每生物兴趣小组为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：
| KH2PO4 |
1．4 g |
| Na2HPO4 |
2．1 g |
| MgSO4·7H2O |
0．2 g |
| 葡萄糖 |
1 g |
| 尿素 |
10 g |
| 琼脂 |
15 g |
| 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL |
（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂，细菌合成的________将尿素分解为________，pH升高，使指示剂变为红色。
（2）培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌， 这种培养基属于________培养基。
（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验中需要振荡培养，原因是______________。
（4）下图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。通常还可以________方法分离到一个细胞繁殖形成的菌落
（5）关于上图的操作方法和结果，叙述正确的是________。
A．操作时要将接种环放在火焰上灼烧灭菌
B．划线操作须在火焰旁进行
C．多次划线后培养才可以分离到一个细胞繁殖形成的菌落
D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌
原油含有大量致癌的“多环芳烃”，分子结构十分稳定，有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株并投入除污为课题设计了有关实验。有关说法正确的是
| A．用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油（多环芳烃）为唯一碳源 |
| B．培养基配制完成之后需进行消毒处理 |
| C．在选择培养基上形成的菌落，即为能分解多环芳烃的目的菌种 |
| D．筛选出目的菌种后，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数 |
下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是
| A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 |
| B．打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞 |
| C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 |
| D．最后应将平板倒置，放入培养箱中培养 |
【生物—选修1：生物技术实践】
有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________________。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是________________。
（3）示意图A和B中，______表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的____________的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高________________的利用率。
生物技术的迅速发展，给社会带来了巨大的经济效益，受到社会的广泛重视，请问答下列生物技术方面的问题：
（1）天然植物色素对人体健康没有危害，作为添加剂大大丰富了人们的生活。实验室提取植物色素常用的方法是___________法；植物芳香油主要通过____________ 法获得。
（2）纤维素可用来生产乙醇燃料，有些微生物能合成________________分解纤维素，从土壤中分离此类微生物时需向培养基中加入纤维素粉作为__________，这种培养基属于 ____________________。
（3）苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了______________的发酵作用；喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是______________________________。
（4）微生物培养过程中，获得纯培养物的关键是 ________________________，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是________________________。
细菌对各种抗生素的药敏程度实验方法如图：将含有一定浓度不同抗生素的滤纸片放置在已接种被检菌的固体培养基表面，抗生素向周围扩散，如果抑制生长，则在滤纸片周围出现抑菌圈（图中里面的圈），结果如图所示。
（1）衡量本实验结果的指标是 。
（2）上述图中最有效的是 培养皿中的抗生素。
（3）用上述最有效的抗生素对细菌进行处理，并测定细菌数量变化，如图所示。
①向培养基中加抗生素的时刻为 点。
②细菌种群的进化是定向的，而变异是 ，抗生素对细菌变异的作用是 。
③尽管有抗药性基因存在，但使用抗生素仍然能治疗由细菌引起的感染，原因在于细菌种群中 。
生物技术给社会带来了巨大的经济效益，请回答下列有关问题:
(1)微生物培养过程中，对培养基进行灭菌的常用方法是______________。鉴别尿素分解菌时应加入________指示剂。
(2)从生物体内提取天然物质，丰富了人们的生活。提取胡萝卜素常用________________法，提取玫瑰精油常用________法，薄荷油是挥发性物质，在实验室中提取薄荷精油常选用________(鲜/干)薄荷叶作原料。其原因是____________________。
(3)植物组织培养过程中，用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做________。 由于离体细胞对营养、环境要求特殊，因此需要配置________培养基，其主要包括:大量元素、微量元素、有机物等。
下列有关实验的描述中，正确的有（）
①．稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目
②．在高倍显微镜观察线粒体实验中用健那绿染色后细胞死亡
③．橙色的重铬酸钾溶液在碱性条件下可与酒精发生反应，变成灰绿色
④．观察洋葱根尖分生组织细胞有丝分裂的实验中可用碱性染料吡罗红染色
⑤．用果胶酶处理苹果泥时,大幅度提高反应温度能使果胶酶更充分地催化反应
⑥．用萃取方法提取胡萝卜素的过程使用水浴加热，其目的是防止有机溶剂燃烧、爆炸
| A．2项 | B．3项 |
| C．4项 | D．5项 |
关于生物技术实践中的有关检验，不正确的是（）
| A．在果酒制作实验结束时要检验是否有酒精产生，正确的操作步骤是先在试管中加入适量的发酵液，然后再加入硫酸和重铬酸钾的混合液 |
| B．在微生物培养中，检验培养基是否被污染的方法是用一组不接种或接种无菌水的培养基与接种培养物的培养基一起培养 |
| C．检验以尿素为唯一氮源的培养是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则说明分离成功 |
| D．检验胡萝卜素纯度的方法是纸层析法，原理是不同的色素分子在层析液中的溶解度不同，故随层析液在滤纸上扩散的速度不同，若样品中有杂质，则会出现不同的色素点（带） |
请分析回答下列有关生物技术专题方面的问题：
（1）表是一种培养基配方，请回答下列问题：
①该培养基高压蒸汽灭菌时要在 g/cm2压力下灭菌30分钟，为了防止尿素加热分解，需要单独用 过滤去除细菌。
②该培养基属于什么培养基（多选）___________。
A．液体
B．固体
C．鉴定
D．选择
E．天然
③如果要对培养的菌落进行纯化，一般采用 方法，操作的第一步及每次画线之前都要对接种环进行 处理，目的是对接种环进行_________。
④制备培养基的操作步骤是__________。（用下列字母排序）
a．倒平板
b．计算
c．溶化
d．称量
e．灭菌
A．a→b→c→d→eB．e→b→d→c→a
C．b→d→c→a→eD．b→d→c→e→a
（2）如图是植物组织培养的示意简图，请回答下列问题：
①B表示的是____________，它是由高度液泡化的、呈无定型状态的薄壁细胞组成。
②A能被培养成为C的根本原因是________；
③植物激素中___________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
下列有关实验的叙述，正确的是
| A．使用高倍显微镜观察细胞装片时，放大倍数越大，视野越明亮 |
| B．用萃取法提取胡萝卜素时，应该避免明火加热，采用水浴加热 |
| C．用健那绿染液对线粒体进行染色时，需先将细胞用盐酸进行解离 |
| D．平板划线操作中，随着划线次数增加接种环上的菌种会越来越多 |
【生物—选修1：生物技术实践】（15 分）请回答下列与发酵技术和植物组织培养技术有关问题：
（1）腐乳一直受人们的喜爱，制作过程中发挥作用的微生物主要是毛霉，其代谢类型是________；吃腐乳时，会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，其实质是微生物的__________，对人体无害；各地腐乳风味迥异，在原料和菌种相同时，可通过_____制作出不同风味的腐乳。
（2）俗话说“心急吃不了热豆腐”，泡菜也不能急着吃，从防癌的角度考虑，应等到_______时食用。
（3）人们常用化学药剂消毒法进行消毒，如碘氟擦拭伤口、氯气消毒水源；日常生活中也常用到_____，如有人每周都会将碗筷放在开水中烧泡一段时间； 实验室里使用接种室之前一般都要进行一项物理性的操作是_______，以杀死物体表面或空气中的微生物。
（4）对植物花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。为了选择单核期的花药，通常采用的方法是_____，若某些植物的花粉细胞核不易着色，则需采用的方法是_________。
某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量________。
（2）细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_____。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长________。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更________。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用________消化处理。
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入________，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的________或________合成水平的差异，确定Y的药效。
已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。
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