利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因在受体细胞中完成了表达的是 （ ）
| A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 |
| B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA |
| C．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白 |
| D．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 |
如图是应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品的一些方法。请据图回答下列问题：
（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，获取目的基因常用的方法是_____________，①过程需要的工具酶有_____________和_____________，②过程常用的方法是_____________。
（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_____________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用____________和胚胎移植技术，培育出多头相同的转基因犊牛。为了使胚胎移植能成功，需要对代孕母牛进行___________处理，使之与供体的生理状况保持相同。
（3）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是_____________细胞，Ⅲ代表的细胞具有_____________的特点。
（4）在抗虫棉培育过程中，受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是_____________⑤过程采用的技术是_____________。若要检测转基因抗虫棉细胞的染色体上是否插入了目的基因，可采用_____________技术。
应用现代生物技术可以大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体，并可用于临床治疗，如图表示制备该抗体的设想，请据图回答下列问题：
（1）转甲型H1N1病毒抗体基因牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N1病毒抗体，在基因表达中，甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有________，它是__________识别和结合的位点。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用________技术，培养出多头相同的转基因牛。
（2）prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，Ⅰ最可能是________细胞，Ⅱ代表的细胞具有_____________的特点。
（3）制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术，与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用________对细胞进行处理，作用是除去________。
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，请据图回答有关问题：
（1）“试管牛”技术的操作流程是___________（填字母）。
（2）与一般的育种方式相比较，胚胎移植的优势是 。
（3）图中数字标号③所示结构将来发育为 。
（4）受体母牛必须和供体牛属于同一物种。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______。
（5）“转基因牛“D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是 。
（6）过程h常用的方法是___________。
下列关于现代生物技术的叙述,正确的是
| A．基因工程中常用DNA探针检测目的基因的表达 |
| B．动物体细胞培养所依据的原理是细胞的全能性 |
| C．愈伤组织脱分化和再分化需要用一定比例的植物激素调控 |
| D．生态农业能够提高物种丰富度和能量传递效率 |
面对转基因技术的利弊，正确的做法是 （ ）
| A．趋利避害，不能因噎废食 |
| B．不加区分，全盘接受 |
| C．应停止有关的实验 |
| D．坚决抵制转基因生物 |
抗草胺磷（一种除草剂）转基因大豆的培育过程如图所示。
（1）用________________处理，获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”、含有抗四环素基因的“质粒”。其中质粒上“抗四环素基因”的作用是___________________。
（2）图中①应为____________________________________________________________。
（3）部分农杆菌不能在培养基（含四环素）上生长的原因是___________________________。
（4）在A→D过程中，A→B过程在恒温箱中________（填“避光”或“光照”）培养，注意观察、记录______________________________________________________________的生长情况。
（5）转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，其高效表达的观察指标是_____。
（6）从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用________方法获得目的基因，通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质。下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是________。（多选）
| A．能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一 |
| B．一种运载体只能运载一种目的基因 |
| C．使用的运载体有质粒、λ噬菌体衍生物和动植物病毒等 |
| D．基因表达载体的构建是一样的，不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异 |
某研究小组欲将已知抗盐基因导人原生质体培育抗盐菊科植物。请回答：
（1）为获得大量抗盐基因，可通过 技术进行扩增，也可将其连接到 上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体 。酶混合液需通过 灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在 中进行。
（3）可通过 方法，直接将抗盐基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出 ，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗盐基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行 ，验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。通过将扩大繁殖的再生植株转接到含有 的培养基，根据生长状况初步筛选出抗盐植株。
（5）为了获得大量该转基因植株，可将带腋芽的茎段转入适宜培养基中，获得大量 ，然后转入生根培养基中诱导生根，形成再生植株。再生植株需进行 （不定项选择：
| A．无菌处理 |
| B．锻炼 |
| C．去除根部残留的培养基 |
| D．逐步提高湿度处理）后才能移种大田。 |
下图表示应用现代生物技术制备H7N9病毒单克隆抗体的流程。回答下列问题：
（1）①过程表示______________；②过程用到的工具酶是________________。
（2）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有 ，以利于目的基因的表达。③过程常用的方法是 。
（3）从分子水平上鉴定目的基因是否转录可采用_____________技术。
（4）细胞Ⅱ的特点是 。
（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的________________作为疫苗。
（6）传统农业中，植物秸秆往往是通过焚烧以便使其中的无机盐还田，该做法的最大缺点是会造成环境污染；而现代农业中，在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这主要体现了生态工程的________________原理。
下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。
资料1 巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，同时AOX1基因也会因受到诱导而表达。[5ˊAOX1和3ˊAOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。
资料2 巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。
（1）如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，需要用到_____ ___处理。
（2）获取HBsAg基因时，可利用 、 方法获取。
（3）构建的重组质粒中有5ˊAOX1、 3ˊAOX1(TT)和HBsAg基因外，还应有 。
（4）步骤1中的方法是 ，此时的大肠杆菌处于 状态。
（5）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用__________________方法进行检测。
（6）与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行____ ____并分泌到细胞外，便于提取。
利用基因工程培育抗病香蕉的流程如下：
回答下列问题：
(1)获得抗病基因后，常利用 技术进行扩增，利用该技术扩增的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成___ _。
(2)使用农杆菌将抗病基因导入香蕉细胞中，农杆菌中的Ti质粒上的________________可将抗病基因转移至香蕉细胞 上。
(3)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用添加了卡那霉素的培养基筛选已导人抗病基因的香蕉细胞，则基因表达载体A的构建时应含有__________，以作为标记基因。
(4)抗病基因进入香蕉细胞内，并在香蕉细胞内维持稳定和表达，该过程称为 。
(5)欲检测抗病基因是否表达出蛋白质，可从转基因抗病香蕉中提取蛋白质，用 ___ 予以检测。
[生物——选修3：现代生物科技专题]人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因奶牛的乳汁中获得。下图表示利用奶牛乳汁生产人组织纤溶酶原激活物的培育过程：
（1）htPA基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比人染色体上的htPA基因短，原因是该cDNA没有 。构建表达载体时，必须将htPA基因cDNA与牛乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起。
（2）通过①形成图中③的过程中，通常取培养 代以内的细胞，原因是 。
（3）图中“未受精的卵”是指 的卵母细胞，而不能用普通的体细胞作为受体细胞，原因是“未受精的卵” 。
（4）⑦与⑥的遗传性状不一样的原因是 。
（5）图示过程中涉及的科学技术有转基因技术、 、 、胚胎移植等。
在1990年医生对一位因缺乏腺苷脱氨酶基因而患先天性体液免疫缺陷病的美国女孩进行治疗。采用的方法是首先将患者的白细胞取出作体外培养，然后用某种病毒将正常腺苷脱氨酶基因转入人工培养的白细胞中，再将这些转基因白细胞回输到患者的体内，经过多次治疗，患者的免疫功能趋于正常。
（1）该病治疗运用了基因工程技术，在这个实例中运载体是_______，目的基因是________，目的基因的受体细胞是__________。
（2）将转基因白细胞多次回输到患者体内后，免疫能力趋于正常是由于产生了腺苷脱氨酶，产生这种物质的两个基本步骤是________和_________。
（3）人的腺苷脱氨酶基因与胰岛素基因相比，其主要差别是___________。
（4）写出基因工程操作的基本程序:_________→__________→__________→____________。
河北农科院的科学家通过基因工程培育抗虫棉时，需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因，“放入”棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用，请回答下列有关问题：
（1）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是 ，此工具主要存在于 中，其特点是 。
（2）苏云金芽孢杆菌一个DNA分子上有许多基因，获得抗虫基因常采用的方法是“ ”。具体做法是：用限制性核酸内切酶将苏云金芽孢杆菌的DNA切成许多片段，然后将这些片段 ，再通过运载体转入不同的受体细胞，让它们在各个受体细胞中大量复制，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把 分离出来。
（3）进行基因工程操作一般要经过的四个步骤依次是 、 、 。
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA.病毒，该病毒表面的A.蛋白为主要抗原，且疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
(1)过程①代表的是_________。过程②代表的是基因工程操作步骤中的____________。基因工程的核心步骤是______(填序号)。
(2)过程⑦采用的实验技术是__________，获得的X是_________。
(3)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_______所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。
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