(8分)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图( ampr为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。
（1）将图中①的DNA用HindⅢ、Bam HⅠ完全酶切后，反应管中有____种DNA片段。（2）图中②表示HindⅢ与Bam HⅠ酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得________种重组质粒；如果换用BstⅠ与BamHⅠ酶切，目的基因与质粒连接后可获得 _________种重组质粒。
（3）图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T－DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中___对T－DNA的降解。
（4）Bt毒素蛋白基因最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做 。
（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结
合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死
亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞__________。
（6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群
中的________________基因频率的增长速率。
（7）若杀虫基因是根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于
______________工程技术范畴。
目前，转基因技术已应用于农业，转基因食品已近在咫尺，甚至已上了我们的餐桌。有一种芽孢杆菌能产生毒素杀死玉米的害虫螟蛾，科学家将这一控制毒素合成的基因（BT基因）导入玉米体内，培育出了具有抗虫能力的玉米——BT转基因玉米。英国权威科学杂志《自然》1999年5月发表了一篇令人震惊的论文，文中说，研究人员将“BT转基因玉米”的花粉撒在苦莴苣菜叶上，然后让蝴蝶幼虫啃食这些菜叶，4天之后，有44%的幼虫死亡；而另一组幼虫啃食撒有普通玉米花粉的菜叶，基本没有出现死亡。请分析上述材料后回答问题。
（1）培育转基因农作物过程中，进行基因操作的基本步骤有：
、 、 、 。
（2）蝴蝶幼虫啃食撒有BT转基因玉米花粉的菜叶造成死亡的原因是是 。
（3）我国相关机构已经明确要求，凡是由转基因农作物生产的产品在其包装上必须加明确标注是转基因产品，并说明此产品是否含有转基因成分。这里讲的“转基因成分”是指 。
【生物～选修3现代生物科技专题】 下图表示科学家通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。请据图回答下列有关问题：
（1）图中科学家在进行①操作时，要使用 酶。
（2）在获得目的基因的过程中，PCR技术相当重要。PCR扩增反应需要在一定的缓冲溶液中加入DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种 、四种脱氧核苷酸和 的DNA聚合酶。
（3）图中的Ⅱ是 ，II由目的基因、 组成。
（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是 ，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得的，除此之外，还有 。
（5）图中的Ⅲ是导入了目的基因的受体细胞，经植物组织培养获得一株棉花，这株棉花是否具有抗虫特性可进行 水平的鉴定。
据图回答下列问题：
(1)图中①~⑤所示的是生物工程为_________________。
(2)基因表达载体中的_______________是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将 含有目的基因的细胞筛选出来。在上述过程中，不能将目的基因直接导人受精卵中的原因是_______________，⑤过程中只用同一种限制酶切割含目的基因的DNA片段和运载体，将会___________________（任答一点）。
(3)若想预期蛋白质通过乳腺反应器生产，则在图中⑨过程之前要对精子进行筛选，保留含性染色体为____________的精子。在⑧、⑨过程中为避免多精入卵的两道屏障依次是________、____________。判断是否受精的标志是______________________。牛的早期胚胎发育有卵裂、______、_______、原肠胚等几个阶段。
棉铃虫是一种严重危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法，我国已将蛋白基因转入棉花植株并成功表达。由于棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡，所以该棉花新品种在1998年推广后，已取得了很好的经济效益。请根据上述材料回答下列问题：
(1)利用苏云金杆菌防治棉铃虫属于生物防治，它突出的优点是___________________。
(2)转基因棉花的抗虫变异来源，属于可遗传变异类型中的_________________。
(3)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_____，此工具主要存在于微生物中，其特点 。
(4)苏云金芽孢杆菌一个DNA分子上有许多基因，获得抗虫基因常采用的方法是“鸟枪法”。具体做法是：用__________酶将苏云金芽孢杆菌的________切成许多片段，然后将这些片段分别载入运载体，再通过运载体转入不同的受体细胞，让它们在各个受体细胞中大量
__________，从中找出含有目的基因的细胞，再用一定的方法把带有___________的DNA片段分离出来。
(5)进行基因操作一般要经过的四个步骤是_________________________、________________________、_______________________、_______________________。
基因克隆是对分离出来的目的基因进行大量扩增的过程。经过基因克隆，可以生产出大量的目的基因或在基因表达时获得大量的蛋白质。细菌质粒是基因克隆的合适载体，经研究发现，某些细菌质粒中含有两个抗生素抗性基因——氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，而且，在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列。
下图表示利用质粒进行基因克隆的过程，其中A-D表示物质，I和II表示抗性基因，①—⑦表示过程，其它数字表示菌落，据图回答下列问题。
（1）写出下列字母和编号的名称：A： ▲ ； II： ▲ 。
（2）将A和B形成D所需的酶是 ▲ 。⑤过程中为提高成功率，常用 ▲ 溶液处理大肠杆菌。
（3）为筛选含有物质A的细菌，需进行细菌培养，先在培养基（一）中只加入氨苄青霉素，一段时间后，培养基上长出的细菌菌落具有 ▲ 特性。然后，用灭菌绒布从培养基（一）中蘸取菌种，再按到只含四环素的培养基（二）中培养。根据培养基（一）和（二）上的细菌生长情况，可以判断图中菌落 ▲ （填数字）即为筛选出的含有物质A的细菌，原因是 ▲ 。
为了快速培育抗某种除草剂的水稻，育种工作者综合应用了多种育种方法，过程如下。请回答下列问题：
（1）从对该种除草剂敏感的二倍体水稻植株上取花药离体培养，诱导成 幼苗。
（2）用
射线照射上述幼苗，目的是 ；然后用该除草剂喷洒其幼叶，结果大部分叶片变黄，仅有个别幼叶的小片组织保持绿色，表明这部分组织具有 。
（3）取该部分绿色组织再进行组织培养，诱导植株再生后，用秋水仙素处理幼苗，使染色体 ，获得纯合 ，移栽到大田后，在苗期喷洒该除草剂鉴定其抗性。
瑞士科学家培育出的一种富含β胡萝卜素的水稻新品种——“黄金水稻”，有望结束发展中国家人口维生素A摄入量不足的状况(注：β胡萝卜素是形成维生素A的基础材料，维生素A缺乏是导致发展中国家千百万儿童失明和罹患其他疾病的常见原因)。如图表示这一技术的基本过程，请据图回答有关问题：
(1)“剪切”所使用的酶是________，“剪切”结果使DNA分子片段产生了________。“插入”过程中使用的酶有____________________________；“表达”的过程包括____________和______________。
(2)在“黄金水稻”培育过程中，能确定“β胡萝卜素合成基因”已成功导入水稻体内的简便方法是________________________。
(3)通过这一技术培育的水稻称为“黄金水稻”，名称中“黄金”可能与________________有关。
(4)请再举出两例转基因植物：__________________________________________
下图为科学家通过基因工程方法培育转基因抗虫棉的大致过程。请据图分析回答：
（1）图中①过程需要的酶有 和
（2）图中A的组成，除了目的基因外，还必须有 、 、 和复制原点。
（3）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA具有 的特点。图中②过程的方法称为 。如果受体细胞是动物细胞，则图中②过程的方法称为 。
（4）受体细胞的DNA上是否插入了目的基因是目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键，检测方法是 。如果要检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质，方法是 。
干扰素在人体中是由免疫细胞合成并分泌的一种糖蛋白，几乎能抵御所有病毒引起的感染。传统生产方法成本高，产量低，获得的干扰素在体外不易保存。利用基因工程手段可以解决这些问题，请回答相关问题。
（1）从健康人体外周静脉血分离能合成干扰素的免疫细胞，从中提取 ，经反转录获取目的基因，此过程需要的原料是 。
（2）若选择大肠杆菌作为受体细胞，常用的转化方法使用 处理，使其成为 ，一定温度作用下完成转化。
（3）在培养液中培养一段时间后，离心后取菌体，经进一步处理获得产物，进行产物鉴定时可采用 技术。
以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。
（1）获得目的基因的方法通常包括 和 。
（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 和 。
（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ，后者的形状呈 。
（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。
（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和 序列上是 V相同的。
生物工程技术为人们获得需要的生物新品种或新产品提供了便利。请据图回答下列问题：
(1)在培育转人生长激素基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是 ，
②过程常用的方法是________。③过程培养到 阶段，可以采用________技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
(2)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞采用愈伤组织细胞与采用叶肉细胞相比较， 其优点是________________，⑤过程采用的技术是 ，该技术中，愈伤组织细胞可通过在液体培养基中形成单个胚性细胞，利用胚性细胞再分化形成的_____________可制成人工种子或发育成植株。但连续传代培养后，胚性细胞全性可能降低，从细胞内部看，_____________ 等变化。
科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是 。
（2）经过①和②步骤后，有些质粒上的 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。
（3）步骤③是 的过程。
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 。
（5）步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） 上。
农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题：
⑴要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用 进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为 ，则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是 。
⑵基因的“针线”是 。切割完成并连接后得到的DNA分子称为 。
⑶该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是
| A．淀粉 | B．脂肪 | C．蛋白质 | D．核酸 |
材料：玉米的光合效率较水稻的高，这与玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）有很大的关系。如何将玉米的这一种酶转移到水稻等植物上一直是植物生物学家的研究课 题之一。但实践证明，常规杂交育种手段很难如愿以偿。最近，有人利用土壤农杆菌介导法，将完整的玉米PEPC基因导入到了水稻的基因组中，为快速改良水稻的光合作用效率，提高粮食作物产量开辟了新途径。
（１）玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交的原因是 。
（２）获得PEPC基因后，将其导入土壤农杆菌的质粒中，以获得重组质粒，需要的工具酶
是 和 。
（３）玉米PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是 ，该过程包括 和 两个阶段。
（４）该技术定向改变了水稻的性状，这在可遗传变异的来源中属于___ _____。
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