通过胚胎工程建立的转基因动物模型，常用于基因表达调控的研究、良种动物的筛选以及基因药物的生产等。制备转基因鼠的流程如图所示：
（1）体外受精时，人工采集的动物精子必须经过____________处理才能完成图示中的①过程，完成②过程常采用的方法是______________________。
（2）④过程中，为维持培养液pH的相对稳定，必须将培养瓶放置在__________中进行培养，培养过程中用______________酶处理才能获得单个细胞。
（3）图示中甲为____________________时期的去核卵母细胞，⑤过程操作技术叫做_________。
（4）在上述转基因鼠的培养过程中，所用到的主要胚胎工程技术有体外受精、早期胚胎培养和_____________。
（5）转基因鼠只携带一个B基因，常采用___________的方法培育出基因型为BB的个体。
PCR是聚合酶链式反应的缩写，利用PCR技术可对目的基因进行扩增。请根据下面PCR反应原理示意图回答有关问题：
（1）PCR的原理是 。
（2）PCR技术扩增DNA，需要的条件有：
① ② ③ ④ ⑤ ⑥Mg2+ ⑦缓冲液
（3）PCR技术使DNA解链是通过 实现的，而不需要 酶。 DNA的这种解链现象称为DNA的 ，在一定的条件下是 （填写“可逆的”或“不可逆的”）
（4）DNA解链后冷却的目的是让 与 相结合。
（5）当温度加热至70―75 ℃时，是 酶把 脱氧核苷酸，通过 键连接到引物上。如此逐渐延伸形成互补链，进而使目的基因加倍。这一点体现了该酶与DNA连接酶的不同。
（6）通过重复循环（3）、（4）、（5）过程，使目的基因以 形式扩增。
甲、乙为某种二倍体植物的2个植株，其体细胞中2对同源染色体（Ⅰ和Ⅱ）及相关基因分别见图甲和图乙，其中图乙表示变异情况。减数分裂时，染色体联会过程均不发生交叉互换。A和B是显性基因，A和a分别控制高茎和矮茎；B和b分别控制红花和白花。
（1）若甲植株进行自交产生的子代为N。N的矮茎红花个体中纯合子占 ；若N的全部高茎红花植株自由交配，其子代中矮茎白花个体占 。
（2）乙植株发生了的变异类型是 ；发生该变异时，基因的碱基序列 。
（3）如果乙植株产生配子时，具有同源区段的染色体都可以正常进行联会，该植株产生的配子类型共有 种。
（4）为检测某植物体是否含有A基因， 要以 作为探针，与从该植物提取出来的 进行 。
单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为，镰刀型细胞贫血症患者的基因型为
。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。
（1）从图中可见，该基因突变是由于引起的。巧合的是，这个位点的突变使得原来正常基因的限制酶切割位点丢失。正常基因该区域上有3个酶切点，突变基因上只有2个酶切点，经限制酶切割后，凝胶电泳分离酶片段，与探针杂交后可显示出不同的带谱，正常基因显示条，突变基因显示条。
（2）分子探针要用等标记。利用核酸分子杂交原理，根据图中突变基因的核苷酸序列（--
--），写出作为探针的核糖核苷酸序列。
（3）根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠有胎儿Ⅱ-1～Ⅱ－４中基因型个体是，
的个体是，
的个体是。
在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组导入Ti 质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。
（1）基因工程是指在体外通过人工＿＿＿＿和“拼接”等方法，对生物的基因进行＿＿＿＿和重新组合，然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达，产生人类所需的基因产物的技术。该技术又称为＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）科学家在进行上述基因操作时，要用同一种＿＿＿＿分别切割质粒和目的基因，质粒和目的基因的黏性末端就可通过＿＿＿＿＿＿＿＿原则而黏合。
（3）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的＿＿＿＿，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答： 
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶________、_____________，对_____________________、_____________进行切割。
（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有________________，作为标记基因。
（3）香蕉组织细胞具有___________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的__________、__________。
枯草杆菌产生的蛋白酶具有催化分解蛋白质的活性,但极易被氧化而失活。1985年，美国的埃斯特尔将枯草杆菌蛋白酶分子中的第222位氨基酸替换后，虽然水解活性有所下降，但抗氧化能力大大提高。用这种水解酶作为洗涤剂添加剂，可以有效去除血渍、奶渍等蛋白质污渍。请根据材料回答下列问题：
（1）改造枯草杆菌蛋白酶的生物技术是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（2）改造后的枯草杆菌中的控制合成蛋白酶的基因与原基因对比，至少有＿＿＿＿个碱基对发生了变化。
（3）利用生物技术改造蛋白质，提高了蛋白质的＿＿＿＿性，埃斯特尔所做的工作，是对已知蛋白质进行＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）定点诱变技术是蛋白质结构改造中的＿＿＿＿。
在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答：
（1）A过程需要的酶有 、 。
（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是：__________________、 。
（3）构建重组质粒，除有目的基因、标记基因外，还必须有_________和_________。其化学结构都是一段有特殊结构的____________ 。
（4）培养基中除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________进行筛选。
（5）抗虫基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是： 。
（6）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用 标记的 作为探针。
【生物----选修3：现代生物科技专题】
抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程。回答问题：
（1）过程①是 ，该过程常用的方法是 。
扩增抗凝血酶 Ⅲ蛋白基因经常采用 技术。
（2）过程②包括 技术和胚胎移植技术；可用 技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊。
（3）若要检测牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用 技术。
（4）如果检测发现抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被导入了受精卵，但却没有检测到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那应该考虑分别位于目的基因首端和末端的 没有设计好，应从这方面考虑改善。
糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物（如猪、牛）中获得。自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产，其操作的基本过程如图所示。
（1）图中基因工程的基本过程可概括为“五步曲” ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(2)图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作＿＿＿＿，从其分子结构可确定它是一种＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(3)根据碱基互补配对的规律，在＿＿＿＿＿＿＿＿酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来(即重组)，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，则b段与c段分别是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(4)细菌进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为＿＿＿＿。目的基因通过活动(即表达)后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素。这是因为基因具有控制＿＿＿＿合成的功能，它的过程包括＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
据调查，随着化学农药的产量和品种逐年增多，害虫的抗药性也不断增强，造成的危害很严重，如近年来，棉铃虫在我国大面积暴发成灾，造成严重经济损失。针对这种情况，经研究发现寄生在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白，它能使寄主至死而对人畜无害。我国科技工作者已成功地将该毒蛋白基因导入棉花植株体内并实现表达。由于棉铃虫吃了这种“转基因抗虫棉”就会死亡，所以该种棉被推广后，收到了很好的经济效益。
请据以上材料，回答下列问题：
⑴害虫抗药性的增强是__________________________的结果。
⑵抗虫棉的具体培育过程包括 、 、
、 。
（3）该项技术的遗传学原理是 （ ）
| A．基因突变 | B．基因重组 | C．基因复制 | D．基因分离 |
（4）利用下面技术可获得抗虫基因。如：从苏云金芽孢杆菌核糖体上分离出 ，
并以此为模板， 成互补的单链DNA，然后单链DNA在酶的作用下合成 。
（5）要使抗虫基因与质粒结合，必须用 来切割基因载体和目的基因，切割后的质粒与目的基因片段还需要 酶，根据 原则使两者粘合在一起。
（6）抗虫棉之所以能抗虫，是因为棉花细胞中的抗虫基因表达出 。
（7）该科技成果在环保上的重要作用是 ___________________________________________。
生物技术就像一把双刃剑，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来灾难。例如用克隆技术制造出克隆人，用转基因技术制造生物武器等。面对生物技术可能产生的负面影响，公众不可避免地产生了疑虑。近年来，生物技术引发的社会争论涉及面越来越广。
（1）目前我国是种植转基因作物较多的国家之一，关于转基因生物的安全性的争论也越来越多，转基因生物的安全性主要涉及到 、 、 等方面。
（2）“试管婴儿”技术诞生后，继而出现了“设计试管婴儿技术”，二者在技术手段上的区别是 。
(3)若克隆人则需要用到下列哪些技术？ 。（填序号）
①体外培养 ②体外受精 ③胚胎移植 ④核移植
（每空1分，共8分）干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血只能提取0.05微克，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚的基因公司用如下图所示的方式生产干扰素，试分析原理和优点。
(1)从人的淋巴细胞中提取___________。使它与细菌质粒相结合，然后移植到酵母菌体内，让酵母菌________________。
(2)酵母菌能用出芽生殖方式繁殖，速度很快，能大量生产_____，不但提高了产量，也降低了成本。
(3)中国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因移植到烟草的 上，使烟草得到了抗病毒的能力。
试分析:
①人的基因所以能接到植物体内去，物质基础是_____________。
②烟草有了抗病能力，这表明烟草体内产生了_______________。这个事实说明:人和植物共有一套______________，蛋白质合成的方式__________________。
降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，将人工合成降钙素的DNA与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。据图回答：
（1）图1示人工合成降钙素DNA的过程。从预期新型降钙素的 出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA。从功能看，Klenow酶是一种___________酶，合成的双链DNA有________个碱基对。
（2）图2示利用基因工程获得产品的过程。获取目的基因的方法除图2显示的方法外还有 。
（3）对图2中a点的操作时，需要的酶有 和 。
（4）目的基因插人质粒后，不能影响质粒的
（5）将基因表达载体导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理，使之成为 的细菌。
（6）上述制备新型降钙素，运用的现代生物工程技术是 。
请回答有关下图的问题：
（1）图中①～⑤所示的生物工程为 。该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过对 的修饰或合成，对现有的蛋白质进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生活的需求。
（2）若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质中获取的mRNA，则④过程包括 、 .
（3）若大量扩增目的基因，则用的是PCR扩增技术，该过程需要的聚合酶的特点是 。
（4）若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，在基因的首端必须有 ；且在图中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体 的精子。
（5）体外受精过程中，若要采集牛的卵母细胞，采用的主要方法是
。
（6）为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对 动物做 处理。
（7）为了提高牛胚胎的利用率，可在进行⑩过程之前进行_______________。处理的时期是
________ 或囊胚期，在对囊胚期的胚胎进行处理时，要注意将 ，否则会影响 。囊胚内细胞团分离出的胚胎干细胞形态特征是 。
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