为验证某种中药牙膏是否像其广告宣传的一样具有较强的抑菌功效，老师带领生物兴趣小组的同学设计了如下实验（符合无菌操作要求）。请分析上述实验过程并回答下列问题：
①用无菌水漱口，向漱口液中加入适量的该中药牙膏；
②配制牛肉膏蛋白胨固体培养基；
③将上述样品接种到培养基上，在适宜条件下进行培养；
④一段时间后，对培养结果进行观察并进行菌落计数。
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、 ；培养基在分装前往往要进行 。
(2)本实验样品接种时最好采用 方法。培养一段时间后，培养基表面长出菌落，每一个标准菌落来源于样品中的 。
(3)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用 培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。
(4)请指出本实验设计中的一个明显的错误： ，请加以改正： 。
(5)如何证明所用培养基已经彻底灭菌？ 。
某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题：
⑴培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了________和_______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________________。
⑵对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___________。
⑶为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于____________中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_________作为对照进行实验。
⑷培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越__________。
⑸细菌培养常用的接种方法有_________________和_____________________。
大肠杆菌是基因工程常用的受体菌。它既可生活在人和动物肠道内，又可随粪便排出污染环境，因而常用作饮水和食物（或药物）的卫生学标准（国家规定，每升饮用水中大肠杆菌数不应超过3个）。请回答下列与大肠杆菌有关的问题：
（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；从生存环境分析推测，它的新陈代谢类型应该是________。
（2）某研究性学习小组对本校自来水进行了检测。一同学用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有________ mL无菌水的试管中，得到101倍稀释的样品；依次稀释，得到102、103倍稀释的样品；把每种稀释度的样品分别接种到3个平板培养基上培养，最后统计菌落数。若3种稀释度的平均菌落数分别为402、30、2，应以_______倍稀释的样品来计算水样中的菌体数；若接种量均为0.1 mL，则该水样中大肠杆菌超标_______万倍。
（3）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
| 成分 |
蛋白胨 |
乳糖 |
蔗糖 |
K2HPO4P |
显色剂 |
琼脂 |
| 含量 |
10.0 g |
5.0 g |
5.0 g |
2.0 g |
0.2 g |
12.0 g |
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。根据用途划分该培养基属于________(选择/鉴别)培养基。该培养基中的碳源是________。
（4）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和______________。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行____________。
（5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________(双选)。
A．制作果酒 B．由果酒制作果醋 C．制作泡菜 D．制作腐乳
（6）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入________。
请回答下列与大肠杆菌有关的问题：
（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于___________；它的同化作用类型是______。
（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
根据用途划分该培养基属于____________培养基（选择、鉴别），该培养基中的碳源是_____________ ，氮源是 。
（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和___________。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行_________________。
（4）现有1L水样，用无菌吸管吸取1mL水样加无菌水稀释103倍。取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为__________________。
（5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。
| A．制作果酒 | B．由果酒制作果醋 | C．制作泡菜 | D．制作腐乳 |
（6）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同
的是，用于组织培养的培养基中还需要加入______________。
（选做题）农村中泡菜的制作方法：将新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦试过的泡菜坛中，泡菜坛一般是两头小中间大的陶器，坛口有坛沿，凡有裂缝的菜坛不能用。然后加入盐水、香料及一些“陈泡菜水”，密封后置于阴凉处，最适环境温度为28℃~32℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，前者是用盐过多，后者是用盐过少。
（1）制作泡菜的生物学原理是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）用白酒擦试泡菜坛的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）菜坛为什么要密封？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，若菜坛有裂缝，可能会出现什么结果？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）若制作的泡菜“咸而不酸”，最可能的原因是什么？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（5）加入一些“陈泡菜水”的作用是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（6）制作泡菜的过程中，有机物的干重如何变化？菜坛内有机物的种类如何变化？
＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
下图为酵母菌细胞的模式图和生长曲线，下表为从其生产酒精的发酵罐中五次取样的结果。请回答：
（1）从细胞的结构来看，下列选项中，与酵母菌属同一类型的生物是（ ）
A．乳酸菌 B．放线菌 C．变形虫 D．噬菌体
（2）欲从细菌中分离出酵母菌，应选择以下哪种培养基（ ）
A．无碳培养基 B．添加抗生素的培养基
C．无氮培养基 D．高浓度食盐的培养基
（3）下列与酵母菌发酵有关的叙述中错误的是（ ）
A．发酵过程中，营养物质可自由通过[4]结构
B．[1]是酵母菌在不良环境下形成的芽孢
C．发酵时，处于稳定期的细胞大量积累各种代谢产物
D．大量合成酒精时，酵母菌的数目不再增长
（4）表中的样品 对应的时期是上图的AB，为缩短AB应选用上图中培养到[ ]
期的酵母菌做菌种，此期对应于表中的样品 。
（5）收获酵母菌代谢产物的时期应选择生长曲线的[ ] 期。为了获得更多的代谢产物，要延长该时期，工业上采用的连续培养方法的具体做法是 。
（6）如果是进行酵母菌单细胞蛋白的生产，则扩大培养条件的控制与酒精发酵最大的不同是 ，在产品的分离提纯时应采取 的方法。
（7）写出酵母菌两种呼吸方式的反应式
。
下表为一种营养液的配方，试根据表中的内容作答：
| 成 分 |
含 量 |
| Ca(NO3)2 |
1g |
| KH2PO4 |
0．25g |
| KCl |
0．12g |
| MgSO4 |
0．30g |
| Fe(NO3)2 |
0．30g |
| Mo等 |
极少 |
| 蒸馏水 |
1 000ml |
（1）若用于植物培养并不断通入氧气，在培养的初期，植物出现萎蔫现象，最可能的原因是 。可采用最简单的有效措施是 ；若培养的初期植物生长正常，一段时间后植物出现萎蔫现象，最可能的原因是
。
（2）此培养液若用于培养微生物，则培养的微生物同化作用类型是 ，培养液中含有的营养物质有 类。
（3）若添加葡萄糖用该培养液培养大肠杆菌。当葡萄糖被耗尽，则大肠杆菌的生长繁殖会受到限制，此时在原本缺乏乳糖的培养基中加入乳糖，可发现大肠杆菌的生长繁殖恢复正常。由此推测分解乳糖的酶属于__ 酶。这种调节方式属于_____________，其意义__ _ ；为检测大肠杆菌的存在与否还应加入琼脂和 ，菌落将呈深紫色并带有金属光泽。
（4）人工控制微生物代谢的措施包括 和 ；若用此培养液培养某种微生物以获得大量次级代谢产物，当发现合成途径中断时可采取一定手段改变 ，促使产物迅速排放到细胞外以解除抑制作用。
在大肠杆菌的乳糖代谢中，若调节基因突变，造成阻抑物缺乏，与乳糖分解代谢有关的酶能合成吗？为什么？若启动子或操纵基因突变，结果如何？
下面是家庭酿造米酒的具体操作过程：
先将米加热至七成熟，待冷却至30 ℃时，加少许水和一定量的“药酒”（实际是酵母菌菌种）与米饭混合后置于一瓷坛内，在米饭中央挖一个小洞，加盖后置于适当地方保温（28 ℃），12小时即可。请从以下几个方面对发酵过程做一简单分析：
（1）先将米煮一煮的目的主要是_______________________________________________。
（2）为什么要冷却至30 ℃后，才可以加入“药酒”？
（3）在中央挖一个小洞的目的是_______________________________________________。
（4）发酵坛并没有完全密封，坛内无氧发酵的环境是如何形成的？
（5）家庭酿酒的关键是保持温度和放“药酒”，如果米的量很多而放的“药酒”太少，常常导致甜米酒因变质而失败。其主要原因是_______________________________________。
（6）家庭自制的米酒，为什么酒精的浓度不高___________________________________。
图为细菌生长曲线，请分析回答：
（1）图中AB段为______期，BC段为______期，CD段为______期，DE段为______期。
（2）大量合成细胞分裂所需的酶和ATP的时期在______期，若扩大再生产选取菌种最好在______期，该期细菌的增长呈______型增长。
（3）从BC段进入CD段的原因有_____________、_____________、_____________等。发酵工业为了获得较多的代谢产品，需延长______期，此时除了要适当补充营养物质外，还应严格控制的条件有_____________、_____________、_____________等。
（4）若在培养中灭菌不严格混入了青霉菌，那么初期出现的生态学现象是_____________，一段时间后发现细菌______，原因是________________________________。
（5）从生存斗争角度考虑，种内斗争最激烈的是______期，形成这一态势的主要生态因素是____________________________________________________。
图为病毒的结构，请回答：
（1）病毒主要由______和______组成，其中［ ］______是病毒的核心。
（2）组成［3］的单位是______，其化学成分是______。
（3）若此病毒为噬菌体，结构中不应有的是［ ］______和［ ］______；当它侵染细菌时，只有［ ］______进入细菌体内。
（4）若此病毒为流感病毒，当它侵入人体后，就成为______，人体的______细胞将消灭它。由于它的抗原决定簇位于［ ］______上，外面有［ ］______包围，所以需要______细胞的______，将内部的抗原决定簇______，才能刺激淋巴细胞形成效应淋巴细胞，发挥免疫作用。
（5）病毒在基因工程中可用作______，但这时的病毒的［ ］______应该含有______基因；在细胞工程中可用作______，这时则利用了病毒的______。
（6）当病毒的［ ］______用35P标记时，在遗传学上可用于证明_________________。
下面是最早发现抗生素——青霉素的弗莱明先生所进行的探索过程。
观察及对问题的认识：培养细菌的培养基中，偶然生出青霉菌，在其周围没有细菌生长。为什么出现这种现象？
假设：
进行实验：把青霉菌放在培养液中培养后，观察这些培养液对细菌生长的影响。
结果：培养液阻止了细菌的生长和繁殖。
结论：青霉菌可产生一种阻止细菌繁殖的物质。
弗莱明在持续的研究中分离出了一种物质，分析出它的特征并将之命名为青霉素。
根据上述探索过程，请回答下列问题：
（1）作为这一实验的假设，下列最为恰当的是______。
A.青霉菌能产生有利于人类的物质
B.青霉菌污染了细菌生长的培养基
C.青霉菌可能产生了有利于细菌繁殖的物质
D.青霉菌可能产生了不利于细菌繁殖的物质
（2）青霉菌和细菌的关系是______。
A.共生 B.竞争 C.捕食 D.寄生
（3）为了证明青霉素确实是由青霉菌产生的而不是在培养液和培养基中产生的，则应进一步设计______实验，其实验方法是________________________________________________。若实验结果为______，则能充分证明青霉菌确实能产生可阻止细菌繁殖的青霉素。
图是三种微生物在不同条件下的生长速率曲线，请据图回答：
（1）甲、乙、丙三条曲线对比说明_______________________________________________。
（2）曲线乙中的B点表示__________________________________；AB段表明__________________________________；BC段表明__________________________________。造成这种现象的原因是____________________________________________。
将10 mL酵母菌液放在适宜的温度下培养，并于不同时间内等量均匀取样4次，分别测定样品中的酵母菌的数量和pH，结果如下表。请分析回答：
| 样品 |
酵母菌的数量（个/立方毫米） |
pH |
| 1 |
1 210 |
4.8 |
| 2 |
820 |
5.4 |
| 3 |
1 210 |
3.7 |
| 4 |
1 000 |
5.0 |
（1）表中样品的取样先后次序为______。
（2）对酵母菌而言，10 mL的该培养液的总数K值为______。
（3）若第5次均匀取样时，样品中的酵母菌数量为760个/立方毫米，产生这一结果的原因是________________________________________________。
解析：本题的命题思想是要求学生学会用实验方法计算并分析种群数量增长的限制因素。
用来治疗糖尿病的胰岛素，过去主要靠从动物体器官、组织中提取，但因受原料限制，无法推广。现在，可以用发酵工程的方法来生产胰岛素。若用大肠杆菌发酵来生产胰岛素，并结合基因工程，写出其生产过程：
(1)构建转入人胰岛素基因的工程菌。
①提取目的基因：用胰岛素基因探针从人的胰岛细胞中获取 ，再用 法制备人的胰岛细胞目的基因。
②目的基因与运载体结合：从大肠杆菌的细胞中提取 ，并用 酶切割质粒，使其露出 。用同一种酶切割目的基因使其产生相同的 ，再将目的基因插人质粒切口处，加入适量的 酶，这样就形成了一个 和 的重组DNA。
③将目的基因导人受体细胞：将大肠杆菌用 处理，以增大 的通透性，让重组DNA进人大肠杆菌体内。
④目的基因的检测和表达：在用一定的方法检测出目的基因已导人大肠杆菌细胞内，并 后，再对该种大肠杆菌扩大培养。
(2)发酵生产。如图为发酵罐，回答：（括号中填数字,如[1]）
①配制适合大肠杆菌的培养基，调整 ，然后对培养基进行 处理并装入发酵罐，将上述大肠杆菌接种于发酵罐发酵
②若经检测若发现放料口排出的旧培养基中微生物细胞形态多样，甚至出现畸形，则此时微生物的生长处于 期，加料口[ ]添加新培养基的速度应该适当 ，并从[ ]以适当速度通入
③若该装置阶段发酵的目的是为扩大培养生产酵母菌菌种，则应尽可能延长 期，采取的主要措施为：加料口放料的速度都 ，通人的无菌空气成分中应 ，搅拌的速度适当
④影响发酵过程中温度变化的因素是
⑤发酵过程中pH变化的原因是
⑥搅拌器搅拌的作用是
(3)发酵完毕后，从培养基中 并 胰岛素，经过一定的加工成为药用胰岛素，经 合格后，可投入使用。
粤公网安备 44130202000953号