Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：
(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________。
(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其内细胞团分离出ES细胞。
(3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的________设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用Hind Ⅲ和Pst Ⅰ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________________酶的酶切位点。
(4)为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
人们发现小型猪的器官可用来替代人体器官进行移植，但小型猪器官表面的抗原可引起免疫排斥反应。如图为科学家将小型猪器官表面抗原基因(Anti)“反向处理”，并人工 合成reAnti基因，转入猪成纤维细胞，培育成转基因克隆猪的过程示意图，请据图回答问题。
(1) Anti基因的表达产物定位在 上，可被 识别，引起免疫反应。
（2）若使reAnti基因和Anti基因在转基因克隆猪的同一细胞内表达，应在人工合成的reAnti基因的首段连接________。
(3)Anti基因的mRNA为
…AUCGCCCG…—OH。将Anti基因“反向处理”后，人工合成的reAnti基因的模板链为…ATCGCCCG…—OH，分析可知，Anti基因与reAnti基因的mRNA可发生碱基互补配对形成______，从而抑制了Anti基因表达的_______过程。
(4) 培养猪胎儿成纤维细胞，要将培养瓶置于含________的混合气体培养箱中进行培养。
(5) 过程③表示通过显微操作法吸出卵母细胞中的细胞核，此时的卵母细胞处于减数分裂的 时期。微型吸管除了将细胞核吸出外，往往还要将________一并吸出。
以下为植物体细胞杂交技术流程图．其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，基因型分别为Aa和Bb。据图分析回答：
（1）①过程所使用的物质是 ，由此生成的a和b细胞称为__________，将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养，再经过②和③，c细胞的基因型可能有_______种(只考虑两两融合)，经筛选出的杂种细胞的基因型是 。
（2）采用化学法进行过程②时，一般是用____________作为诱导剂。植物体细胞杂交与自然状况下有性生殖细胞的结合相比，前者的主要优势是 。
（3）④过程中，细胞的全能性会________(增大或减小)，⑤过程中，与芽、根的分化相关的主要植物激素是_____________________________。
（4）如果图中甲、乙分别为番茄和马铃薯的体细胞，从理论上讲用融合后的细胞培育出的“番茄—马铃薯”植株是_____________（可育/不可育）。
（5）获得杂种植株后，若要利用基因工程技术导入抗除草剂基因，在基因导入时，最好把该基因导入到植物的叶绿体或线粒体基因组中，这样做的好处是 。
【生物―――选修3现代生物科技专题】
植物细胞工程作为一种新兴的生物技术，已经普遍应用于社会生产的方方面面，关于植物细胞工程的运用请回答以下相关问题：
（1）植物组织培养不仅可以保持优良品种的 ，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。若想获得脱毒苗，可以切取一定大小的 进行培养。
（2）在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的 状态，容易受到培养条件和外界压力的影响而发生 。
（3）人工种子，就是以植物组织培养得到 等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。（要求至少写两个）
（4）在植物组织培养过程中往往要加入一定量的植物激素，常常使用 两种植物激素。这两种植物激素的协同调控作用在组织培养中非常重要，人们常把它们成为“激素杠杆”，不同比例时，所产生的效果往往不同，当比例为 时，主要诱导植物组织脱分化，而比例为 时，主要诱导植物组织再分化。
【生物——选修3：现代生物科技专题】
应用现代生物技术可以大量获得针对甲型H1N1病毒的抗体，并可用于临床治疗，如图表示制备该抗体的设想，请据图回答下列问题：
(1)在培育转甲型H1N1病毒抗体基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是____________，②过程常用的方法是____________。
(2)转甲型H1N1病毒抗体基因牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N1病毒抗体，在基因表达中，甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有________，它是____________识别和结合的位点。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用________技术，培养出多头相同的转基因牛。
(3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，Ⅰ最可能是________细胞，Ⅱ代表的细胞具有________________________的特点。
(4)制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术，与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用____________________对细胞进行处理，作用是除去________。
下图是植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答：
（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。
（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。
动物细胞融合与植物生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。
（3）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，其中步骤③、步骤④分别表示 过程。
（4）植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以 。目前，动物细胞融合技术最重要的用途是 。
生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M（单细胞）产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图1）。
1、筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供 ，培养基灭菌采用的最适方法是 法。
2、图2是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是 ，图B效果的接种方法是 。
3、若需人工大量克隆脂肪酶基因，可应用___ _技术，该过程需要的特殊酶是 。
4、常用血球计数板（规格为1mm×1mm×0.1mm）分两类，一类是每个计数室包括16个中格，每个中格包括25个小格，这种计数板抽样计数时只要统计四个顶角的中格即可；另一类是是每个计数室包括25个中格，每个中格包括16个小格，这种计数板抽样计数时除了统计四个顶角的中格外还要计数中央的一个中格。在实验中如需定期测定培养液中微生物M的细胞数量，则在取出的样液中要立即加入固定液，其目的是 。如果将样液稀释100倍，采用血球计数板计数时，观察到的计数室中细胞分布如图2所示，则培养液中微生物M的 细胞密度为 个/L.
5、研究人员拟将某目的基因导入微生物M 细胞中，为此需要选择合适的质粒作为运载体。下图所示X－1、X－2、X－3、X－4为四种相关质粒，其中Tcr表示抗四环素的抗性基因，Apr表示青霉素抗性基因，E1和E2表示两种限制酶的识别位点。基因工程中限制酶作用的化学键是 。若将这四种质粒分别导入微生物M，然后将微生物M菌液分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上培养。则在这两种培养基上均不能生长的M细胞类型有________________。
6、已知Tcr长度为1.5kb(1kb=1000个碱基对)，Apr长度为0.5kb。如果X－1用E1酶切，产生0.5kb碱基片段和8.5 kb碱基片段,那么质粒X－2用E2酶切后的片段长度为_____________对碱基
（除标注外每空2分，共15分）下图为培育转基因抗虫棉的技术流程，请据图回答：
(1)质粒上标记基因的作用是 。
(2)过程①是 ，其组成除了目的基因外还必须有___________ _____________以及标记基因。
(3)过程②采用最多的方法是 ，检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上需用
(4)③过程的培养基除含有必须的营养物质、琼脂外，还需要添加 ，④过程的实质是 。
(5)经检测抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因，该植株自交得到Fl，其中全部的抗虫植株再自交一次，后代中抗虫植株占总数的 。
马铃薯是种植广泛的农作物，病毒侵染后导致产量大幅下降 ，培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是提高产量的有效方法。请分析并回答下列问题：
（1）马铃薯的 （填结构）含病毒极少甚至无病毒，因此可将其接种在培养基中，经过人工培养获得脱毒苗。培养基中添加的生长素和细胞分裂素可诱导离体细胞经过 、 完成组织培养过程，从而形成脱毒苗。
（2）为监控脱毒苗的质量，可采用 的方法检测病毒的基因，也可采用 的方法检测病毒的蛋白质。
（3）若要通过转基因技术获得抗病毒的马铃薯植株，采用最多的方法是将病毒复制酶基因插 入到 中 Ti质粒的 上，构建出 后，将其导入马铃薯受体细胞，筛选出成功转化的马铃薯细胞后，再通过 技术形成完整植株。
图甲是培养纯合高茎抗病番茄植株的几种途径，其中涉及的两对相对性状独立遗传。图乙是纯合高茎抗病番茄植株在不同光照强度下C02吸收速率曲线。据图回答有关问题：
(1)图甲中____________ 过程(填标号)将发生非等位基因的自由组合。__________过程(填标号)出现细胞脱分化现象。
(2)图申中的抗病基因一般需要与相应的质粒进行重组，已知限制性内切酶I的识别序列和切点是---G↓ATCC一，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC一。在抗病基因的两侧各有一个酶I切点和一个酶Ⅱ切点。请在方框中画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。
(3)图乙中当光照强度达到Z点(光饱和点)后，限制番茄光合作用的因素主要是_______ (答出两点)。若一天的平均光照强度在X和Y之间(白天和黑夜的时间各位12h则番茄一昼夜中有机物积累量的变化趋势是_____；（减少或增加)。
(4)已经测得玉米在光照强度Z时，其光合作用强度比番茄大。据此有人认为玉米的光饱和点大于番茄。请完成关于此问题的实验探究，以确定这种推论是否正确。
材料用具：生长状况相同的玉米植株2盆，可调节光强度的光源2个，测定光合作用强度的装置等(测定光合作用强度的具体方法不做要求，玉米的生长发育状况和叶片的数量对光饱和点的影响忽略不计)。
①实验假设________________________________________________________________
②实验步骤：___________________________________________________ ___________
③预测结果及结论：__________________________________________________________
——现代生物科技专题(第4小题1分，其他每空2分，共15分)
根据所学生物学知识回答：
⑴如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的 中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 上。
⑵目前临床上使用的红细胞生成素(一种糖蛋白，用于治疗肾衰性贫血)主要来自基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO)。检测rhEPO的体外活性需用抗rhEPO的单克隆抗体。分泌该单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠 细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
⑶在“试管牛”的培育过程中，采用激素处理可使良种母牛一次排出多枚卵母细胞，最常用的激素是 。从良种公牛采集的精子需 后才能进行受精作用。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
⑷生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的什么原理( )(1分)
| A．协调与平衡原理 | B．物种多样性原理 |
| C．物质循环再生原理 | D．整体性原理 |
（除标注外每空2分，共15分）如图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程，请回答：
(1)对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是_________________；对月季来说，适宜花粉培养的时期是________期。为确定花粉是否处于该时期，最常用的镜检方法是________。
(2)在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有___________________________。
(3)两种植物组织培养都需要接种，在进行接种时应注意( )
①接种室要消毒 ②只要戴口罩，操作时便可说话 ③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0.1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净 ④接种操作要在酒精灯火焰旁进行 ⑤接种完毕应立即盖好瓶盖
| A．①②③④⑤ | B．①②③④ | C．①③④⑤ | D．②③④⑤ |
(4)月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过________阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于______________________。
(5)图中的B过程都需要_______，因为愈伤组织形成幼小植物后，植物需要叶绿素进行光合作用。
请回答下列有关细胞工程和胚胎工程的问题：
一对健康夫妇生下一婴儿，一岁时脑出血死亡，二年后女方怀孕6个月时，经羊水及脐带血诊断为患血友病，遂引产。于是夫妇俩到医院做试管婴儿。医生培养7个活体胚胎，抽取每个胚胎]—2个细胞检查后，选两个胚胎移植，最后一个移植成功，出生了一健康婴儿，是我国第三代试管婴儿。请回答：
(1)试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕生产的过程的相同之处是__________________，不同点在______________________________________________
(2)医生抽取活体胚胎的1或2个细胞后，可通过观察___________判断早期胚胎的性别，你认为医生应选用_____________性胚胎进行移植。应用现代生物技术，现在人们已能够选取更理想的胚胎。自然状态下，该夫妇出现更理想的胚胎的概率是_____________。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。
(3)供体器官的短缺和排斥反应是制约器官移植的两个重要问题。而治疗性克隆能最终解决这两个问题。下图是治疗性克隆的过程图解：
I．请在上图中横线上填上适当的术语：①____________；②________________
Ⅱ．上图中的③④表示的生理过程是_________________________________
下图表示科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄—马铃薯”植株的过程，据图回答下列问题。
（1）图中①②过程所用到的酶是 。
（2）两个原生质体的融合依赖于细胞膜的 ，再生新的细胞壁是 的标志。新的细胞壁的产生主要与细胞内的 （填细胞器）有关。
（3）由杂种细胞能培育成为杂种植株的根本原因是 。
（4）为了实现细胞产物的工厂化生产，需要将紫草细胞接种到发酵罐内，在无菌的环境中培养到图中 （填字母）步骤。
（5）图中所示的育种方式最大的优点是 。
【生物——现代生物科技专题】“白菜——甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短和耐储藏等优点。下图是“白菜——甘蓝”的培育过程示意图，他们的基因型分别为AaBB、ccDd，请回答下列问题：
(1)在上述过程中，实现①②过程常用的物质为 。
(2)过程③叫做_____________，获得的融合细胞的基因型 。
(3)下列关于植物细胞工程的叙述，正确的有 （不定项）
A．若用化学法诱导过程③，所用的诱导剂一般是PEG
B．过程④是细胞壁的再生过程,标志着融合的完成
C．“白菜——甘蓝”杂种植株可以产生可育的配子
D．⑤过程利用的理论基础是植物细胞具有全能性
(4)植物体细胞杂交技术的优点是 。
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