人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有 。
（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在 旁进行操作。接种后的培养皿 于37℃的恒温培养箱中培养。
（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_ ___培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的氨使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力____。
某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：
⑴主要步骤：
①制备两种培养基：一种是＿＿＿＿培养基，另一种＿＿＿＿＿的培养基。分别分成两份，依次标上A、A′和B、B′，备用。
②分别向A、B培养基中接种＿＿＿＿＿＿。
③接种后，放在恒温箱中培养3～4天。
④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中。
⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天。
⑵回答问题：
在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有 。
第④⑤两个步骤的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
[生物—选修模块1：生物技术实践]
Ⅰ．纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在 环境采集。
②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H20 1．2g、KH2PO40．9 g、MgSO4·7H2O 0．5g、KCl 0．5g、酵母膏0．5 g、水解酪素0．5g（蒸馏水定容到1000mL）。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是 。
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养。
Ⅱ．回答下列与芳香油提取相关的问题：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，原因是 。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 。
红火蚁原分布于南美洲，现已成为世界性的外来危害物种，2011年华南地区也陆续出现蚁情。
（1）入侵华南某地后，短期内红火蚁种群数量呈 型增长，从种群特征角度考虑，决定其增长的原因是 。
（2）辛硫磷是一种有机磷杀虫剂，为测定其对不同虫态红火蚁的致死剂量，将原药溶于丙酮中配置不同浓度的辛硫磷药剂点于红火蚁胸部，记录24h死亡虫数并计算LC50（杀死50% 防治对象的药剂浓度），结果如下：
| 虫态 |
小工蚁 |
兵蚁 |
有翅雄蚁[ |
有翅雌蚁 |
蚁后 |
| LC50（μg/ml） |
1．04 |
2．06 |
7．38 |
9．39 |
7．81 |
①本实验中辛硫磷药液的浓度范围要根据 的实验结果来确定；每个药剂浓度的处理均设多次重复，目的是 ，从而减少误差；本实验的对照组应设置为 。
②实验中 虫态的红火蚁对辛硫磷最敏感。已知小工蚁、兵蚁、雄蚁分别由不同的幼虫发育而来，若仅控制该虫态红火蚁的数量，_____（能否）持续有效的控制住蚁群的数量。
（3）有机磷农药进入土壤后，可被微生物分解成无毒或低毒的化合物，微生物体内最初的降解酶基因是
由 产生的，从 的环境中易分离到这类微生物。
阅读如下材料，回答下列问题：
资料l：相传，清康熙八年，安徽举子王致和，京考未中，在京城做起了卖豆腐的生意。一天，他发现没卖完的豆腐长了白毛，舍不得丢弃，就将豆腐装入坛内撤盐腌了，再密封起来，秋末开坛意外制成了“闻着臭，吃着香”的腐乳。
资料Ⅱ：19世纪中期，法国的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击．在生产过程中出现了葡萄酒变酸、变味的怪事．经研究，法国科学家巴斯德发现，导致生产失败的根源是发酵物中混入了杂菌．
（1）中国的传统发酵技术源远流长，是人类对微生物的利用，其中制作腐乳的微生物主要是____．制作果酒的微生物是酵母菌，它是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，其反应式为 ．
（2）在腐乳制作过程中，微生物生长的温度控制在 ；加盐腌制，盐可以析出豆腐中的水分，同时，盐能 ．
（3）从资料Ⅱ中看出，____是研究和应用微生物的前提．在无菌技术中，对操作者用酒精擦拭双手属于______，对金属用具、玻璃器皿、培养基等要进行灭菌，其中，培养基只能用____灭菌．
（4）通常在一环境中微生物有多种混合在一起，若要对某种微生物进行纯化，最常用的方法是____．
[生物—选修模块1：生物技术实践]
Ⅰ．纤维素酶的成本能否下降，是能否实现乙醇工业化生产的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养。
①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在 环境采集。
②以下是一种培养基配方：纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4·7H20 1．2g、KH2PO40．9 g、MgSO4·7H2O 0．5g、KCl 0．5g、酵母膏0．5 g、水解酪素0．5g（蒸馏水定容到1000mL）。该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度，其原理是 。
③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入刚果红染液，将筛选获得的菌液稀释后用 方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养。
Ⅱ．回答下列与芳香油提取相关的问题：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液不是纯的玫瑰精油，原因是 。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 。
（每空1分）从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从______________环境采集。
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择________________________的培养基，并在_____________条件下培养。
（3）在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在___________条件下进行。
（4）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是______________，图B效果的接种方法是_____________。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是__________________________，应当怎样操作？__________________________。
【生物—选修1：生物技术实践】纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，下列是关于分离土壤中能够分解纤维素的微生物的相关问题，请回答：
（1）自然界中纤维素含量最高的天然产物是 。某些微生物能分解纤维素，因为他们能产生纤维素酶，纤维素酶至少包括三种组分，即 。
（2）实验室中筛选微生物的原理是 。筛选纤维素分解菌应先将从土壤中获得的微生物，在以纤维素为唯一碳源的 （填“固体”或“液体”）培养基上进行选择培养，选择培养的目的是 。
（3）用刚果红染色法对分离出的微生物进行筛选，刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被纤维素酶分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的 。从培养基的用途上分类，刚果红培养基属于 培养基。
每生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：
| KH2PO4 |
1．4 g |
| Na2HPO4 |
2．1 g |
| MgSO4·7H2O |
0．2 g |
| 葡萄糖 |
1 g |
| 尿素 |
10 g |
| 琼脂 |
15 g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL |
（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，细菌合成的________将尿素分解为________，pH升高，使指示剂变为红色。
（2）培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌， 这种培养基属于________培养基。
（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验中需要振荡培养，原因是______________。
（4）下图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。通常还可以________方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落
（5）关于上图的操作方法和结果，叙述正确的是________。
A．操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰旁进行
C．多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
【生物—选修1：生物技术实践】
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________________。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是________________。
（3）示意图A和B中，______表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的____________的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高________________的利用率。
生物技术的迅速发展，给社会带来了巨大的经济效益，受到社会的广泛重视，请问答下列生物技术方面的问题：
（1）天然植物色素对人体健康没有危害，作为添加剂大大丰富了人们的生活。实验室提取植物色素常用的方法是___________法；植物芳香油主要通过____________ 法获得。
（2）纤维素可用来生产乙醇燃料，有些微生物能合成________________分解纤维素，从土壤中分离此类微生物时需向培养基中加入纤维素粉作为__________，这种培养基属于 ____________________。
（3）苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了______________的发酵作用；喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是______________________________。
（4）微生物培养过程中，获得纯培养物的关键是 ________________________ ，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是________________________。
细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如图：将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在已接种被检菌的固体培养基表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈（图中里面的圈），结果如图所示。
（1）衡量本实验结果的指标是 。
（2）上述图中最有效的是 培养皿中的抗生素。
（3）用上述最有效的抗生素对细菌进行处理，并测定细菌数量变化，如图所示。
①向培养基中加抗生素的时刻为 点。
②细菌种群的进化是定向的，而变异是 ，抗生素对细菌变异的作用是 。
③尽管有抗药性基因存在，但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染，原因在于细菌种群中 。
请回答下列有关生物技术实践的相关问题：
Ⅰ．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_________、_________等方法从油料作物中提取；筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_________，培养基灭菌采用的最适方法是__________法。
（2）测定培养液中微生物数量，可选用________________法；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_______，以确定其应用价值。
Ⅱ．三七是一种名贵中药，其有效成分是三七皂苷，可用萃取法提取。
（1）为了提高提取率，提取前应对三七材料进行预处理，即对其进行______________。采用萃取法提取某有效成分时需要加热，一般不用酒精灯直接加热而用水浴加热，因为______________。
（2）工业化大量而快速生产三七以提取相关成分，可应用________技术，此过程会使用到__________等植物激素，对形成的愈伤组织应当测定其_______的含量。
生物技术给社会带来了巨大的经济效益，请回答下列有关问题:
(1)微生物培养过程中，对培养基进行灭菌的常用方法是______________。鉴别尿素分解菌时应加入________指示剂。
(2)从生物体内提取天然物质，丰富了人们的生活。提取胡萝卜素常用________________法，提取玫瑰精油常用________法，薄荷油是挥发性物质，在实验室中提取薄荷精油常选用________(鲜/干)薄荷叶作原料。其原因是____________________。
(3)植物组织培养过程中，用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做________。 由于离体细胞对营养、环境要求特殊，因此需要配置________培养基，其主要包括:大量元素、微量元素、有机物等。
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