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  • 更新 2022-09-03
  • 科目 生物
  • 题型 综合题
  • 难度 中等
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(每空2分,共14分)胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法。利用小鼠再生胰腺提取物(RPE)可定向诱导人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)分化成胰岛B细胞。请回答下列问题:

(1)取人羊膜组织刮除血块、上皮细胞,冲洗后剪碎,然后用胰蛋白酶处理,去除细胞表面             ,使细胞分散开,最终制成hAMSCs悬液。将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养,先后出现             现象,直至细胞停止分裂增殖,这时需要将细胞进行相关处理,然后进行传代培养。
(2)取传至第3代的hAMSCs放入细胞培养板,同时加入RPE进行诱导分化培养。该代hAMSCs能保持细胞正常的          。诱导分化培养15天后,提取细胞的              ,用胰岛素基因探针进行分子杂交,可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞。
(3)用人的杂交瘤细胞来生产人源单克隆抗体难以成功,因此单克隆抗体大都来自鼠源。但鼠源单抗在人体内使用,会产生较强的免疫原性,为解决这一问题,发明了嵌合抗体。大致过程如上图所示,嵌合抗体能降低鼠源抗体的免疫原性,从图中可以推测,免疫原性的产生主要与抗体的       (选填“V区”、“C区”)有关。构建的人鼠嵌合抗体基因表达载体除了标记基因和目的基因外,还有                   
(4)科学家们用细胞融合实验证明,分化的细胞中存在“闲置不用”的结构基因。他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成杂交瘤细胞,筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞。这些细胞既保持了合成大鼠肝细胞3种特异蛋白的能力,也合成了小鼠干细胞的这3种蛋白,但是在正常的小鼠成纤维细胞中从不合成这些。由此可见,融合实验证明了小鼠成纤维细胞                                            

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(每空2分,共14分)胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方