克隆羊“多利”的问世，很快在全世界引发了一场大讨论，其中关于“治疗性克隆”的问题也成为人们关注的焦点。下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
(1)过程A表示 ，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由① 细胞提供细胞质，进行人工重组。
(2)经过程B得到的结构中，④是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持 状态。
(3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞核 。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是 的结果。
(4)对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？
。
【生物——选修3 现代生物科技专题】“基因靶向”技术是指利用细胞脱氧核糖核酸（DNA）可与外源性 DNA 同源序列发生同源重组的性质，定向改造生物某一基因的技术。如果外源基因随机插入，会因位置效应引起紊乱，而“基因靶向”技术很好地解决了这一问题。请回答下列问题：
（1）“基因靶向”技术中构建基因表达载体需要用到 酶和DNA连接酶。一个基因表达载体的构成，除了目的基因，还需有启动子、终止子、 等部分。
（2）ES 细胞来自第3.5天小鼠囊胚中的 。 在胚胎移植前，通过 技术可获得较多的胚胎。在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行 的处理，使供、受体的生理状态相同，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
（3）取患者的淋巴细胞或者脐带血细胞作为 ，插入正常的外源基因后，再回输体内，以替代、修复或纠正有缺陷的基因，这种方法称为 ；
基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（
细胞）对
基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到期时， 可从其内细胞团分离出细胞。
（3）步骤③中，需要构建含有基因的表达载体。可以根据
基因的设计引物，利用
技术扩增
基因片段。用
限制酶分别在片段两侧进行酶切获得
基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有酶的酶切位点。
（4）为检测基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的，用抗
蛋白的抗体进行杂交实验。
长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：
（1）在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有_________（答两种技术）。
（2）和受精有关的过程有：①释放第二极体；②顶体反应；③穿越透明带；④雌、雄原核的形成；⑤核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为___________（填序号）。
（3）从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有____________。
（4）试管牛的性别为_________，克隆羊多利的性状和__________（黑面绵羊＼白面绵羊）最接近。
（5）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射__________；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的________冲洗出来。
（6）从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有________（填字母）。
（7）动物的早期胚胎移植到同种且________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜__________。
I、人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图1所示，请据图作答：
（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死雌鼠的 中获取。
（2）图中的高血压相关基因作为 ，质粒作为 ，二者需用 切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有 有关。
（3）子代大鼠如果 和 ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
II、上图2是某科学家利用小鼠纤维母细胞等获得单克隆抗体的实验研究过程。请据图回答：
（1）①过程类似于植物组织培养技术中的 过程。②过程的实质是_ ______。
（2）③过程中需用到的生物诱导方法是 。
（3）④处需要筛选，其目的是 。
犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)主要感染幼犬,传染性极强,死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而杀灭犬体内病毒。请回答下列问题:
(1)在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中,所用到的细胞工程技术有 和 。
(2)将经免疫处理后的犬的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选,一次是通过 培养基筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过 检测筛选出能分泌CPV McAb的杂交瘤细胞。
(3)诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合最常用的方法是 ;对杂交细胞进行培养时,需要 的环境,及营养、温度、pH和 环境适宜的条件。
(4)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV,其原因是该抗体具有 的特点。
【生物—选修3：现代生物科技专题】请回答下列有关胚胎工程和基因工程方面问题：
（1）目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型。在哺乳动物的核移植实验中，一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行 处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至 ，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。
（3）利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是 。
（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、 、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的 （填“受精卵”或“乳腺细胞”），导入方法是 。
（每个空格1分，共10分）人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）若人的血清白蛋白基因的序列是未知的，可以从 中获得；
（2）重组细胞①和②中 （①／②）实现了基因的重组，实验过程b利用的技术是 ；
（3）若将早期胚胎分成若干个，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型 （相同／不同），此项技术称为 ；
（4）在进行胚胎移植时，需对受体母牛进行 处理；
（5）若能使人的血清白蛋白基因在膀胱内壁细胞也得以表达，则相对于乳腺细胞来说，其优点是 ；
（6）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，需用酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中往往需用胚胎成纤维细胞制备 ，目的是 。在培养过程中，往往还要加入抗生素，以防止 。
胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 
(1）对良种母牛卵母细胞的采集，可以借助工具直接从 的卵巢中吸取，此时是未成熟的卵子，需体外培养至 期才具有受精能力。
（2）良种公牛的精子可用 （只写一种，本空1分） 方法收集，然后在体外进行获能处理，即可放在一定浓度的 培养后经化学药物诱导才能进行受精作用。
（3）在体外培养受精卵时，除给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供 气体以维持________________。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是_______________；获得转基因母牛后，如果有______________________产生即说明目的基因已经表达。
（5）在上述试管牛培育过程中，所用到的主要胚胎工程的技术有_______________、早期胚胎培养和_______________。
【生物——选修模块3：现代生物科技】中国器官捐献与移植委员会要求，2015年1月1日起，我国全面停止使用死囚器官，公民自愿捐献成为器官移植供体的唯一来源。人体移植器官短缺是一个世界性难题。科学家想通过生物工程技寻求可替代的移植器官。回答下列相关问题：
（1）科学家正试图利用基因工程方法对小型猪的器官进行改造，采用的方法是将器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制 的表达，再通过无性繁殖，培育出无免疫排斥反应的移植器官。此过程可能用到的生物工程技术有： （写出至少三种）。
（2）胚胎移植前，首先要对受体母猪进行 处理，以保证其生殖器官的生理环境适合胚胎发育。将发育至 时期的胚胎，植入受体母猪体内，还需要对受体母猪进行 检查，来确定移植是否成功。
（3）一部分科学家提出，可以通过对患者进行体细胞核移植，培养成胚胎。再从 中分离出胚胎干细胞，利用 将胚胎干细胞定向诱导成特定器官，进行移植。这一过程属于 克隆，中国政府不反对此种克隆技术。
科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为 ，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为 .
（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为 ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过 后进行早期胚胎培养获得。
（3）图中重组囊胚通过 技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用 方法保存。
（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的 分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向 后用于疾病的细胞治疗。
根据基因工程和胚胎工程的相关知识回答下列问题：
（1）通过试管动物技术培养发育为早期胚胎后，再经 产生多个基因型相同的后代。
（2）胚胎移植时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行 处理；此外，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
（3）胚胎移植的优势在于供体的职责变为 ，繁重而漫长的妊娠和育仔的任务由受体承担。
（4）在制备乳腺生物反应器的过程中，科学家利用 两种工具酶将生长激素基因与 基因的启动子等调控组件重组在一起，通过 等方法，导入哺乳动物的受精卵中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。以上过程的核心是 。
(7分)右图表示人体内部分结缔组织细胞的形成过程。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，其形成过程未经人为调控；A细胞到单核细胞、红细胞的几种途径中部分属于人为调控过程，PU、GATA为两种蛋白质，是细胞内的调控因子。请回答下列问题：
(1) 过程①发生的根本原因是________，过程②中，染色体组数目发生倍增的时期是________。
(2) 为长期培养胚胎干细胞，需建立一种培养体系，可按过程③途径操作。首先在培养皿底部用胚胎成纤维细胞制备饲养层，当饲养层细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止增殖。此时，培养皿底部形成的细胞层数是________。然后将干细胞接种在饲养层上进行培养，由此推测，胚胎成纤维细胞可以分泌________物质。
(3) 图中A、B、C、D四类细胞，有可能在骨髓中完成细胞分化的是________。
(4) 研究发现，PU和GATA可以识别基因的特定序列，由此推测，其结构更接近下列物质中的________。
① DNA聚合酶 ② DNA连接酶 ③ 逆转录酶 ④ 限制酶
(5) 若要使血红细胞前体直接转变成单核细胞，可行的人为调控措施是____。
胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：
(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于 ，细胞B的名称是 。
(2)应用2中牛完成体内受精的场所是____________，刚种植在子宫内的胚胎其发育程度一般为 ，胚胎种植后可以通过__________从母体获得正常发育所需要的物质。这种试管牛的产生，采用的胚胎工程技术有 （至少答出2种）等。
(3)应用3中细胞C取自牛胎儿的 或 细胞。
(4)应用4中通过 技术获得二分胚①和②，得到两只小牛，可以通过PCR技术进行小牛早期胚胎性别鉴定；也可以在细胞水平上通过对___________的分析进行性别鉴定。
下图甲表示干细胞的三个发育途径，图乙表示细胞增殖过程中某一时期示意图，请据图回答：
（1）图甲中若A细胞是胚胎干细胞，B细胞是造血干细胞，则B细胞与A细胞相比，___________的全能性降低；A细胞分化成D细胞的根本原因是_____________。
（2）图甲中若D细胞是胰腺细胞，则与其外分泌蛋白的加工、转运直接相关的细胞器有____________（填图中序号）。
（3）图甲中若D为白细胞吞噬并消灭细菌过程的示意图，为此过程提供能量的场所有 ，此过程小泡可能是____________（细胞器）。这一过程体现生物膜具有 特性。
（4）图乙所示细胞中若②号染色体的遗传信息来自父方，那么含有母方遗传信息的对应染色体的序号为________。图乙所示细胞前一个分裂时期时，细胞中的同源染色体对数、着丝点数、染色单体数分别是__________。
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