高中生物动物细胞工程的常用技术试题

下列关于生物工程的有关叙述中，正确的是                      （   ）

A．体外受精后形成的受精卵不需经早期发育培养，可直接完成植入或着床

B．胚胎分割是指借助显微操作技术将早期胚胎切割成二等份，再移植到代孕母子宫中发育，产生同卵双生后代的技术

C．细胞克隆要求必须保证分离出来的细胞是一个或多个分离的细胞

D．从理论上来说，由于细胞核具有基因组全套遗传信息，生物的体细胞有潜力直接发育成胚胎和形成与核供体完全相同的个体克隆

以下不能说明细胞全能性的实验是                                 

A．将诱变处理的番茄种子培育成植株	B．将紫罗兰的叶肉细胞培育成植株
C．将番茄与马铃薯细胞融合并培育成植株	D．将转基因的棉花细胞培育成植株

下列有关动物细胞克隆的叙述，错误的是

A．细胞克隆可用于从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系

B．原代培养物在首次传代时就成为细胞系，都有异倍体核型，遗传物质有所改变

C．应用克隆培养法建立的单克隆细胞团可称为细胞株

D．提高动物细胞克隆形成率需要添加血清（胎牛血清最好）及激素刺激等条件

请结合细胞与细胞工程的知识回答下列两个小题。
Ⅰ有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：

(1) 若a、b分别是基因型为Hr、hR两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时都不能生长。我们应从融合细胞的培养液(只考虑两两融合)中分离出基因型为         的细胞，较为简便的筛选方法是             。
(2) 若a、b表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植株的原理是               ，这种育种方法的优点是                             。
(3) 若a、b分别为骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞，则d细胞特点是                。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有                           的特点。
(4) 下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是                                      

（5）请你再说出一项动物细胞的融合技术的应用                             
Ⅱ．右图为叶绿体结构模式图，它是进行光合作用的细胞器。光合作用光反应所需的PSⅠ、PSⅡ、Cytb₆/f、ATP酶四类蛋白复合体存在图中③，同化C0₂的全部酶类则存在图中④，为了证实C0₂同化场所在哪里，某实验小组设计了下列实验，请你协助完成“验证C0₂同化场所是在叶绿体的基质而不是在叶绿体的类囊体的膜上”的实验。

1、设计思路：
首先要提取出完整的叶绿体，然后把                      分开，分别检测暗反应活性。
注：暗反应活性是指有无光合产物的生成或有无反应的条件（如酶）。
2、实验步骤：
（1）在适宜的条件下，提取具有生理活性的完整叶绿体。
（2）将提取的完整叶绿体放入          中，然后高速离心，分离得到上清液和沉淀物。
（3）采用以下测定可判别C0₂同化场所：分别在上清液和沉淀物中加入           ，检测有无含有14C的光合产物的生成。也可将步骤(2)获得的上清液和沉淀物进行电泳，检测两者是否含有                      。
3、预期实验结果并得出结论
如果在上清液中检测到暗反应活性，而沉淀物中检测不到暗反应活性，证实            。

下列有关动、植物细胞培养的叙述中，正确的是     

A．利用癌细胞进行动物细胞克隆培养时培养基中要加入防止细胞分化的饲养层细胞

B．B淋巴细胞可通过原代培养持续不断地增殖

C．取单个瘤细胞进行培养，获得细胞群的方法属于克隆培养法

D．长期培养的植物细胞其遗传物质始终不会发生变化

右图图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是

A．利用此过程获得的试管苗一定是纯合子

B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化

C．单倍体植株的培育需经过如图所示过程

D．如果离体组织是植物根尖细胞，因根尖细胞无叶绿体，故不能培养出含叶绿体的植物体

（每空3分，共9分）香蕉原产热带地区，是我国南方重要的经济作物之一。广东省冬季常受强寒潮和霜冻影响，对香蕉生长影响很大。由香蕉束顶病毒（BBTV，单链环状DNA病毒）引起的香蕉束顶病，对香蕉生产的危害十分严重。当前香蕉栽培品种多为三倍体，由于无性繁殖是香蕉繁育的主要方式，缺少遗传变异性，因此利用基因工程等现代科技手段提高其品质水平，具有重要意义。
请根据上述材料，回答下列问题：
（1）简述香蕉大规模快速繁殖技术的过程（可用文字叙述，也可用流程图表示）。
（2）建立可靠的BBTV检测方法可以监控脱毒香蕉苗的质量，请列举两种检测病毒的方法。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　          　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
（３）在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值，如何利用afp基因，通过基因工程技术获得抗寒能力提高的香蕉植株？

(共22分)植物体细胞杂交技术为农业迅猛发展提供了坚实的技术基础与保证。据图回答下列问题：

(1)上述过程依据的遗传学原理是__________，与③过程密切相关的细胞器是__________。
(2)④过程是__________，除了提供水分、矿质元素、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入__________。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气pH等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证__________。
(3)若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功)得到的后代应含__________条染色体，必须用__________处理幼苗，才能得到可育的番茄一马铃薯植株。
(4)若c细胞是能产生单克隆抗体的细胞，则c细胞应是__________细胞和__________细胞的融合。单克隆抗体与常规抗体比较，特点是____________________。
(5)若将该方案用于动物细胞融合，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用处理离体组织细胞使之分散开。

下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是                 。
(2)图甲中②过程常在          诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是           。
(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其                     。
(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？      。原因是              。
(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能(　　)
A．有选择地繁殖某一性别的家畜  B．繁殖家畜中的优良个体
C．用于保存物种                D．改变动物的核基因
(6)在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是(　　)
A．卵细胞大，便于操作                      B．卵细胞含有的营养物质多
C．卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达  D．重组细胞才具有全能性

下面为制备单克隆抗体过程示意图，相关叙述错误的是

A．④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞

B．②中培养基应加入选择性抑制骨髓瘤细胞DNA分子复制的物质

C．上图中有一处明显错误

D．⑤可以无限增殖

基因型为AaBb的水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗。下列相关叙述正确的是         （   ）
A．愈伤组织是花粉细胞通过狨数分裂后形成的不规则的细胞团
B．在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和动物血清等物质
C．试管苗可能出现的基因型有AABB、AAbb、aaBB、aabb
D．为促进花粉细胞分裂生长，需在培养基中加入一定浓度的生长素等植物激素

番茄为自花传粉植物，在20世纪初，科学家用植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育了番茄马铃薯杂种植株（如右图），但目前还没有实现这美妙的设想――地上结番茄果实、地下结马铃薯块茎的植物。

　（1）分别用红、绿荧光染料标记a、b细胞膜上的蛋白质，正在融合的原生质体一半发红色荧光，一半发绿色荧光。杂种细胞上a、b两种颜色的荧光均匀分布，这表明细胞膜具有　　　　　性。图中过程②就是遵守这个原理。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是　　　　　，依据的原理是　　　　　　，其中过程④相当于　　　　　，过程⑤相当于　　　　。
（3）若运用传统有性杂交能否得到杂种植株？　　　　　。这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于　　　  　　　　。
（4）在“番茄――马铃薯”培育过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔遗传规律？
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
（5）如果过程②的a、b细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄多倍体植物的方法是　　　　　　　　　　　。
（6）假如番茄的某两种性状分别由A、a、B、b控制，且两对等位基因不在同一对同源染色体上，那么，AABB个体与aabb个体杂交所得F1，再自交得到F₂，那么F₂中出现AABb个体概率是　　　　　　　。

回答下列有关植物细胞工程的问题。
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。培育无病毒植株时，一般选取___________部位进行组织培养，依据是______________________。该技术可以保持品种的         ，繁殖种苗的速度比传统繁殖方式         。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部         。
（2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 ____________  的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗____  ，而与    ____  配比适宜时可促进芽的增殖。
（4）若番茄细胞（二倍体）内含有A条染色体，马铃薯细胞（四倍体）内含有B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育（假设能成功），得到的后代应含__________条染色体，还必须用___________处理幼苗，才能得到可育的番茄—马铃薯植株，此时体细胞内含有_______染色体组，含_________条染色体。

（改编题）下列关于植物组织培养的表述，错误的是（     ）

A．外植体可以来自于植物的叶肉细胞

B．培养应在无菌无氧条件下进行

C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株

D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同

Ⅰ.研究番茄----马铃薯新植物体的培育，请根据图回答问题：

（1）用番茄和马铃薯的体细胞通过图2的方法得到杂种细胞，该技术实际上是不同植物体细胞的____________________融合的过程。得到的杂种细胞要用图1所示______________的方法进行培育，才能获得番茄—马铃薯杂种新植株。
（2）在图1的②和③所示培养过程中，与①过程相比所不同的必需外界条件是___________；由甲形成试管苗是细胞进行_________________的结果。
（3）图1过程培养得到试管苗所用的培养基，与无土栽培技术所用的营养液在成分上相比较，最大的区别是前者必需要有适宜浓度和一定比例的_______________ 。
（4）培养的杂种植物在形态上表现为双亲特征，其根本原因是__________________________
II.(10分)在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答相关问题：

注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的          有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加          则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（2）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。
实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到     培养基上；（填培养基代号）
②甲组置于____________下培养，乙组置于________下培养，其它条件_________；
③培养一段时间后，__________________________________________________。
预期实验结果和结论：
①______________________________________，则光照有利于愈伤组织的形成；
②______________________________________，则黑暗有利于愈伤组织的形成；
③______________________________________，则光照、黑暗对愈伤组织的形成没有影响。