牛胚胎移植的基本程序如下图，请据图回答：
(1)图中a、b、c过程分别是指__________、____________、______________。
(2)供体牛的主要职能是___________；受体母牛必须具备_____________。
(3)为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是______；处理的时期是________；理由是____________________________。
(4)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有________________________________________。
(5)你认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义有哪些？
_____________________________________________。
[生物—选修3—现代生物科技专题](12分)
自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。2014年3月，云南农大科研团队把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪。现将两种技术进行比较。
（1）图中过程_______________(填序号)是获得该移植克隆猪的技术流程。
（2）孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞_______________，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。
（3）体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择________________时期的卵母细胞，并用徽型吸管吸出______________。欲得到更多的卵母细胞，需用_________________处理良种母猪。
（4）早期胚胎移植时，必需移植到同种______________的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。
（5）可以从良种不同的克隆猪中提取mRNA进行研究，也可通过_____方法得到多种cDNA，并通过______技术扩增产物。
胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛。请据图回答下列问题：
（1）应用1中用到的细胞工程技术有 。
（2）应用1和2中早期胚胎移植到受体体内的方法有 。
（3）应用3中细胞C、D分别取自 、 。
（4）应用4中通过 技术获得得二分胚①和②，同时，可以通过取样 进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；也可以在细胞水平上通过对 的分析进行性别鉴定。
（5）受体母牛必须和供体牛属于同一物种。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是
胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。请根据动物受精和早期胚胎发育过程回答下列问题：
（1）在动物体内卵子的发生过程中，减数第一次分裂完成的时间是在雌性个体 ，当次级卵母细胞发育到 时期时才具备与精子受精的能力，受精的场所是 ，判断卵子是否受精的重要标志是____ 。
（2）受精过程中防止多精入卵的两道屏障是____ 和 。
（3）胚胎发育过程首先是卵裂，所得每个子细胞的体积比受精卵___ _，胚胎发育到 期会导致透明带破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做孵化。
（4）胚胎干细胞是由囊胚的____ 或 中分离出来的一类细胞，在人类疾病治疗和科学研究中有着广泛的应用。
慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况（ 比如慢性肝病、慢性肾病、肿瘤等），缺乏白蛋白人就容易出现浮肿。人体的白蛋白正常值在每100ml血液中含有3．8～4．8克，如果比正常值低很多时就需要注射人血白蛋白，所以临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图：
(1)要实现①超数排卵，应在崂山奶山羊A发情周期的某一阶段用 处理，然后在恰当时期采集卵子。通过②采集的精子不能直接使成熟的卵子受精，要对精子进行获能处理，对羊的精子常用化学诱导法，即用一定浓度的 诱导精子获能。
(2)若我们已知白蛋白基因的碱基序列，一般采用 获取目的基因。要使人的白蛋白基因在奶山羊乳腺细胞中特异性表达，完整的基因表达载体要包括目的基因、 、 、标记基因等部分。
(3)过程④需将重组质粒用 方法注入受精卵的雄原核内，在显微镜下判断是否完成受精作用的标志是 。
(4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的 细胞进行鉴定，一般采用SRY-PCR方法，选择出现阴性反应的 （性别）胚胎进行移植。
（5）为了使胚胎移植能成功，需要对代孕奶山羊C进行 处理，使之与供体的生理状况保持相同。
(生物——选修3：现代生物科技专题)
请回答下列有关生物工程方面的问题：
（1）目前，科学家通过细胞核移植实验，培育出多种哺乳动物新类型。在哺乳动物的核移植实验中，一般通过 （物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂并发育，当胚胎发育到 阶段时，将胚胎植入另一雌性（代孕）动物体内。
（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行 处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至 ，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。
（3）将已免疫小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过 培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过____________筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。
（4）若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、 、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的 （填“受精卵”或“乳腺细胞”）。
治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗。请回答下列问题：
（1）治疗性克隆采用的技术有_______________________________。
（2）ES细胞可从重组胚胎培养到囊胚期时的____________中分离。
（3）在培养液中加入_____________可诱导ES细胞定向分化成所需的各种特定类型细胞，体现了ES细胞在功能上具有发育的____________。
（4）为治疗遗传性糖尿病，可将正常胰岛素基因导入ES细胞中，检测该基因是否插入到ES细胞的DNA上，可采用____________技术，再将此重组细胞定向诱导分化后，筛选得到________________________的胰岛样细胞，并扩增培养后输入患者体内，这种治疗方法称为_____________________。
（5）中国政府不反对治疗性克隆，但禁止生殖性克隆人，一再重申的四不原则是_______。
回答下列有关生物工程技术问题。
（1）在植物基因工程中，构建重组Ti质粒时，通常要用 分别切割
和 ，再用 进行连接。
（2）体内受精作用进行时防止多精入卵的机制有 和 。
（3）动物细胞体外培养时，要保证被培养的细胞处于 的环境，在营养方面通常需要在培养基中加入 等天然成分。细胞培养需在适宜的理化条件下进行，此外还需要一定的气体环境，其中C02的主要作用是 。
长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：
（1）在试管牛和克隆羊的培育过程中都必须用到的生物技术有 、 。
（2）和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②释放第二极体；③顶体反应；④穿越透明带；⑤雌、雄原核的形成；⑥核膜消失，雌、雄原核融合。
其正确的顺序为 （填序号）。
（3）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射 ；冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的 冲洗出来。
（4）从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有 ；图中标号3为 ，它将来可发育为胎膜和胚盘。
（5）动物的早期胚胎移植到同种且 与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜 。
（6）试管牛E的性别为 ，克隆羊多利的性状和 (黑面绵羊\白面绵羊）最接近。
(7)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有
美英两位科学家因为在胚胎干细胞研究方面的“基因靶向”技术获得2007年度诺贝尔生理学或医学奖。“基因靶向”技术是指利用细胞脱氧核糖核酸（DNA）可与外源性DNA 同源序列发生同源重组的性质，定向改造生物某一基因的技术。有科研小组通过右图所示的“基因靶向”技术将小鼠棕褐色的毛色基因导入黑色纯种小鼠细胞的ES细胞中。请据图回答下列问题：
⑴ ES细胞来自第3.5天小鼠囊胚中的 （填字母）细胞，理论上该细胞具有
性。
⑵ 在胚胎移植过程中，供、受体动物选择好后，要用激素进行
的处理，使供、受体的生理状态相同，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。
⑶ 该实验得到的带突变基因的嵌合体小鼠体内至少有 种基因型的体细胞。
⑷ 取患者的淋巴细胞（脐带血细胞）作为 细胞，插入正常的外源基因后，再回输体内，以替代、修复或纠正有缺陷的基因，这种方法称为 ；
⑸ 与该技术相似，将抗虫基因导入棉花细胞中后产生的愈伤组织可通过 培养分散成单细胞，这种细胞称为 细胞，可发育成胚状体，从而获得大量抗虫棉。
⑹ 皮肤细胞是高度分化的细胞，其分化的根本原因是 ，皮肤干细胞经诱导能分化得到多种体细胞，其物质基础是 。
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图：
（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于__________________期。
（2）步骤②中，分离出ES细胞比体细胞全能性________。
（3）步骤③中，首先要获取目的基因，以下几种方法中需要模板的是___________
| A．从基因组文库中获取目的基因 |
| B．利用PCR 技术扩增目的基因 |
| C．构建cDNA 文库 |
| D．通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成目的基因 |
（4）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的______________。
（5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________。
[生物———选修3：现代生物科技专题]克隆技术不仅解决了器官移植中供体不足的问题,同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展和应用,请据图回答下列问题。
(1)克隆动物培育属于 生殖方式。胚胎1和胚胎2获得运用了 技术。
(2)图中两个克隆动物长大后,各方面特征与原型动物相同,这说明 具有全能性,早期胚胎发育在 阶段以前的细胞是全能细胞。
(3) 使用培养基进行胚胎干细胞培养时,通常要加入 等天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中,还需要保证细胞生活所需的 。
(4) 图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,一般用 处理内细胞团,使之分散成单个细胞。内细胞团将来发育为 。
下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含____________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________(填字母代号)。
A．启动子 B．tetR C．复制原点 D．ampR
(3)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的________性。
(4)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用________(填字母代号)技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析
C．抗原—抗体杂交 D．PCR
结合配子的发生及受精作用,回答下列问题:
（1）精子细胞经变形后, 发育形成精子的顶体,顶体内含有的顶体酶能协助精子依次穿过卵子的 和 。
（2）某动物排卵时,减数第一次分裂尚未完成,此时卵子处于 卵母细胞阶段,当该细胞发育至 时,才具备受精能力。若在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体,则表明 过程已完成。
（3）精子与卵子在 相遇,当精子触及卵细胞膜的瞬间,会产生阻止后来精子进入透明带的生理反应,称为 。精子头部进入卵细胞膜后,立即发生 ,阻止多精入卵。当 ,受精过程至此结束。
控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义。目前，分离精子技术是有效的性别控制方法。
根据以上信息据图回答下列相关问题。
(1)左图中过程①中___ __的精子与卵子相遇时，首先发生__ ___反应释放出有关的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质。体外受精的受精溶液是模拟 中的液体环境。
(2)试管动物技术和母亲正常怀孕生产过程的相同点是____________________ ____，不同点在于试管动物是___ _____、胚胎移植的产物。
(3)目前在生产中应用较多的胚胎工程技术是早期胚胎培养、_____ ___和____ ____。
（4）人们利用试管动物技术成功培育了转基因动物。在基因工程操作的基本程序中，基因工程的核心是______________________，右图为逆转录病毒载体的结构图。图上的“逆转录病毒序 ”可以整合到动物细胞的染色体上（E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点）。
①在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶___和DNA连接酶。
②为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__ ___的培养基进行培养。
③获取转基因小鼠后，若已知目的基因进人细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是______ ____。
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