有关PCR技术的说法，不正确的是（ ）
| A．PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术 |
| B．PCR技术的原理是DNA双链复制 |
| C．利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列 |
| D．PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA |
质粒是基因工程中最常用的载体，它存在于许多细菌体内。质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，下表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供的细菌生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点，正确的一组是（ ）
| A．①是c；②是b；③是a | B．①是a和b；②是a；③是b |
| C．①是a和b；②是b；③是a | D．①是c；②是a；③是b |
下图是绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程，请据图回答下列问题。
(1)A过程需要用限制酶切割水母细胞的DNA，不同的限制酶切割后产生的DNA片段末端通常有两种形式：________和________．
(2)C过程需要利用动物细胞培养技术以获得大量的成纤维细胞，其培养过程可经过原代培养和传代培养，但是目前冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，这是为了_____ _。
(3)过程F的技术名称是________。
(4)E过程可从屠宰场已屠宰母畜的卵巢采集________，并在体外培养到________期。
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答下面的问题。
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_______(填字母代号)。
A．启动子 B．tetR
C．复制原点 D．ampR
(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。
A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化
C．显微注射 D．细胞融合
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析
C．抗原—抗体杂交 D．PCR
在基因工程中，若受体细胞是细菌，则用来处理该细菌以增强细胞壁通透性的化学试剂是( )。
| A．氯化钠 | B．聚乙二醇 | C．氯化钙 | D．二苯胺 |
一个双链DNA经一限制酶切割一次形成的黏性末端个数为( )。
| A．1 | B．2 | C．3 | D．4 |
下列关于基因工程的叙述，错误的是( )。
| A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 |
| B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 |
| C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 |
| D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 |
蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。下图示意蛋白质工程流程，图中A、B在遗传学上依次表示 ( )
A．转录和翻译 B．翻译和转录 C．复制和转录 D．传递和表达
如图所示有关基因工程中工具酶功能的叙述，错误的是 ( )
| A．切断a处的酶为限制性内切酶 |
| B．连接a处的酶为DNA连接酶 |
| C．切断b处的酶为DNA解旋酶 |
| D．连接b处的酶为DNA聚合酶 |
基因工程技术中的目的基因主要来源于 ( )
| A．自然界现存生物体内的基因 | B．自然突变产生的新基因 |
| C．人工诱变产生的新基因 | D．科学家在实验室中人工合成的基因 |
下列有关质粒的叙述，正确的是 ( )
| A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 |
| B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 |
| C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 |
| D．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行 |
要检测目的基因是否成功插入了受体DNA中，需要用基因探针，基因探针是指 ( )
| A．用于检测疾病的医疗器械 |
| B．用放射性同位素或荧光分子等标记的目的基因DNA分子 |
| C．合成β-球蛋白的DNA |
| D．合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段 |
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