下图是微生物接种示意图，操作顺序为1→2→3→4→5，以下叙述正确的是
| A．图示方法为稀释涂布平板法 |
| B．划线操作须在酒精灯火焰旁进行 |
| C．由单个细胞形成的菌落一定出现在5区域 |
| D．只需在l区域划线前和5区域划线后对接种环灭菌 |
耐冷菌是生活在低温环境下的一类微生物，在0～5 ℃可生长繁殖，最高生长温度一般在30 ℃左右。关于耐冷菌的下列选项中错误的是( )
| A．耐冷菌参与代谢的酶在低温下仍具有较高的催化活性 |
| B．不同取样地点相比较，北方寒冷地区水土中较易分离出耐冷菌 |
| C．探究耐冷菌生活的最适温度，自变量应为温度，无关变量应相同且适宜 |
| D．分离纯化耐冷菌的过程中，使用过的培养基及培养物必须经过消毒处理后才能丢弃 |
某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌（可利用空气中Ｎ２合成含氮有机物）和酵母菌混合在一起，得到混合菌。请你完成得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的分离实验
步骤，并回答有关问题：
（１）主要步骤：
①制备两种培养基：一种是培养基，另一种是加的培养基。分别分成
两份，依次标上Ａ，Ａ′和Ｂ，Ｂ′，备用。
②分别向Ａ、Ｂ培养基中接种。
③接种后，放在恒温箱中培养３～４天。
④分别从Ａ、Ｂ培养基生长良好的菌落中挑取菌种，按照Ａ→Ａ′，Ｂ→Ｂ′的方式进行接种。
⑤接种后，把Ａ′、Ｂ′培养基放入恒温箱中培养３～４天。
（２）回答问题：
在步骤①中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有：对培养基进行
；将在酒精灯火焰上灭菌；接种过程在附近进行。
第④⑤两个步骤的目的是获得 。
在生物技术实践过程中，往往需要注意某些实验步骤的操作，请将下列实验中的注意事项填写完整：
⑴在腐乳的制作时，用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用消毒；在血红蛋白的提取和分离中，若红细胞的洗涤次数过少，将无法除去。
⑵在提取植物细胞的DNA时，需要先用洗涤剂溶解。在花药离体培养中剥离花药时，要彻底去除，因为与其相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。
⑶在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”课题中，往往需要稀释土壤溶液，为了避免杂菌污染，此过程每一步都要在旁操作。在固定化酵母细胞中加热溶解海藻酸钠时，最好采用的方法。胡萝卜素提取的萃取过程应采用加热，因为有机溶剂都是易燃物。
⑷为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液和蒸馏水等在使用前必须进行。
近年来，茶饮料作为饮料新品种，以其快捷、方便、风味独特而迅速发展，请回答：
(1)红茶菌液是一种传统的活菌饮料，制作流程是制作红茶糖液—接种红茶菌种—发酵红茶菌液。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共同体，可以用法分离纯化得到不同的菌种。在接种活菌之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，煮沸和冷却的目的分别是为了、。
（2）很多商家在茶饮料中添加人工合成的色素、香精等添加剂，可能危害人体健康，人们更喜欢从植物中提取的天然成分，常用法提取胡萝卜素，法提取玫瑰精油。提取的胡萝卜素可通过法进一步鉴定。
(3)从茶叶中分离提取某种氧化酶，可以用法，其原理是利用蛋白质分子的大小、形状和的不同产生不同的迁移速率来进行分离。
莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。据图回答问题。
(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为________，目的是_________ _______________________________________________________________。
(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行________，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和________法，从图中看本实验采用的是________(填“前者”或“后者”)。一段时间后，培养基出现无透明带菌落和有透明带菌落两种菌落，我们筛选的目的菌是________菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源______________________。
(3)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自C瓶菌种还是培养基，要如何设置对照组？____________________________________________。
(4)此实验中，某同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。该同学的实验结果产生的原因可能是____________________________ ______________。
胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：
(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用________________或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是________________________________________________________。
(2)培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供________________和________________。
(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和________________以防止胡萝卜素的分解；萃取过程中宜采用________________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是________________。
(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为__________________________________________________。
多环芳烃是具有致癌、致畸、致突变作用的全球性污染物，是煤、石油、有机高分子化合物等有机物不完全燃烧时产生的挥发性碳氢化合物，包括萘、蒽、菲、芘等150余种化合物。某研究小组从一污水处理厂的污泥中筛选到一株可降解萘、蒽的细菌，命名为BDP01。
(1)该研究小组所用的培养基应以萘或蒽作为唯一碳源，其目的是________，从功能看该培养基类型属于________。
(2)接种时所用的接种环通过________灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从________开始划线，该分离纯化方法称________法。
(3)下面的图1和图2为该研究小组进行的其中两个实验的实验结果图，菌株的生长量以分光光度计于600 nm处测定的光吸收值(OD600)表示。
①测定菌株生长量时用液体培养基，并需振荡培养。这样一方面可使菌株与培养液充分接触，提高________的利用率；另一方面能________。
②由图1可见，菌株生长量较高的温度范围是________。图2结果表明，BDP01对pH的适应范围较小，在酸性条件下的生长量要________于碱性条件下的。
③结合图2推测，进行图1相关实验时培养基的pH最可能为________(用图2中相关数值表示)。
下列叙述正确的是
| A．果醋制作时需要经过先通气发酵后密封发酵两个主要阶段 |
| B．对细菌分离和计数时，划线法、稀释涂布平板法都可以 |
| C．凝胶色谱法分离血红蛋白时，首先收集到的物质的分子量较血红蛋白小 |
| D．稀释涂布平板法测定土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值小 |
在微生物的实验室培养中，下列哪项操作不需要在无菌条件下进行
| A．配制培养基 | B．倒平板 | C．接种 | D．菌液稀释 |
有关传统发酵技术的应用，回答下列问题
（1）制作红葡萄酒、葡萄醋、泡菜和腐乳所利用的主要微生物依次分别是酵母菌、____________、乳酸菌和。
（2）制作红葡萄酒、葡萄醋、泡菜和腐乳所提供的最适温度依次分别是18～25℃、、28～30℃和15～18℃。
（3）红葡萄酒呈红色是因为红葡萄皮中的溶解于发酵液中所致。
（4）腌制腐乳的卤汤中的酒可选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在左右，制作腐乳的豆腐块的含水量约为。
从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_____________环境采集。
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_________________的培养基，并在__________条件下培养。
（3）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。
获得图A效果的接种方法是_____________________，获得图B效果的接种方法是_______________________。
（4）配制培养基时，各种成分在溶化后分装前必须进行____________，接种前要进行_________，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在__________条件下进行。
（5）培养微生物时，为了防止水珠掉落在培养基造成污染，应将培养基。
利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。
(1)实验步骤：
①配制以为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是。
②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上出现。
③将接种针用法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种入（固体、半固体、液体）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。
(2)上述所有倒平板和接种操作，都应在超净台上附近进行。
(3)上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于培养基，如果在培养基中加入碘，则该含有碘的培养基从功能上属于培养基。
下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是( )
| A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 |
| B．取10 、10 、10倍的土壤稀释液和无菌水各0．1ml，分别涂布于各组平板上 |
| C．将实验组和对照组平板倒置，37°C恒温培养24-48小时 |
| D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 |
粤公网安备 44130202000953号