其核心都是要_______________，来保证培养物的纯度。
（3）从土壤中分离出分解尿素的细菌之后，对其进一步鉴定，要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，如果指示剂变红，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。
（4）下图为花粉植株的培育途径
为了挑选到单核期的花药，通常选择_______________的月季花蕾。选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，采用的染色剂是___________，它可以将细胞核染成蓝黑色。①表示的生理过程是_____________________。
2012年10月8日，瑞典卡罗琳斯卡医学院宣布，将2012年度诺贝尔生理学或医学奖授予英国科学家约翰•格登和日本科学家山中伸弥，以表彰他们“发现成熟细胞可以被重新编程为多功能的干细胞”，使人类对细胞和器官发育的认识发生了革命性的变化。通过转入特定基因，可将体细胞诱导形成多能干细胞(iPS细胞）。iPS细胞与胚胎干细胞相似，可以产生各种类型的体细胞。下图是应用iPS细胞技术治疗镰刀型细胞贫血症的技术流程。请回答：
（1）过程①是在体外分离患者的体细胞，需要用_______处理，才能分散成单个细胞;在培养患者体细胞时，通常要在细胞培养液中添加一定量的_______，以防培养过程遭受细菌的污染。
（2）过程②是利用病毒，将4个目的基因（Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc)导入患者体细胞，使其转化成iPS细胞。在这一过程中，迅速扩增4个目的基因的常用技术是_______。然后将4个目的基因与逆转录病毒结合,再将其导入患者的体细胞。在这一过程中,逆转录病毒所起的作用是______________。
（3）与过程③的遗传学原理相同的过程是过程_______
（4）过程④的本质是_______。
（5）过程⑤用于移植治疗的造血干细胞的遗传物质与患者的遗传物质相比,其特点是:______；用于移植治疗时,是否会发生免疫排斥反应？_____________________
A、转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞)：
（1）图中①过程用到的酶是 ,所形成的B叫做 。
（2）②过程常用 处理农杆菌,使之成为 细胞,利于完成转化过程。
（3）图中③过程需要用到的激素是 。
（4）在分子水平上,可采用 的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。
B、野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯。
（1）专家在实验中，需用到的酶主要有 和 等。
（2）专家在实验中，用于诱导融合使用的化学试剂是 。
（3）对于农民，种植杂交系马铃薯除可获得较高的收成外，还有什么优点？（要求写出两点）
(10分) 请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。
（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。
（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 _____________(能、不能)满足自身最佳生长的需要。
（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
(15分)下图可表示细胞融合技术的一些过程，请据图回答：
（1）若A、B细胞为动物细胞，从A和B细胞到C细胞的过程中，常用的不同于植物细胞的诱导融合手段是 ___。A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有 特性。
（2）若A、B细胞为植物细胞，首先用___________________酶去掉细胞壁。由此生成的结构称为 。A、B到C细胞的过程中，融合完成的标志是 。形成的细胞还要应用_____________________技术培养成植株。
（3）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了___________，图中B为_________________。所形成的C有 种。人们需要的细胞称为 ________细胞。该细胞具有什么特点：_______________、______________。细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为 _过程。
（4）科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(prC)，该基因能激发许多动物细胞分裂。有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：(2分)
实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定甲、乙两种化学物质毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列实验报告并回答有关问题。
实验原理：有毒物质能诱导细胞产生变异，根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
实验材料：活的小白鼠胚胎。
药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。
实验步骤：
（1）制备细胞悬浮液：把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入_________处理，使胚胎组织分散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，_____ ______，加入等量的细胞悬浮液。
②向A培养瓶中加入化学物质甲，向B培养瓶中加入____________，向C瓶内加入等量的生理盐水，并将培养瓶摇匀。
③在实验中，C培养瓶起什么作用？___________。
（3）制作临时装片：
①当细胞增殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞__________，再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，用____________染色，3～5min后，盖上盖玻片。
（4）镜检和统计：
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于_________期的细胞，并与C组对比以确认发生变异的细胞，同时统计___________________________。
（5）结果与结论：经研究人员实验得知：A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%，由此可知该实验的结论是__________________________________。
(每空2分，共14分)胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物(RPE)可定向诱导人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)分化成胰岛B细胞。请回答下列问题：
（1）取人羊膜组织刮除血块、上皮细胞，冲洗后剪碎，然后用胰蛋白酶处理，去除细胞表面 ，使细胞分散开，最终制成hAMSCs悬液。将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养，先后出现 现象，直至细胞停止分裂增殖，这时需要将细胞进行相关处理，然后进行传代培养。
（2）取传至第3代的hAMSCs放入细胞培养板，同时加入RPE进行诱导分化培养。该代hAMSCs能保持细胞正常的 。诱导分化培养15天后，提取细胞的 ，用胰岛素基因探针进行分子杂交，可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞。
（3）用人的杂交瘤细胞来生产人源单克隆抗体难以成功，因此单克隆抗体大都来自鼠源。但鼠源单抗在人体内使用，会产生较强的免疫原性，为解决这一问题，发明了嵌合抗体。大致过程如上图所示，嵌合抗体能降低鼠源抗体的免疫原性，从图中可以推测，免疫原性的产生主要与抗体的 (选填“V区”、“C区”)有关。构建的人鼠嵌合抗体基因表达载体除了标记基因和目的基因外，还有 。
（4）科学家们用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用”的结构基因。他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成杂交瘤细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞。这些细胞既保持了合成大鼠肝细胞3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠干细胞的这3种蛋白，但是在正常的小鼠成纤维细胞中从不合成这些。由此可见，融合实验证明了小鼠成纤维细胞 。
根据现代生物技术知识回答：
（1）“试管婴儿技术”不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生优育开辟了新的途径。在体外受精时，精子首先要进行___________处理；卵母细胞则要培养到减数第二次分裂中期才能与精子结合。采用__________技术，能得到“同卵双胞胎”。如果滥用试管婴儿技术设计婴儿性别，将会破坏人类正常的_________________。
（2）用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是10代以内的细胞一般能保持_________________，可以保证供体细胞正常的遗传基础。
（3）应用修复技术治理镉污染的土壤，可以进行植物修复。常选择种植菊芋等耐镉植物，这体现了生态工程的_____________原理。植物中积累的镉会通过食物链的富集作用造成危害，所以不能用修复地的植物饲喂动物。
（4）利用基因工程技术可使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”。如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，其核心步骤是____________________。科学家将生长激素基因和牛乳腺蛋白基因的______________、终止子等重组在一起，通过______________方法导入牛的受精卵中。
(15分)治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中,构建形成重组胚胎,体外培养到一定时期分离出Es细胞,获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞(如神经细胞、肌肉细胞和血细胞),用于治疗。请回答下列问题:
（1）ES细胞是 的简称,在形态上,表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上,具有_ 。将重组胚胎培养到 时期,从该时期的 中进行分离,从而获得ES细胞。
（2）在培养液中加入 可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞,细胞分化的本质原因是基因 的结果。
（3）科学家将患者的体细胞核植入去核的卵细胞中,而不是直接用体细胞进行细胞培养的原因是 。
（4）某次科学家将体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞,并进行了胰岛素释放实验:控制培养液中 的浓度,检测细胞分泌的胰岛素的量,下图为实验结果： 
据此分析确认ES细胞诱导成功。得到此结论的依据是 。
(10分) 请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。
（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。
（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 _____________(能、不能)满足自身最佳生长的需要。
（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。
（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出_______注入B品种牛的_________卵母细胞。
（2）对重组细胞经过某处刺激和培养后，可形成胚胎，在培养过程中，配制的培养液通常加入________________等天然成分，提供O2和CO2的作用分别是____________和____________。
（3）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以从屠宰场收集__________，并从中获得卵母细胞。
（4）克隆牛的产生说明____________具有全能性。克隆牛的性状主要表现______品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自_________个亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成___________（相同，不同）。
据近日《每日科学》网站报道，英国牛津大学科学家最近发现了一种“改造”病毒的新方式，可按需要剔除病毒的关键毒性，并保持其复制能力，使其成为杀死癌细胞却不伤害健康细胞的“安全卫士”。这将为癌症治疗的改进提供新的平台，也将为新一代抗病毒疫苗的研制奠定良好基础。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：(11分)
（1）②过程可以通过_______技术大量扩增A基因，该技术的原理是___________。
（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和_________两种工具酶。
（3）若受体细胞为动物细胞，过程④常用的方法是___________，A蛋白属于____________性物质。
（4）过程⑦运用了________________技术，该过程技术的原理是________________。
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_______________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行______________比较；或用图中的______________进行特异性结合检测。
粤公网安备 44130202000953号
