2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
（1）图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？
理由是： 。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是 。
（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。获得的转基因克隆猪，可以解决的医学难题是，可以避免 。
（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是： （填序号）。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白。
【生物——选修3：现代生物科技专题】
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。请根据示意图回答下列问题。
（1）单克隆抗体技术是 技术中最重要的用途。将特定的抗原注入小鼠体内，其目的是使小鼠产生 细胞。
（2）单克隆抗体的化学本质是 ；合成与分泌单克隆抗体涉及到的细胞器是 、 、 、 。
（3）骨髓瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起，细胞融合完成后，在培养基中有 种两两融合的细胞，融合的原理是 ，融合的方法除了电激外，还可以用化学诱导剂 或灭活的 。
（4）从图中可以看出，单克隆抗体制备经过了 次筛选，第一次筛选得到的细胞是
下图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的过程。请据图回答有关问题。
（1）图中X细胞一般选用______，与植物体细胞杂交相比，诱导X细胞和Y细胞融合还可采用____________。
（2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的______其培养液与植物组织培养的培养基相比，特有的天然成分______。
（3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出______，还需进行______和专一抗体检测，最终获得足够数量的______的细胞，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到______内进行增殖。
（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了____________杂交技术，这体现了单克隆抗体__________的特性。
[生物——选修3：现代生物科技专题]
单克隆抗体的制备过程如下图所示：
（1）植物体细胞杂交和单克隆抗体制备，都应用了细胞融合技术，电激和聚乙二醇都可以诱导相应的细胞融合，在诱导动物细胞融合时，还可以用 。细胞融合的原理是 。
（2）融合后的细胞，仅仅由2个细胞互相融合的类型有 种，其中符合要求的细胞是____，其特点为 。
（3）向动物体内反复注射某种抗原，并从动物血清中分离出抗体，这种抗体与单克隆抗体相比，存在的缺点是 。由单克隆抗体技术研制成的“生物导弹”由两部分构成，其中一部分被称为“瞄准装置”，它作用的原理是 ，其特点为 。
人源化单克隆抗体新药是中国内地上市的首个治疗类风湿性关节炎的药物。类风湿性关节炎属于哪种疾病
| A．过敏反应 | B．先天性免疫缺陷病 |
| C．自身免疫病 | D．获得性免疫缺陷病 |
关于现代生物技术的应用叙述，不正确的是
| A．植物组织培养技术可用于转基因植物的培育 |
| B．动物细胞培养技术可以克隆出动物个体 |
| C．单克隆抗体技术用于制备“生物导弹” |
| D．蛋白质工程可以改造自然界现有的蛋白质 |
克隆羊“多利”的问世，很快在全世界引发了一场大讨论，其中关于“治疗性克隆”的问题也成为人们关注的焦点。下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
（1）过程A表示________，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是用患者的体细胞作为核供体，由[①]________细胞提供细胞质，进行人工重组
（2）经过程B得到的结构中________（填标号）是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持________状态。
（3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有________。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是____________。
（4）对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？_____________________________________。
科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠—人嵌合抗体,用于癌症治疗。下图表示形成鼠—人嵌合抗体的过程。请据图回答下列问题。
（1）鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞,在诱导剂的作用下与 融合,形成 细胞,并通过体内培养或体外培养生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较,最主要的优点在于 ,可大量制备。
（2）与植物原生质体的融合相比,动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用 诱导融合。
（3）生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是 。
（4）科学家通过基因拼接,将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因,然后导入鼠淋巴细胞中,这个过程中用到的工具酶有 、 ,改造抗体属于 工程的范畴。
某研究小组欲将已知抗盐基因导人原生质体培育抗盐菊科植物。请回答：
（1）为获得大量抗盐基因，可通过 技术进行扩增，也可将其连接到 上，通过大肠杆菌培养扩增。
（2）制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体 。酶混合液需通过 灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在 中进行。
（3）可通过 方法，直接将抗盐基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出 ，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。
（4）利用带有标记的抗盐基因特殊片段与从转基因植株提取的RNA进行 ，验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。通过将扩大繁殖的再生植株转接到含有 的培养基，根据生长状况初步筛选出抗盐植株。
（5）为了获得大量该转基因植株，可将带腋芽的茎段转入适宜培养基中，获得大量 ，然后转入生根培养基中诱导生根，形成再生植株。再生植株需进行（不定项选择：
| A．无菌处理 |
| B．锻炼 |
| C．去除根部残留的培养基 |
| D．逐步提高湿度处理）后才能移种大田。 |
如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程．请回答下列问题：
（1）在Ⅰ图制备单克隆抗体的过程，包括 和动物细胞培养两个过程，在进行动物细胞培养时，首先要将动物组织剪碎，然后用 处理，以使其分散成单个细胞，制备成细胞悬液。
（2）A细胞的特点是 ，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养。
（3）单克隆抗体与常规抗体相比，具有 的特点。
（4）Ⅱ过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是 。
（5）若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行 ，操作过程需要特别注意的问题是： ，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
细胞融合技术有着广泛应用。下图表示细胞融合的简略过程，据图回答相关问题。
（1）若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再把这些融合细胞进行培养，培育出了玉米新品种。这两个品种的花粉可用化学诱导剂________诱导融合，这些融合细胞经过脱分化形成________，再经培养可以得到________种不同于亲本基因型的玉米新品种。
（2）若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，请据图回答问题。
①在“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程中，运用了植物细胞工程中的________技术，植物体细胞融合完成的标志是________。
②a、b细胞融合之前，要用到的酶是________，酶处理后得到________。
（3）若a、b分别为骨髓瘤细胞和已免疫的B淋巴细胞，请据图回答问题。
①为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，两种细胞发生融合，形成图中的d细胞，d细胞的特点是____________________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_______________等特点。
②下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来：
顺序：___________________________________________________________________。
英国科学家应用哪一种关键的细胞工程技术，培育出著名的“克隆绵羊”——多利
| A．细胞和组织培养 | B．细胞融合 |
| C．动物胚胎移植 | D．细胞核移植 |
下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：
(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是__________。
(2)图甲中②过程常在___________诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是_________________。
(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_________________________。
(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状为什么不全部像白面绵羊?
(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能 ( )
A．有选择地繁殖某一性别的家畜
B．繁殖家畜中的优良个体
C．用于保存物种
D．改变动物的核基因
(6)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是 ( )
A．卵细胞大，便于操作
B．卵细胞含有的营养物质多
C．卵细胞的细胞质可使体细胞胞核全能性得到表达
D．重组细胞才具有全能性
治疗性克隆是指把患者体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞中，构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗，请回答下列问题：
（1）ES细胞是 的简称，在形态上，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有 。将重组胚胎培养到 时期，从该时期的 中进行分离，从而获得ES细胞。
（2）在培养液中加入 可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞，细胞分化的本质原因是基因 的结果。
（3）科学家将患者的体细胞核植入去核的卵细胞中，而不是直接用体细胞进行培养的原因是 。
（4）某次科学家体外培养的ES细胞进行诱导使其定向分化为胰岛B细胞，病进行了胰岛素释放实验：控制培养液中 的浓度，检测细胞分泌的胰岛素的量，由图为实验结果，据此分析确认ES细胞诱导成功。得到此结论的依据是 。
粤公网安备 44130202000953号