请回答与转基因小鼠的培育过程相关的问题。
（1）获取外源基因常用的工具酶是 ，若需在短时间内获得大量的某种外源基因，通常采用 技术。
（2）在供体雌鼠发情周期的某一阶段，用一激素处理促使卵巢里大量卵泡成熟并排出，称为超数排卵。在让供体母鼠与健康公鼠交配的同时，让代孕母鼠与结扎公鼠进行交配，使代孕母鼠与供体母鼠的生理条件达到同步或者一致，称为 处理。
（3）将基因表达载体导入受精卵常用的方法是 。
（4）将注射有外源DNA的受精卵移人发育培养液中继续培养至桑椹胚或 ，再进行胚胎移植。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和 。
（5）待代孕母鼠产出幼仔后，取幼鼠尾巴细胞提取基因组DNA，可用 法等分析以确定是否为转基因鼠。
豇豆对多种害虫具有抵抗能力，根本原因是豇豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因(CpTⅠ基因)。科学家将其转移到水稻体内后，却发现效果不理想，主要原因是CpTⅠ蛋白质的积累量不足。在体外对CpTⅠ基因进行修饰后， CpTⅠ蛋白质在水稻中的积累量得到了提高。修饰和表达过程如图所示：
请根据以上材料，回答下列问题：
(1)CpTⅠ基因是该基因工程中的________基因，“信号肽”序列及“内质网滞留信号”序列之所以能修饰到CpTⅠ上，是由于基本组成单位是____________，在①过程中，要使用________酶切开，暴露出________，再用________酶连接。
(2)在该基因工程中，供体是________，受体是____________。
(3)②过程称为________。
(4)检测修饰后的CpTⅠ基因是否表达的最好方法是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有________和________。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
AATTC……G
G……CTTAA
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是____________________________________
________________________________________________________________________。
(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板是________，产物是________。若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。
(5)基因工程中除质粒外，________________和________________也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是________________________。
下图是某种类似动物蛋白质工程的示意图，请分析回答：
(1)目前蛋白质工程中难度最大的是图中编号________所示过程。
(2)实现③过程所依据的原理是______________________，属于哪种获取目的基因的方法：________。
(3)经过④过程得到目的基因，所采取的手段与基因突变相比最大的特点是______________________________________________________________________________。
(4)⑤过程中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是________________，进行⑤过程的目的是_________________________________________________________________。
加拿大科学家通过转基因山羊已经生产出重组的人类丁酰胆碱酯酶，该酶可用于对抗生化武器。下图是转基因山羊的培育过程示意图，请据图回答问题（山羊为二倍体）：
（1）在上述操作中，目的基因是 基因，将该基因导入受体细胞常用的方法是 法。
（2）胚胎工程是指对动物的早期胚胎或 所进行的多种显微操作和处理技术。图中过程⑦所涉及的胚胎工程技术是 。
（3）从雌性山羊卵巢内获取的卵母细胞需要培养到 期才能完成受精作用，为了获得更多的卵母细胞，往往需要向雌性山羊体内注入 激素。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和 。
（4）要同时获得多只与此转基因山羊遗传物质相同的小羊，可对囊胚进行 。
根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有 。
(2)质粒运载体用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如右方所示：AATTC……G G……CTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。
(3)按来源分，基因工程使用的DNA连接酶有两类，即 。
(4)反转录作用的模板是 ，产物是 。若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术。
(5)基因工程中除质粒外， 也可作为运载体。
人的血清白蛋白（HSA）有许多作用，如对血液中的免疫球蛋白（抗体）有保护和稳定的作用．如果免疫球蛋白缺少了这种保护，免疫力就会变得不稳定，容易引起各种疾病，所以在临床上需求量很大．白蛋白通常从人血中提取，产量受到限制．如果应用基因工程、克隆等技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白就成为可能．如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解，请根据图解回答下列问题：
（1）图中①一般经 处理可以得到③．将②导入③最为有效的方法是 ．导入前，需要将②与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤是基因工程的核心，称为 ．
（2）通过核移植技术能够得到胚胎④，精、卵在体外受精时也能得到早期胚胎．在体外受精过程中防止多精入卵的生理反应主要包括 反应和
反应．
（3）若需要迅速得到大量转基因奶牛，可采用下列处理方法：将早期胚胎④处理后形成若干个胚胎⑤，此种方法称 ．进行上述操作时，应选择发育至 或囊胚阶段的胚胎进行操作，对后者操作时必须注意将 ．
基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如右图所示，请据图回答：
（1）甲是 ，完成图中剪接过程需要 酶的作用。
（2）在上述过程中，遵循碱基互补原则的步骤有： 。（用图解中字母表示）
（3）不同种生物之间的基因能拼接成功，从分子结构角度分析是因为： ，目的基因在不同的生物细胞中能正确表达，说明了不同生物共用 。
（4）研究发现，番茄体内有一种酶可以抑制害虫的消化功能，现科学家已成功的分离出这种基因并导入到玉米的体细胞中，培育出了具有与番茄相似抗虫性状的玉米植株，在此过程中使用了哪些现代生物科技手段？ ，而玉米这种变异的来源属于 (基因突变,基因重组,染色体变异)。
（5）在培育转基因植物时，我国科学家发明了一种“花粉管通道法”， 就是利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道，将DNA分子注入胚囊中，此过程相当于基因工程操作中的 步骤。若把目的基因导入该植物的叶绿体DNA中，则其产生的配子中 （填“一定”或“不一定”）含有该基因。
利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因的启动子、________________、______________、_______________和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是___________法，为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是____________。
生物学家用基因工程构建的某“工程菌”，经发酵可生产人生长激素。下图是用大肠杆菌构建的“工程菌”的生长曲线（甲）和生长速率变化曲线（乙）。请回答下列问题：
（1）构建该“工程菌”所依据的变异来源是 ，与人体细胞结构相比，它的主要结构特点是无 ；与人体细胞内的生长激素基因相比，该“工程菌”细胞内的人生长激素基因不含 。
（2）生物学家配制了一种适合培养大肠杆菌的培养基，经分析发现，尿素是唯一氮源，这种培养基从用途来看，属于 培养基。
（3）甲曲线的b时期是 ，在这一时期的后段，大肠杆菌死亡率 繁殖率（填大于、等于或小于）。
（4）大肠杆菌产生的人生长激素在乙曲线的 （填字母）时期大量积累，属于 代谢产物，合成它的细胞结构是 。
（5）在工业发酵上常以一定的速度不断添加新的培养基，同时又以同样的速度放出老的培养基，保证微生物对营养物质的需求。在生产上，这种方法 （填延长或缩短）了甲曲线的C时期，提高了发酵设备利用率，但更新培养基的速率过快会使活菌数大量减少，可能的原因是 。在研究中， （填能或不能）用此法培养来测定细菌生长曲线所需的相关数据。
资料显示，近10年来，PCR技术（DNA聚合酶链反应技术）成为分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制（如下图），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答：
（1）加热至94℃的目的是使DNA样品的 键断裂，这一过程在生物体细胞内是
通过 的作用来完成的。通过生化分析得出新合成的DNA分子中，A=T、G=C这个事实说明DNA分子的合成遵循 。
（2）通过PCR技术使DNA分子大量复制时，若将一个用15N标记的模板DNA分子(第一代)放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制到第5代时，含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为 。
（3）PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可用PCR技术扩增他血液中的（ ）
| A．白细胞DNA | B．病毒蛋白质 | C．血浆蛋白 | D．病毒核酸 |
下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）①过程如果使用人的肝细胞，则不能成功，原因是
（2）过程②必需的酶是 酶，过程④必需的酶是 酶。
（3）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生 ，再加入 ，才可形成C。
（4）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。
基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的，并有赖于微生物学理论和技术的发展运用。基因工程基本操作流程如下图所示，请据图回答：
（1）质粒可存在于细菌细胞内，它的化学本质是 ，标记基因的作用是 ，图中A是 ；在基因工程中，需要在 酶的作用下才能完成剪接过程。
（2）在上图基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤有 。（用图中序号表示）。
（3）研究中发现，番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑制作用，导致害虫无法消化食物而被杀死，人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内，玉米获得了与番茄相似的抗虫性状，玉米这种变异的来源是 。
（4）科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上，经培养长成的植株具备了抗病性，这说明 。如果把该基因导入叶绿体DNA中，将来产生的配子中
(填“一定”或“不一定”)含有抗病基因
在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因A控制合成的抗冻蛋白A有较好的应用价值，通过转基因技术获得抗寒能力提高的植株。回答有关问题：
（1）从深海鱼提取和纯化DNA时，选择NaCl溶液的合适浓度，利用DNA和其它杂质在不同NaCl溶液中 的特性，达到分离目的，加入一定量 可以进一步获得含杂质较少的DNA。
（2）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生 末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生 黏性末端的限制酶。
（3）为了检测A基因转录的mRNA是否翻译成抗冻蛋白A，需从转基因生物提取 ，用相应的抗体进行 。
（4）若要用动物细胞工程技术，制备抗A抗体的杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中，再加入 诱导细胞融合。细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有 ，体系中出现多种类型细胞的原因是 。
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗生产和抗体制备的流程如下图：
（1）过程①代表的是_______，过程③构建A基因重组载体时，必须使用的工具酶是______________。
（2）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用____________和____________。
（3）过程⑦的实验技术名称是____________，该过程特有的诱导方法是____________。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_______来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的_______与分离出的病毒进行特异性检测。
粤公网安备 44130202000953号
