下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1)________技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)在图中HAT培养基属于 培养基，只有融合的杂种细胞才能生长。动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用________。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是________________。
(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速________特点，又具备淋巴细胞的________特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行__________和________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(5)淋巴细胞是由动物体骨髓中的________细胞分化、发育而来的。
(6)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其________性。
下列图表是植物组织培养的简略表示。请据此回答：
（1）①表示 ，此过程体现了植物细胞的 性，①能被培养成为④的根本原因是
（2）由①到②的过程称为 ，②表示
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）
（4）若①是花药则④是 ，继续对其使用 处理可获得 体植株，该过程称为______________。
（5）若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④的叶片的颜色是 这说明根尖细
胞
让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如图所示：
(1)图中涉及__________、__________等现代生物技术(至少写出两项)。
(2)羊N能分泌牛乳蛋白，说明_________________________________________________；通常情况下采用人工方法获取牛乳蛋白基因，这是因为_____________________________________。
(3)小羊A.小羊B.小羊c的性状表现__________，小羊a和羊N呢？__________。(填“相同”“不同”或“不完全相同”)
某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列问题：
①培养之前，肿瘤组织必须先用 等处理成单个细胞。
②若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞，经24h培养后，取一滴稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量)观察，发现有64个肿瘤细胞，此肿瘤的细胞周期约为 h。
③与正常细胞相比，在显微镜下可见明显增多的细胞器是 。
④某科研单位研制出一种新型药物X，据说对此类肿瘤有较好的疗效，请你设计一个方案加以验证。写出你所设计的实验步骤：
a．将相同的培养液分为相等的两份， ；
b．将等数量的肿瘤细胞置于两份培养基中；
c． _____ 。
【生物-现代生物科技专题】
治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：
（1）过程①采用的是细胞工程中的技术，过程②采用的是胚胎工程中的技术。
（2）体细胞进行体外培养时，所需气体主要有，其中
的作用是维持培养液（基）的。
（3）如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体（重组载体）时必须使用和两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。
（4）胚胎干细胞可以来自于囊胚中的。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体(填""或"
")，则不会发生免疫排斥反应。
某医院病理室为确诊一患者的肿瘤是良性还是恶性，切取了一小块肿瘤组织进行培养。请回答下列与肿瘤细胞的培养及其癌症的治疗有关的一些问题：
（1）进行体外培养时，肿瘤组织必须先用 等处理成单个细胞。
（2）在培养中若要测量肿瘤细胞的数量，可以通过与红细胞数目对比的方法。将待测样品与等量的已知含量为200个红细胞的溶液混匀，涂布在载玻片上，经处理后观察，在显微镜下随机选若干个视野进行计数并计算平均数，其中肿瘤细胞平均数量为20个，红细胞平均数量为4个，则待测样品中肿瘤细胞的含量为 个。
（3）与正常细胞相比，恶性肿瘤细胞（癌细胞）能够无限增殖，增殖方式为 ；癌细胞膜上的 减少，导致癌细胞容易在机体内分散 。
（4）化学治疗可采用药物，如5－氟尿嘧啶，它的结构与尿嘧啶非常相似，可以干扰 的过程，从而影响癌基因的表达。
（5）若利用对某种肿瘤细胞具有靶向性的特异性单克隆抗体治疗肿瘤，单克隆抗体与肿瘤细胞结合并发挥作用的过程属于 免疫的 阶段。
（6）某科研单位研制了一种新药X，为了验证此药物对此类肿瘤有较好的疗效，将肿瘤细胞悬浮液分成等细胞数的A、B两组。A组加入3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸，B组应加入 。相同条件下养一段时间后，洗去培养液，把两组细胞做相应的处理，分别检测两组细胞的放射性强度。如果出现的实验现象为 ，则说明此药物的疗效好。
甲、乙两种化学物质可能有一定致畸、致癌作用，利用动物细胞培养的方法鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请依据实验结果完成下列实验报告。
I．实验步骤：
（1）制备细胞悬液：用 处理小白鼠胚胎组织离散成单个细胞，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
① 取A．B．C三个洁净的锥形瓶，分别加入 。
② 向A．B两个培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀；
C瓶不作处理，作为对照。
③ 。（要求写出培养场所）。
（2）制作临时装片
（3）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，寻找处于 期的细胞，与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片进行对比，以确认发生变异的细胞。统计 。
Ⅱ．实验结果：
| 培养瓶 |
A |
B |
C |
| 变异细胞占总细胞数 |
1.3% |
12.5% |
0.1% |
Ⅲ．请写出实验结论： 。
下图可表示细胞融合技术的一些过程，请据图回答：
(1)若A、B细胞为植物细胞，得先用 酶处理，由此得到的A和B称为 。A、B到C融合完成的标志是 ；融合后还要应用_______________技术把细胞C培养成植株D。培养过程中，所用的固体培养基除了添加水、无机盐、糖等营养物质，还必须加入 等调节物质。
(2)若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为能产生抗体的B淋巴细胞，在A、B到C的过程中，所形成的融合细胞C有多种，符合人类所需的D细胞叫做 ，从中选择出它的方法是用 培养筛选。D细胞的特点是既能无限繁殖，又能产生 。
科学家从某些能无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发许多动物细胞的分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下面的问题。
(1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体，一般选用的是________和________融合。
(2)有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图所示。请回答：
①酶A是指________，酶B是指________。
②对已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的原因是_________________________________________________________________；
Ⅲ指代的细胞具有的特点_________________________________________________________________。
③有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，试用相关的图示及文字表示该过程：___________________________________________。
某研究小组欲将已知抗盐基因导人原生质体培育抗盐菊科植物。请回答：
（1）为获得大量抗盐基因，可通过 技术进行扩增，也可将其连接到 上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体 。酶混合液需通过 灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在 中进行。
（3）可通过 方法，直接将抗盐基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出 ，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗盐基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行 ，验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。通过将扩大繁殖的再生植株转接到含有 的培养基，根据生长状况初步筛选出抗盐植株。
（5）为了获得大量该转基因植株，可将带腋芽的茎段转入适宜培养基中，获得大量 ，然后转入生根培养基中诱导生根，形成再生植株。再生植株需进行 （不定项选择：
| A．无菌处理 |
| B．锻炼 |
| C．去除根部残留的培养基 |
| D．逐步提高湿度处理）后才能移种大田。 |
回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。
(6)给患者移植经异体细胞培养形成的皮肤组织后，发生了 现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。
回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面 时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
(2)随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是 。
(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
(5)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作
进行攻击。
如下图所示，请据图回答下面的问题。
(1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜_______________________________________。此过程，常用________作为诱导剂，该细胞的特点是_________________。
(2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖，鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请设计一种方法(不考虑机械方法)，从培养液中分离出杂交瘤细胞。
方法：____________________________________________。
(3)杂交瘤细胞繁殖进行的是___________分裂，其遗传性状________。
(4)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同？
_____________________________________________________________。
(5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了____________________________________________________________。
2011年12月19日，在“中国（无锡）动物生物反应器产业高峰论坛”上，中国工程院院士李宁介绍：把牛奶变成母乳，这绝对是可能的。而把牛奶变成“人奶”的技术，就称之为“动物生物反应器”。动物生物反应器是以基因工程技术为核心，以动物体为“车间”，低成本大规模生产高附加值重组药物蛋白的新一代生物制药技术。下图是培育表达人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器的技术路线。据图回答下列问题：
（1）基因工程的核心步骤是 。图中基因表达载体的组成，除具有复制原点、人类白细胞介素基因外，还必须具有启动子、 等。启动子是一段有特殊结构的DNA片段，是 识别和结合的部位。
（2）过程①可采用的操作方法是 ，过程③采用的生物技术是 。在②过程的生物技术中，需对供体牛和受体牛进行 处理，为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。
（3）为检测人类白细胞介素基因是否成功表达，可采用 技术。
（4）继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。该系统与乳腺生物反应器相比，具有哪些优点？（答出一点即可）
（5）为使外源基因在后代中长期保持，可将转基因动物体细胞的细胞核转入 中构成重组细胞，然后再运用一定的生物技术手段使其发育成与供体具有相同性状的个体。
在植物组织 培养过程中 ,激素的添加已成为一种常规的实验手段 ,在植物组织培养过程中已研究过的植物激素有 :生长素、细胞分裂素、赤霉素等。下表为某同学为研究激素的使用顺序对实验结果的影响，请回答相关问题：
| 使用顺序 |
实验结果 |
| 先使用NAA, 后使用KT |
有利于细胞分裂，但细胞不分化 |
| 先使用KT, 后使用NAA |
A |
| 同时使用 |
B |
（1）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、 和 的关键性激素。该实验中属于细胞分裂素的是 。
（2）请将表格中空白处A和B补充完整，A为 ，B为 。
若NAA和KT的用量比值适中时，促进 的生长。
（3）用于离体培养的植物器官或组织称为 。若该实验材料为菊花，则应对其进行 （消毒/灭菌）。
（4）接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养环境应注意调节合适的 和 。接种过程中要注意在 旁进行。
粤公网安备 44130202000953号
