微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：
（1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和A：__ __、B:___ __等过程，上述过程中需要在超净工作台上操作的是_______。
（2）纯化菌种时为得到单菌落，常采用的接种方法是平板划线法和D:___ __法，其中需用接种环进行操作的是__________。
（3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌目的，平板内固体培养基应以尿素作为唯一的_ __，培养基中加入_____ ___指示剂培养后，若变红以鉴定其中含有所需细菌。若筛选纤维素分解菌，在选择培养后须进行E:___ _和F:___ ___过程，一般通过观察_____ __的有无挑选出所需菌种。
猪饲料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪由于缺乏有关酶，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。下图为对植酸酶进行不同处理时其活性与温度的关系。
（1）生产中从土壤中筛选出产酶菌株，土壤悬液首先经80℃处理15分钟，其目的是筛选______。
（2）在产酶菌株的筛选过程中，固体培养基中添加不溶于水的植酸钙，植酸钙被植酸酶分解后可以在培养基上产生透明圈，可根据透明圈的__________选择目的菌株。
（3）所得菌株还需要进一步测定植酸酶的活性，活性的测定可以用__________作为底物，活性可用_________表示。
（4）在生产中_________（填“未固定”或“固定化”）植酸酶更适于添加到猪饲料中，使用的最适温度为_____________℃。
下列生物学实验操作，能够顺利达到实验目的的是
| A．在接种酵母菌的新鲜葡萄汁中通人无菌空气制作果酒 |
| B．在固体培养基上涂布稀释的大肠杆菌培养液获得单个菌落 |
| C．将切下的胡萝卜外植体直接接种在培养基上获得愈伤组织 |
| D．将土壤浸出液接种于牛肉膏蛋白胨培养基上筛选分解尿素的细菌 |
常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。请分析回答：
（1）为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该将器皿 。右图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙指示的结构依次是 。
（2）在制作牛肉膏蛋白胨培养基时，要求将称好的牛肉膏连同 一同放入烧杯，加入少量的水，加热。
（3）用高压灭菌锅灭菌后的培养基，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你可以用 办法来估计培养基的此温度。
（4）取从自然界中采集的葡萄，然后在超净台上将葡萄置于0．1% 水溶液中进行表面消毒5min，再用 将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后进行纯化培养。下图甲是经上述纯化培养的结果，在培养基上接种时划线的顺序是依次是 。（用编号表示）。研究者在经过甲接种后得到了一个经培养后菌落分布如图乙所示的平板，推测接种时可能的操作失误是 。
（5）下表为某学生在筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时所配置的培养基配方，请指出其中的明显不足之处 。
| K2HP04 |
FeS04 |
MgS04．7H20 |
NaNO3 |
KCl |
蔗糖 |
木糖 |
琼脂 |
蒸馏水 |
| 0．1g |
0．001g |
0．05g |
0．3g |
0．05g |
3．0g |
3．0g |
2．og |
100ml |
（6）再将目的基因连接到具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因的质粒上，并将所得的重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。
（7）将经上述流程培养获得的转基因酿酒酵母接种在含葡萄糖和木糖的培养基中进行酒精发酵能力测试。随着发酵的进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能 ，即说明所需菌株培育成功。
下列有关微生物实验室培养的叙述,正确的是（ ）
| A．在熔化琼脂时,需要控制火力并不断搅拌,以免发生焦糊 |
| B．灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术 |
| C．样品中活菌数量统计时,接种方法应采用划线法 |
| D．用平板培养基培养微生物时,应将平板倒过来放置 |
人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:
（1）下列操作必需在严格无菌条件下进行的是 。
A．称量牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分
B．利用平板划线法接种细菌
C．用酒精擦拭双手
D．溶化牛肉膏蛋白胨培养基的各种成分
（2）按功能分，筛选该菌株时所用的培养基称为 ；该培养基中必须添加的成分有 （多选）等。
A．琼脂 B．葡萄糖 C．硝酸铵 D．纤维素
（3）此菌株在培养过程中能被利福平抑制，下列微生物中也能被利福平抑制的一组是（ ）（多选）
A．支原体
B．手口足病毒
C．自生固氮菌
D．小球藻
E．根霉
F．硝化细菌
G．产甲烷菌
（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的 有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是 (填图中序号)。
（5）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵,理由是 。
下列对微生物描述正确的是（ ）
| A．某种微生物传染病的易感人群人数越多群体免疫力越强 |
| B．黄曲霉可以在不含碳源的培养基上生长 |
| C．硝化细菌可以在无氮培养基中生长 |
| D．大肠杆菌可以在未灭菌的牛肉膏蛋白胨培养基上生长 |
一位同学要探究土壤微生物能否分解农药，并尽快得出实验结论，用“敌草隆”（一种除草剂）进行实验：取等量砂土分装于相同的两个容器中，a组高压灭菌，b组不灭菌。下列有关事项的叙述中正确的是（ ）
| A．向a、b中喷入等量的“敌草隆”，再置于同一恒温箱中培养相同时间 |
| B．检测“敌草隆”的消失情况，预计a的“敌草隆”全部消失，b的基本不变 |
| C．只用砂土实验效果比用几种典型土壤混合后的好 |
| D．再增加c组作为对照，不喷入“敌草隆”，其他处理与a、b组相同 |
请阅读下列材料并回答有关问题：
猪饲料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中，猪由于缺乏有关酶，造成磷源浪费，而且植酸随粪便排出后易造成环境有机磷污染。下图为对植酸酶进行不同处理时其活性与温度的关系。
（1）生产中从土壤中筛选出产酶菌株，土壤悬液首先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出______。
（2）在产酶菌株的筛选过程中，固体培养基中的添加不溶于水的植酸钙，植酸钙被植酸酶分解后可以培养上产生透明圈，可根据透明圈的____________选择目的菌株。
（3）所得菌株还需要进一步测定植酸酶的活性，活性的测定可以用_____________作为底物，活性可用_____________表示。
（4）在生产中____________________（填“未固定”或“固定化”）植酸酶更适于添加到猪饲料中，使用的最适温度为_____________℃。
乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：
（1）筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用 作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是 。从功能上讲，这种培养基属于 。
（2）培养微生物L前，宜采用 方法对接种环进行灭菌。
（3）纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越 ．
（4）乳糖酶宜采用化学结合法（共价键结合法）进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的 确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括 、 、离子吸附法及交联法等。
【生物——选修1 生物技术实践】有些科学家欲从污染的土壤中分离筛选出能够高效降解原油的菌株进行大规模培养并应用。请回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。筛选过程中，虽然土壤中微生物含量非常丰富，但在此培养基上长出的微生物菌落非常少，甚至有时一个培养皿中一个菌落都没有，这是因为 。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。
请回答下列有关微生物培养和分离的问题。
（1）筛选石油分解菌一般要经过如下的步骤：海水取样→______→梯度稀释→将样品涂布到培养基上→挑选菌落，其中第二步的目的是______。
（2）培养微生物时，获得纯洁培养物的关键是_________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________附近进行。采用固体平板培养细菌时，为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿____培养。
（3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采用临时保藏的方法，但这种方法有两个缺点：__________________；_________________。
（4）做完实验将培养基倒掉之前，一定要进行______处理。
（5）现有5种酵母菌的营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序， 于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示。
根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是________________。
甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）
| |
粉状硫 10g |
K2HPO4 4g |
FeS04 0．5g |
蔗糖 10g |
（NH4）2SO 0．4g |
H20 100ml |
MgS04 9．25g |
CaCl2 0．5g |
| I |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
| Ⅱ |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
| Ⅲ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
A．甲、乙、丙都是异养微生物
B．甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物
C．甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物
D．甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
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