生物选修1：生物技术实践生物组织中存在多种有机物，不同的有机物其提取与鉴定方法不尽相同。根据所学知识，请回答下列问题。
(1)采用蒸馏法提取玫瑰油时，向初步提取的乳化液中加入________，作用是_________________。
(2)采用压榨法提取橘皮精油时，提取之前需用______________浸泡，以提高出油率。为了使橘皮油易与水分离，还要分别加入相当于橘皮质量0.25%的__________和5%的___________，并调节pH至7～8。
(3)采用萃取法从胡萝卜中提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、萃取、____、____。干燥时，要注意控制_______，否则会引起胡萝卜素的分解；萃取的效率主要取决于萃取剂的_______，同时还受原料颗粒的大小、含水量等条件的影响；在对提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定时应与_______作对照。
胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：
（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是 。
（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供 。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和 以防止胡萝卜素的分解；萃取液浓缩前需进行 ，其目的是除去萃取液中的不溶物。
（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为 。
（5）酵母菌R能分泌A酶和B酶两种酶，下图是某课题组对A酶和B酶的实验结果，请分析回答：
①分析图中的实验结果可知，本实验研究的课题是 。
②图中结果显示，在40℃至60℃范围内，热稳定性较好的酶是 。高温条件下，酶容易失活，其原因是 。
③制备A酶和B酶的流程如下图所示：
图中方法Ⅰ是 ，方法Ⅱ是透析法；分别用凝胶色谱法纯化酶的过程中， 的蛋白质会较快从层析柱中洗脱出来。
请回答下列有关生物技术方面的问题。
（1）果酒是人们喜爱的健康饮品。果酒是酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵而产生的，其反应式为 ；酒精的产生与否可用 来进行检测。
（2）牛肉膏蛋白胨培养基是微生物培养中常用的培养基，其中的蛋白胨为微生物的生长提供了 等营养物质，制备的培养基一般用 方法进行灭菌。人类饮用水的安全与人体健康关系密切，欲将所取的金沙江水样品进行大肠杆菌的分离与计数，可用 法来完成。
（3）生物兴趣小组利用植物组培技术，用离体的菊花幼茎经 过程，培育出了大量的菊花幼苗。其中，在对外植体进行消毒时，先用70%的酒精进行处理，再用 进行消毒，这样既考虑了药剂的消毒效果，又考虑了 。
（4）胡萝卜素是重要的药物和食品添加剂，在胡萝卜素的萃取中，所用的有机萃取溶剂应该具有较高的 ，以便胡萝卜素能充分溶解其中。对萃取的胡萝卜素样品和标准样品进行点样层析时，如果出现 现象，则说明胡萝卜素提取成功。
【生物----选修1：生物技术实践】常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答下列问题:
（1）制备酵母菌培养基要进行倒平板操作，待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是 。
（2）取从自然界中采集的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后按图甲所示过程进行酵母菌的纯化培养。
图乙是经过图甲过程A纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序依次是 (用编号表示)。研究者在图甲过程C的操作培养过程中，得到了一个经培养后菌落分布如图丙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是 。
（3）将培养基上的酵母菌菌株转接到 的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。从存活的酵母菌中提取DNA，经大量扩增获得目的基因。
（4）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因。将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。
（5）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以 和 为碳源的培养基中进行发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能 ，即所需菌株培育成功。
新鲜柑橘的销售受市场行情影响较大，为满足不同人的需求，可以将柑橘加工成果汁、果酒、果醋等。结合下图回答相关问题：
（1）通过过程③制作果酒，市场接种的菌种是酵母菌，其最适合繁殖的温度为 ℃左右。在过程③中不用灭菌一般也不会受到杂菌的污染，原因是（写出一点即可） 。
（2）果酒制作是否成功，需发酵后用______________来鉴定，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现__________色。
（3）选用新鲜而不是干枯的柑橘果皮作为提取香精油的材料，理由是新鲜柑橘果皮 。过程⑤最好采用的方法是 。
（4）现获得一株无子突变柑橘，研究人员要在较短时间内获得大量该突变植株，最好采用 的方法，该过程需要对外植体使用 进行消毒处理。
选考[生物——生物技术实践](15分)回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：
（1）苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 来检验。
（2）严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物， 通常所指的发酵条件不包括 。
| A．温度控制 | B．溶氧控制 | C．pH控制 | D．酶的控制 |
（3）苹果酒在 的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是 .
（4）腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是 。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于 。
（5）在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加 。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是 。
[生物---选修1：生物技术实践]近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：
（1）在果醋制作时，运用醋酸菌在供应______和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式：______。
（2）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时，应注意控制________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在________%左右。
（3）制作泡菜的原理是____________________________________________。
（4）蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐。在____________________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生________________反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成__________色染料。
[生物——选修1：生物技术实践]
请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题:
(1)DNA粗提取的实验原理是:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在 mol/L的NaCl溶液中的最低;鉴定DNA所用的试剂是 ,沸水浴加热呈 色;实验中使用酒精的目的是 ;实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA,第二次目的是 。
(2)PCR技术的中文全称是 ,在操作过程中需要添加引物,它的化学本质是 。反应过程中控制不同温度的意义是不同的: 90℃以上时 ,双链DNA解聚为单链;50℃左右时 ,引物与两条单链DNA结合; 72℃左右时延伸,Taq DNA聚合酶有最大活性,使DNA新链沿着 方向延伸。
(3)血红蛋白的提取和分离实验中,分离纯化常用的方法有凝胶色谱法和电泳法,前者的原理是 ,后者的原理是 ,在血红蛋白的整个提取过程中,不断用磷酸缓冲液处理的目的是 。
【生物——选修1：生物技术实践】“中国柑橘之乡”常德石门县由于独特的土壤气候环境，具有得天独厚的优质果品生产先天的资源优势，被国际果业界认定为“蜜橘绝佳产地”。但由于缺乏农产品的深加工企业，近几年柑橘滞销现象严重。
（1）当地政府想引入一个大型的果酒加工厂，需要的发酵菌种是 。分离纯化上述菌种所用的培养基属于 （填“液体”或“固体”）培养基。对于频繁使用的菌种，可以将菌种接种到试管的 培养基上临时保藏。
（2）橘皮可用作提取胡萝卜素和橘皮精油的原料。提取胡萝卜素常采用 法，需安装冷凝回流装置，其目的是 ；提取橘皮精油时，为避免 时有效成分水解，应使用 （填“水中蒸馏”或“水上蒸馏”或“水气蒸馏”）法，为防止产生原料焦糊的问题，常采用 法。
（3）为了保持某橘子品种的品质，可用组织培养技术繁殖试管苗。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。
下图是花药培养产生花粉植株的两种途径，回答下列相关问题：
(1)通过花药培养产生花粉植株，该过程依据的生物学原理是_____________，
图示两种产生花粉植株的途径并没有绝对的界限，主要取决于培养基中__________。
(2)选材时，从花粉发育来看，一般选择处于________期的花粉培育成功率较高。确定花粉发育时期最常用的方法是_____________________。
(3)材料消毒过程中用到的试剂有________、0.1%的氯化汞溶液、无菌水。
(4)消毒后的花蕾，要在________条件下接种到培养基上，培养过程中不需要光照，同时要控制好温度。
(5)在花药培养中，常常会出现________的变化，因此需要对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选。
(6)在配制用于植物组织培养的MS培养基时，往往需要加入适量的蔗糖，理由是___
[生物一选修1：生物技术实践1柑橘浑身是宝，橘肉中富含Vc，橘皮可用于提取芒香油，请回答下列问题。
(1)提取橘皮精油常采用____法，原因是 。
(2)为了提高出油率，需要将橘皮用____浸泡，作用是 。
(3)橘皮经处理可得到乳液状，橘皮精油分布于液体的上层原因是 。可用 将精油分离。分离得到的精油常加入 ，其作用是 。
(10分)生物技术与我们的生活密切相关，如微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。请回答下列问题:
(1)果酒的制作离不开酵母菌。酵母菌是一类 (呼吸类型)微生物。在缺氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸的反应式为 。
(2)温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。酒精发酵时一般将温度控制在 ℃，
在发酵过程中，随着酒精度数的提高，葡萄酒呈现深红色的原因是 。在发酵获得葡萄汁的过程中为了提高出汁率，可以使用果胶酶，它可以将果胶分解为 。
(3)酵母菌广泛分布在自然界中，现要将其从土壤中分离出来应接种到特定培养基上，
这种培养基叫 培养基，该实验中使用的试管、接种环和 可放入干热灭菌箱中灭菌，培养过程中需要对酵母菌进行计数：取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、 180、 220。则样品中微生物的数量为 个/mL。该统计结果 （低于/高于)实际值，原因是 。
(8分)山楂酒具有活血、补气、健脾等功效，对恢复体力、增加精力、促进食欲有较显著的功效。以下为山楂酒制作的有关过程。分析回答下列问题：
| 主要原料 |
山楂 |
| 设备 |
榨汁机、发酵桶、地下室、大锅等 |
| 制作过程 |
山楂经充分水洗，用榨汁机榨汁。将山楂汁倒入发酵桶中，经7～10 d的发酵，即成果酒。将经过发酵的果酒滤出，倒入发酵容器内，存在地下室里，进行30 d的再发酵。并继续放置在阴凉的地下室进行陈酿，陈酿期间，要坚持倒桶(换桶)，并保持酒桶常满，即得原汁山楂酒 |
(1)请写出山楂酒制作的原理(用反应式表示)：_________________________。
(2)与山楂酒发酵有关的微生物主要是________，在山楂酒制作中菌种的主要来源是______________。
(3)发酵的温度应该在________℃，在发酵过程中要先通气后密封，先通气的原因是______________。
(4)检验是否产生酒精可在________条件下，用________试剂检验。
(5)若要进一步制作果醋，应在发酵液中加入________菌种。
(15分)金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题。
（1）按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于_____生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行_____呼吸。
（2）7.5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括__________，用7．5％NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是____________________。
（3）操作中在血平板上的接种方法是__________，接种操作前后需要对接种工具进行_________灭菌。
（4）在制备血平板时需将pH调节至__________ (“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基__________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于__________培养基。
（5）经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现_____的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是_____________。
请分析回答下列有关生物技术实践的问题：
（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板时，需要等待平板冷却 后，将平板倒过来放置。微生物接种的方法，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,后者是将菌液进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。菌落是在固体培养基上由 细胞繁殖而来的形态可见的子细胞群体。
（2）对月季进行组织培养时，适宜花药培养的时期是_______期，为确定花粉是否处于该时期，镜检时最常用的染色方法是_________。
（3）测定亚硝酸盐含量的原理是，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与 发生重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。
（4）用萃取法提取胡萝卜素的实验中，要将胡萝卜进行粉碎和干燥的目的是 ；得到的萃取液需要用 方法进行浓缩。
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