白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）若人的血清白蛋白基因的序列是未知的，可以从 中获得；
（2）重组细胞①和②中 （①／②）实现了基因的重组，实验过程b利用的技术是 ；
（3）若将早期胚胎分成若干个，让其分别发育成小牛，这些小牛的基因型 （相同／不同），此项技术称为 ；
（4）在进行胚胎移植时，需对受体母牛进行 处理；
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，需用酶处理内细胞团，使之分散成单个细胞。培养过程中往往需用胚胎成纤维细胞制备 ，目的是 。在培养过程中，往往还要加入抗生素，以防止 。
如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。
(1) ③过程完成的原因是__________，在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__________。
(2)过程③在化学药剂________的作用下会发生细胞融合；动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是________。
(3)过程__________属于脱分化，过程__________属于再分化，细胞发生分化的根本原因是__________。
(4)过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是__________。
(5) 若番茄细胞内含A个染色体，马铃薯细胞内含B个染色体，则番茄－马铃薯细胞内_______个染色体；若采用杂交育种方法成功的话，得到的后代含_____个染色体，必须用_____________来处理幼苗，才能得到可育的番茄－马铃薯，其中含有_____个染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：______________________。
科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄－马铃薯”杂种植株，如下图，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
（1）实现过程②的技术是 。如果将已除去细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？ 。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是______________________，其中过程④相当于______________过程，⑤涉及的分裂方式为______________。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇，培养将进行到__________ （填图中字母）。
（3）若番茄细胞含m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
【生物—现代生物科技专题】生物工程在医疗卫生方面得到了广泛应用，请回答下列问题。
（1）利用_______技术制备的杂交瘤细胞，可用于制备单克隆抗体。与体内抗体相比，单克隆抗体具有理化性质单一、______、可大量制备等优点。
（2）干扰素、胰岛素等物质可以通过工程菌来大量生产。该技术中目的基因和运载体要用同种_______切割，以产生相同的_____。
（3）在完成体外受精的过程中，对已取得的精子要进行_______处理，为了获取更多的卵细胞，一般要对雌性个体注射______，使其超数排卵。
（4）利用细胞培养技术可以获取自身健康的皮肤，用于皮肤移植。在此过程中通入CO2的目的是________，在培养液中加入_______酶，可防止细胞出现接触抑制现象。
铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：
在固体培养基上，的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
⑴选用新生营养芽为外植体的原因是，诱导外植体形成的过程称。
⑵与黑暗条件下相比，在光照条件下生长的优势体现在，，。
⑶脱落酸（）能提高生物碱含量，但会抑制
的生长。若采用液体培养，推测添加适量的
可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：
①的浓度梯度设置和添加方式：设4个
处理组，1个空白对照组，3次重复。因
受热易分解，故一定浓度的无菌
母液应在各组液体培养基后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（
）称重（
/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为。
③依所测定数据确定适宜的浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的时，其对应的
浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
长期以来优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年发展起来的生物工程技术使优良种畜的繁殖大大加速。下面是科学家快速繁殖良种奶牛的两种方法，请据图完成下列问题：
(1)在试管牛E和克隆牛G的培育过程中都必须用到的生物技术有______、 。
(2)用激素处理的目的是使B牛 ，用的激素是 ，E牛的性别是 。
(3)从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到 （时期）才能与精子结合。
(4)A牛的精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫做 。卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙能够观察到 。
(5)生产上常用 期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用 技术。如果是对囊胚阶段的胚胎分割操作时应注意 。
（6）试管牛技术作为现代生物技术和母牛正常怀孕、生产的过程的相同之处是 ，不同点在于 。
基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（
细胞）对
基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的。
（2）步骤②中，重组胚胎培养到期时， 可从其内细胞团分离出细胞。
（3）步骤③中，需要构建含有基因的表达载体。可以根据
基因的设计引物，利用
技术扩增
基因片段。用
限制酶分别在片段两侧进行酶切获得
基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有酶的酶切位点。
（4）为检测基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的，用抗
蛋白的抗体进行杂交实验。
为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。（共11分）
（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的_____处，DNA连接酶作用于______处。（填“a”或“b”）
（2） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和_________法。
（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用__________技术。该技术的核心是__________和____________。该技术的原理是____________。
（4）植物细胞的最外层结构是_________ ，在植物体细胞杂交技术之前，先用_________ 酶去除这层结构。接下来的关键环节 _________ ，常用的化学方法是_________ .
下图为应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。
(1)在培育转入人生长激素基因的牛的过程中，人的生长激素基因之所以能在牛细胞内表达，产生人的生长激素，其原因是______________________。
(2)要使人的生长激素基因在牛的垂体细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、_______________、_______________、标记基因、复制原点等部分。在③之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人生长激素基因，宜采用______________技术。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用___________和___________技术，培育出多头相同的转基因牛犊。
(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅰ最可能是______________细胞，Ⅱ代表的细胞具有________________的特点。
(4)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，则与采用叶肉细胞相比较，其优点是_________________________________________，⑤过程采用的技术是_______________________________。科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于_______________。
“白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点。如图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图，请完成下列问题：
(1)由杂种细胞D培育成白菜—甘蓝植株，采用的技术手段是________ 。
(2) 在d培养过程中，培养基的成分通常包括水、无机营养、有机营养和________ 等，同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证__________________。
(3)要获得图中白菜和甘蓝的原生质体，首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具：紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、镊子、显微镜、载玻片等。请你完成下面“检验是否已除去细胞壁实验”的方法步骤，并预测和解释实验结果。主要实验步骤：
①在适宜浓度的蔗糖溶液中，加入适量纤维素酶和果胶酶配制成细胞壁分解液。
②检验细胞壁分解液除去细胞壁的方法。
第一步：用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央，滴加适量细胞壁分解液，制成临时装片，得到实验组装片。
第二步：用镊子撕取另一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央，
___________________________________________________ 。
第三步：在显微镜下观察比较实验组和对照组装片洋葱细胞的形态。
结果预测和分析：如果 装片的洋葱细胞呈分散的紫色球形，表明 ；如果 装片的洋葱细胞呈相互连接的紫色多边形，则表明 。
为了获得植物次生代谢产物,先用植物外植体获得愈伤组织,然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题:
(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。
(2)在愈伤组织悬浮培养时,细胞干重、蔗糖浓度和 的变化如图所示。细胞干重在 12
后下降的原因有;培养液中蔗糖的作用是、。
(3)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。 二倍体愈伤组织细胞经 处理,会产生染色体加倍的细胞。 为检测愈伤组织细胞染色体数目,压片前常用纤维素酶和酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞()经诱导处理后,观察到染色体数为
的细胞,合理的解释是、。
(4)为了更好地获得次生代谢产物,生产中采用植物细胞的固定化技术,其原理与酵母细胞固定化类似。 下列说法正确的有(填序号)。
①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋 ②必须在光照条件下培养
③培养过程中需通空气 ④固定化后植物细胞生长会变慢
下图列举了几种植物的育种方式，请据图同答相关问题。
(1)甲育种方式称为________ 。
(2)通过丁种方式可以获得脱毒苗，培养过程中c常常取用茎尖的原因是________。
(3)乙方式通常用射线处理植物的愈伤组织能获得较好效果，原因是________。
(4)丙方式将外源目的基因导人受体植物细胞，最常采用的方法是________。在通过丙方式获得转基因植株的过程中，核心步骤是________________________。
(5)甲、丙两种育种方式与传统杂交育种相比，其优点是________________________。
一场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了,“新人”之一是 B 细胞和骨髓瘤细胞,新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。160min后,中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。请回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体用到的动物细胞工程技术手段有
（2）单克隆抗体是由______________细胞产生的。
（3）若用于SARS的预防上,A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是_______细胞。B细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起,体现了细胞膜具有________的特点。科学工作者正在研究治疗癌症使用的生物导弹是_______
（4）鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_______________（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。
图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄和马铃薯植物体细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题：
(1)图1中注射到小鼠体内的物质是
。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是。该过程所用的生物技术有。
(2)图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2囊胚中的均等分割后进行胚胎移植，暂不移入的胚胎可使用方法保存。
(3)图3中过程①是植物细胞形成的阶段，该过程所用的酶是。植物体细胞杂交技术的重要意义是。
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