根据图7－16－2回答相关问题：
图7－16－2
(1)①过程中使用了__________________酶，以使植物原生质体相互分离，此处使用的溶液浓度较大，保证植物细胞会发生________，以保护细胞原生质体不被破坏；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是________。
(2)③处的细胞与④处的细胞相比，最大的区别是不具有________；动物细胞与④处的细胞相比，在功能上的特点是不具有______________。
(3)过程________属于再分化；动植物细胞发生分化的根本原因都是________________________。
(4)③处的细胞在化学药剂__________的作用下，会发生细胞融合；动物细胞融合方法与植物细胞不相同的是__________________________。
(5)(多选)下列关于细胞工程的叙述中，错误的是( )
| A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 |
| B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 |
| C．⑥处的细胞都必须通过细胞分裂才能形成愈伤组织 |
| D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 |
E．动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现
2012年4月，世界首例转乳糖酶基因奶牛“克拉斯”在我国内蒙古大学生命科学院生物制造重点实验室诞生。2011年5月，科研人员在一头黑白花奶牛（甲）怀孕45天的一个胎儿（乙）中提取成纤维细胞，然后用病毒作运载体把乳糖酶基因转到该细胞中，接着再将该细胞注入到去核的卵母细胞中，再在体外将该杂合细胞培养成早期胚胎，然后将胚胎移植到代孕母牛（丙）的子宫内，283天后，代孕母牛正常分娩，“克拉斯”就此诞生；科研人员预期，“克拉斯”所产的牛奶中，乳糖含量将大大降低，这样的牛奶适合于乳糖不耐症的人群的饮用。
（1）人类婴幼儿时期以乳汁为食，此时小肠上皮细胞是能够产生乳糖酶的，但成年后乳汁摄入很少，尤其在亚洲人群中，乳糖酶基因的表达受到抑制，这体现了基因表达在 上的差异。
（2）“克拉斯”是否是一头真正的转基因牛，可以对其基因进行检测，检测的原理是 。
（3）“克拉斯”转入的目的基因是 ，该基因只在 细胞中表达。
（4）将早期胚胎移植到代孕母牛（丙）子宫内时，必须对丙注射 ，使其子宫适合于胚胎的着床，囊胚时期的 细胞发育为胎膜和胎盘，可与子宫建立正常的生理和组织联系。
（5）“克拉斯”的培育过程涉及的生物技术有 、 、 。
很久以前科学家在土壤中发现了苏云金杆菌能制造一种对昆虫有毒的蛋白质，当时许多人就想把编码这一蛋白质的基因(抗虫基因)转移到农作物中，以降低昆虫对农作物造成的危害。20 世纪90 年代，美国科学家采用基因工程技术首次培育出抗虫玉米新品种。主要培育过程如图：
（1）常用的MS培养基主要成分包括大量元素即 以及微量元素和 ，检验培养基中是否有杂菌污染最有效的方法是 。
（2）苏云金杆菌细胞中产生毒蛋白的场所是 。
（3）目的基因导入后从愈伤组织形成完整植株的途径有两条（如下图），具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中_________
（4）愈伤组织是分化的细胞经过 形成的，具有较高的 性。
科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄——马铃薯”杂种植株，如图所示，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：
(1)实现过程②的技术 。如果将已除去壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞是何形状？ 。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞结构为 。
(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是 ，其中过程④相当于 过程，⑤涉及的分裂方式为 。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇，培养将进行到 （填字母编号）。
(3)若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄——马铃薯”细胞内含 条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄——马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植物属于 倍体植株。
(4)如果形成c细胞的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株f的处理方法是 。
(5)若a、b依次为小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，那么该方案的目的是 。若将该方案用在SARS的研究和治疗上，则从理论上讲c细胞的制备可采用 细胞和 的融合。如果分析出了所产生的氨基酸序列，则可采用 方法，以 为原料合成出该SARS抗体的基因。
人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答：
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有 。
(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体，可通过 等过程制成装片，然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是 ，在HAT培养基上存活的细胞可能包括 (填下列序号)。①无抗体分泌的细胞 ②抗HPV抗体的分泌细胞③其它无关抗体的分泌细胞
(3)对于抗体检测呈 性的杂交克隆应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～l0个细胞/mL，每孔加入细胞稀释液 mL(0.1／1／10)，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是 。
(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路 。
犬细小病毒（Canine Parvovirus，CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体（CPV McAb）可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制,进而杀灭犬体内病毒。请回答：
（1）在单克隆抗体CPV McAb的制备过程中，所用到的细胞工程技术除了动物细胞融合之外还
有 技术。
（2）给成年鼠注射CPV ，一段时间后，若鼠血清中抗 的抗体检测呈阳性，说明体内产生了 反应。
（3）将小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌CPV McAb的杂交细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过 培养基筛选出杂交细胞，另一次是通过 筛选出能分泌CPV McAb的杂交细胞。
（4）通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别CPV ，其原因是该抗体具有 的特点。
如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养)，据图回答问题：
(1)OA段的培养称为________培养，AB段可能发生了________现象，需要用________酶处理使组织细胞分散开来。
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行________，不同的是植物细胞还要进行__________________________________________________。
(3)为制备单克隆抗体，需将________注射到小鼠体内，以此获取________细胞，同时可选取图中________点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取的细胞，其细胞膜上的________比正常细胞显著减少，为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用________培养基达到目的。
我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放在培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是细胞培养形成兰花植株示意图，请据图分析回答：
(1)过程③和④分别表示________和________。
(2)在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素及氨基酸外，还需要在培养基中加入__________。同时，在培养过程中，除必需的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证________。
(3)在植物组织培养的过程中，可以对________进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱导分化形成植株，从中选育出优良品种。这种作物新品种的培育方法属于________。
(4)若将兰花的茎尖细胞换成兰花的花粉粒，经组织培养形成植株，这种育种方法称为____________________，其突出优点是____________________。
下图为单克隆抗体的制备过程，请据图回答问题：
（1）在获得B淋巴细胞之前，小鼠已被多次注射了 （相同/不同）抗原，注射后小鼠体内发生相应的 （细胞/体液）免疫反应，生成能产生抗体的B淋巴细胞。
（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的方法是 试剂诱导融合。融合结果随机出现多种不同的杂交细胞。②过程为选择培养基培养，从而得到 细胞。③过程为克隆培养并检验，从中选出 。
（3）④为目的细胞的扩大培养，既可以 培养，也可以注射到小鼠体内培养。从细胞培养液或小鼠腹水中就可以获得大量单克隆抗体。
（4）由于单克隆抗体具有 、 ，并可能大量制备的特点，广泛用于疾病的诊断等方面。
以下为人工合成reAnti基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答
(1)人工合成的reAnti基因可通过________ _________技术手段体外迅速扩增。
(2)过程③要将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的方法是 ，重组质粒导入之后，可通过 技术，来检测reAnti基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
(3)从猪中取胎儿成纤维细胞，用 处理，然后进行分散培养。培养时，将培养瓶置于含 （要求写清楚每种气体所占比例）的混合气体培养箱中进行培养，培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，一般还应添加 。
(4)去核前的卵母细胞应培养到 期。其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞。再利用物理或化学方法刺激，使之完成细胞分裂和发育，在体外培养成重组早期胚胎。
花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图：
据图回答下列问题：
(1)过程①所需的酶是______________________________________________________。
(2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________________。原生质体经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和________植株的根尖，通过________、________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a-h为操作过程，请据图回答有关问题：
（1）“试管牛”技术的操作流程是 （填字母）。
（2）图中数字标号代表的结构名称是①滋养层② ，③ ，其中 （添序号）处的细胞属于胚胎干细胞，形态上体积小，核大，核仁明显，功能上 。
（3）d操作的名称是 ，受体子宫内胚胎发育的过程中，细胞不断分裂，其分裂方式为 。图中用到的激素是 。
（4）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意 ，以免影响胚胎的恢复和进一步发育。
（5）受体母牛必须和供体牛属于 。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
（6）A、B牛的基因型是否相同？
科学家从悬浮培养的单细胞、离体花粉或胚囊中，通过植物组织培养技术获得胚状结构(胚状体)，胚状体不同于一般的种子胚，是由非合子细胞分化形成的类似于胚的结构物，所以，又称“体细胞胚”或“花粉胚”。胚状体在一定的条件下，可以通过个体发育过程形成植株。将其包埋在一个能提供营养的胶质中，外包裹上人造种皮，便制成了“人工种子”。人工种子的概念是1978年在加拿大举行的第四届国际植物组织、细胞培养会议上首次提出来的。目前，我国科学家利用植物组织培养技术已在烟草、水稻、小麦和玉米等植物上成功诱导出胚状体，而美、日、法等各国正着手将人工种子市场化、商品化。
(1)简要归纳“离体的细胞”进行植物组织培养获得胚状体的过程 。
(2)“人工种子”大体由胚状体、包埋胚状体的胶质以及人造种皮等三部分组成。包埋胚状体的胶质中富含营养物质，这是因为 。为了满足胚状体代谢的需求，“人造种皮”则必须具有良好的 性能。
(3)由“人工种子”萌发出的植株是否可育？
___________________________________________________________。
(4)写出“人造种子”商品化的意义（两项） ，
__________________。 (5)利用人工种子繁殖后代属于 。
人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导人奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
（1）以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有 。
（2）在基因工程中，我们称①为目的基因，请你举出获取目的基因的主要方法：
（至少答两种）。在①进入③之前要
构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有 ，将①导人③的常用方法是 。
（3）图中②一般经过 处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在
时期进行。
（4）将⑤送人⑦的最佳时期是 期。
（5）在胚胎发育过程中，囊胚进一步扩大，会导致 破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做 。
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