（生物选做题选修三：现代生物科技专题）以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。
（1）上图中过程①的完成采用的方法有： ，依据的生物学原理 ；
（2）过程④要用到的酶有 ，过程⑥采用的方法叫 。
上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。
| 分子量（kb） |
1．0 |
2．0 |
3．0 |
4．0 |
5．0 |
6．0 |
7．0 |
8．0 |
9．0 |
10．0 |
| 酶M |
+ |
+ |
+ |
|||||||
| 酶N |
+ |
+ |
||||||||
| 酶M+酶N |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
|||||
| 凝胶电泳结果（１kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在 |
（3）该质粒长度为 kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有 、 个。
（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是 。
（5）在表达载体中，启动子的作用是： 识别和结合的部位，驱动V1基因的 。
单克隆抗体已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示:
(1)过程①_______（填“是”或“否”）可以发生在真核细胞中。
(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生免疫（填“体液”或“细胞”）。从小鼠体内分离的细胞I是，细胞Ⅱ应具有的特点是。
(3)体外培养细胞II，首先应保证其处于的环境，其次需要提供充足的营养和适宜的温度、pH。
(4)对于转基因成功的细胞II还要进行克隆化培养和检测。
(5)若要预防H7N9禽流感，可用图中的作为疫苗。
【生物——选修3：现代生物技术专题】
Ⅰ．从世界上第一位“试管婴儿”诞生，至今全球试管婴儿数量已达到400万。从克隆羊“多利”诞生，至今已成功克隆了多种动物。请分析回答试管婴儿与克隆技术的有关问题：
（1）培育试管婴儿时，可通过给母体注射 增加排卵数量，从父亲体内获得的精子需要进行 处理，才能完成受精作用。
（2）克隆动物时，将甲个体的细胞核移入乙个体去核的卵母细胞中，由重组细胞培育成个体丙，则个体丙的基因来源于_________________。
（3）克隆动物的生殖方式属于___________。
Ⅱ．在某水域的生态治理中相继引种了浮水植物、沉水植物共计10余种，一段时间后在围隔区内已经形成了以沉水植物为优势的水生植物群体，结果试验区总氮量仅为试验区外的五分之一，有效地改善了水质。
（1）此项生态工程依据的生态学原理除了协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理外，还包括 和 。
（2）生态工程的调控机制是 ，主要利用的能源是 。
[生物──选修3：现代生物科技专题] （除标注外，每空2分，共15分）
科学家利用细胞工程培育了“白菜—甘蓝”杂种植株，如图所示，请据图回答下列问题：
（1）由D形成F过程所依据的原理是________________，从本质上讲，“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是________________________的结果。
（2）图中D细胞形成的标志是________________，若“白菜—甘蓝”杂种植株为四倍体，则该植株的花粉经离体培养得到的植株是________倍体。
（3）“白菜—甘蓝”杂种植株的食用部分是叶，但叶又易受昆虫危害而影响产量，科学家又利用基因工程培育出带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株，请你设计实验，检测此植株的抗虫基因是否表达。
① 取昆虫幼虫放到带有抗虫基因的“白菜—甘蓝”植株甲上，再取等量生活状态基本一致的昆虫幼虫放在________________________________植株乙上。
② 适宜条件下培养一段时间后，分别观察__________________________________的生活情况。
③ 若___________________，说明甲植株的抗虫基因未得到表达；若______________，说明甲植株的抗虫基因得到表达。
“试管婴儿技术”不仅使一部分不能生育的男女重新获得了生育的机会，也为人类的优生优育开辟了新的途径。据此回答：
（1）在体外受精时，精子首先要进行________处理；卵细胞则要培养到_________ （时期）才能与精子结合。
（2）采用__________________技术，能得到“同卵双胞胎”。
（3）如果滥用试管婴儿技术设计婴儿性别，将会破坏人类正常的_______。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家将________和乳腺蛋白基因的_______、终止子等重组在一起，通过显微注射等方法导入牛的受精卵中。
（5）动物细胞工程中，重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物外，还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、 _等物质，恒温箱中加入CO2的作用是___________
某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如图所示。
若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。 回答下列问题：
(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠，理由是______________。
(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有_________________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是_______________________________。
(3)杂交瘤细胞中有________个细胞核，染色体数目最多是________条。
(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是__________________。
现有甲、乙两个番茄品种（染色体数2n=24），其基因型分别为AAbb和aaBB，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于500勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于500勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：
（1）甲、乙两番茄品种花粉经过花药离体培养技术而成的植株是 倍体。
（2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用____________破除细胞壁。
（3）在细胞融合技术中，常用的化学试剂是________。融合后形成 的细胞类型有______种（这里仅考虑2个原生质体的相互融合）。
（4） 细胞融合成功的标志是_____________。
（5）细胞融合后诱导产生的细胞团叫_____________。
（6）在大于500勒克斯光照下培养，能分化的细胞团的基因型是_______（这里只考虑2个原生质体的相互融合）。由该细胞团分化发育成的植株，其染色体数是___________。
下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解，据图回答：
（1）图中①、②所示的结构分别是_____________、_____________，④过程常用的方法是___________。
（2）图示治病的方法叫做______________，与一般的异体移植相比最大的优点是___________________。
为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答下列问题。
（1）试管牛的培育属于 （“有性繁殖”或“无性繁殖”）；试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有早期胚胎培养、_________等；克隆牛的培育依据的原理是 。
（2）促使B牛多排卵的激素一般是 。对B牛和D牛要进行处理。
（3）在受精的过程中，判断卵子是否受精的标志是 。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，即科学家将 和乳腺蛋白基因的 、 等调控组件重组在一起，该过程需要用到的酶是 ，再通过 法导入牛的 中。
图1表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂种细胞的过程（注：杂种细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留人类染色体的种类和数量是不同的）。表1表示几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系。请回答下列问题：
表1 几种杂种细胞中基因的存在与人体染色体间的关系
| 杂种细胞系 |
||||||
| A |
B |
C |
D |
E |
||
| 人体基因 |
1 |
﹢ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
| 2 |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
|
| 3 |
﹢ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
|
| 人体染色体 |
1 |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
| 2 |
﹢ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹣ |
|
| 3 |
﹣ |
﹣ |
﹣ |
﹢ |
﹢ |
注：“﹢”表示有，“﹣”表示无
（1）图1中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有 （至少写出两种），再用特定的 培养基进行筛选，得到杂种细胞。
（2）培养杂种细胞时，根据细胞所需营养物质的种类和数量严格配制培养基，此外经常会在培养基中加入 。培养过程细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是 。
（3）假如每种杂种细胞只保留了人的1条染色体，从染色体组成的角度考虑，杂种细胞可能有 种。
（4）据表1 推测，第2染色体上有第 基因，可进一步证明萨顿的假说即基因在染色体上是正确的。
目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请据图回答：
（1）获取外源基因用到的工具酶是 ，为了提高实验成功率，通常利用 技术获得大量标记的外源基因。
（2）外源基因能够整合到精子的 上是提高转化率的关键，因为受精时只有精子的 才能进入卵细胞中。
（3）过程②采用的是 技术，该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 处理。
（4）过程③需要在 (请写出4点)等条件下进行。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入 。
科学家用植物体细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄－马铃薯”杂种植株，如下图，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
（1）实现过程②的技术是 。如果将已除去细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？ 。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是______________________，其中过程④相当于______________过程，⑤涉及的分裂方式为______________。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇，培养将进行到__________ （填图中字母）。
（3）若番茄细胞含m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄－马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。
通过细胞工程技术，利用甲、乙两种植物的各自优势(甲耐盐、乙高产)，培育高产耐盐的杂种植株。请完善下列实验流程并回答问题：
（1）A是_________酶，B是_________，D是具有_________优良性状的幼芽。D长成的幼苗需要选择的原因是____________。
（2）由C形成植株的过程利用了_________技术，形成愈伤组织需要经过_________过程，愈伤组织形成D需要经过_________过程。
（3）植物体细胞融合成功的标志是___________。
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。请根据示意图回答下列问题。
（1）单克隆抗体技术是____________________技术中最重要的用途。将特定的抗原注入小鼠体内，其目的是使小鼠产生__________细胞。
（2）单克隆抗体的化学本质是__________；合成与分泌单克隆抗体涉及到的细胞器是__________、__________、__________、__________。
（3）骨髓瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起，细胞融合完成后，在培养基中有_____种两两融合的细胞，融合的原理是__________，融合的方法除了电激外，还可以用化学诱导剂__________或灭活的___________。
（4）从图中可以看出，单克隆抗体制备经过了_____次筛选，第一次筛选得到的细胞是___________，该细胞的特点是既能在体外_____，又能分泌_____抗体。
在20世纪初，科学家用植物体细胞杂交的方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄马铃薯”杂种植株。如下图，其中①——⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
（1）实现过程②的技术是________。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为__________。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是_____________，其中过程④相当于____________过程，⑤涉及的分裂方式为_______________。
（3）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含__________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？__________。
（4）如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是_________。
（5）若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，那么该方案的目的是 。
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