回答下列有关生物工程技术的相关问题：
（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长至细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，可以用 酶处理。
（2）将目的基因导入动物细胞最常用的技术是 。
（3）与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用________________________诱导融合。
（4）单克隆抗体的最大优点是 ，可大量制备。
（5）在培养过程中，培养液添加一定量的 ，以防止杂菌污染；在含有5％CO2的培养箱中进行培养，CO2的主要作用是 。
（6）防止多精入卵受精的两道屏障是 。
iPS细胞全称为诱导性多能干细胞，是由体细胞诱导而成的干细胞，具有发育的多潜能性，可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下为iPS细胞研究中的几个重要事件。
资料1：2007年，美日科学家利用病毒将“c－Myc”等4个基因植入人类皮肤细胞，发现皮肤细胞可转化为iPS细胞。
资料2： 2009年7月，我国科学家首次利用由体细胞诱导而成的iPS细胞，通过四倍体囊胚注射得到存活并具有繁殖能力的小鼠。
（1）美日科学家所利用的病毒的作用相当于基因工程中基因操作工具中的 。 iPS细胞与__________细胞的特性最相近。
（2）皮肤取出后一般用胰蛋白酶等物质处理将细胞分散，而不用胃蛋白酶，原因是__________________________________________________________________
（3）皮肤细胞经诱导可形成iPS细胞，原因是_______________________________。
（4）在皮肤干细胞培养过程中，科研人员发现人工合成激素Ry可能引起细胞癌变。下面是关于这一问题的探究实验，请完善相应内容。
材料用具：含皮肤干细胞的培养液、适宜浓度的激素Ry溶液、显微镜、__________等
实验步骤：
①将皮肤干细胞培养液平均分成2组，编号为A、B。
②B组培养液中添加少量___________，A组培养液不添加。
③将A、B两组干细胞置于相同的培养条件下培养72小时。
④取样，分别染色、制片，在显微镜下观察__________________________________________。
结果与结论预测：如果____________________________，说明激素Ry能引起细胞癌变。
人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠________中获取。
（2）图中的高血压相关基因作为__________，质粒作为_________,二者需用________切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有________有关。
（3）子代大鼠如果________ 和__________ ，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是___________、早期胚胎培养和胚胎移植。
为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法（如下图）：请根据图示信息完成问题：
（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有_____________________等。
（2）用来促进B牛多排卵的激素可能是___________分泌的促性腺激素。E牛的性别是___________。
（3）产生F牛的理论依据是______________________，其生殖方式属于___________。
（4）要培育高产奶率的转基因牛，则目的基因的受体细胞一般是___________，转基因牛乳腺细胞中含有较多的参与分泌物加工的___________等细胞器。
为了加快优良种牛的繁殖过程，科学家采用了以下两种方法。请回答
（1）用激素处理B牛后，可使B牛 ，从而充分发挥其 。
对D牛要进行 ，以保证 。判断卵子是否受精的重要标志是
。受精五天后，看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂痕，这是胚胎 期开始的标志。冲卵就是将 从B牛的子宫内冲洗出来，然后对胚胎进行质量检查，这时的胚胎应发育到 。
（2）E牛的性别是 。为了确保得到所需性别的试管牛，往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定，请举出两种对早期胚胎进行性别鉴定的方法（只需写出名称或简要原理） 、 。
（3）产生F牛的理论依据是 。科学家为何将C牛的细胞核移入去核卵母细胞中，而不直接用体细胞进行培养？ 。
现代生物科技在畜牧业生产中有着广泛的应用，以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a -- h为操作过程，请据图回答有关问题。
（1）为提高良种奶牛的繁殖能力，在获取卵母细胞之前需用 对奶牛进行处理，目的是使其 。
（2）“转基因牛”D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，其主要原因是
。过程h常用的方法是 。h过程的核心步骤是 ，该步骤需要的工具酶是
。为了能确定目的基因已经导入到受精卵，相应的载体需要有 以便于进行检测。在蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 。
（3）“试管牛”技术的操作流程是 。（用图中字母和箭头形式表示）
（4）图中数字标号③代表的结构为 ，c→d过程需对其均等分割的目的是
。
（5）d操作的名称是 。 若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到 阶段的早期胚胎进行 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 条件下。
（6）受体母牛必须和供体牛属于同一物种。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
（7）在培育良种牛的过程中，都运用了动物细胞培养技术．在动物细胞培养过程中，为防止杂菌的污染而要加入一定量的 。
如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题：
（1）A细胞是 ，在进行体外受精前要对精子进行 处理。
（2）进行胚胎分割时，应选择发育到 时期的胚胎进行操作。对胚胎进行分割时，要特别注意将 均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看作动物 的方法之一。
（3）②指的是 。
（4）通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性状的根本原因是 。
（5）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意 。
（6）受体母牛必须和供体牛属于 。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
请填写有关受精过程的内容
（1）获能后的精子与卵子相遇时，精子顶体释放 ，溶解
之间的物质，形成精子穿越 的通路。穿过放射冠的精子立即与
接触，顶体酶随后将透明带溶出一条孔道，精子借自身运动穿越透明带，并接触 。
（2）在精子接触卵黄膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，这个反应称作 。形成多精子入卵受精的第一道屏障。
（3）只有穿过透明带的精子才能与卵黄膜接触。由于卵黄膜表面有大量的 ，当精子与卵黄膜接触时，立即被微绒毛抱合，随后，精子外膜和卵黄膜 ，精子进入 ，而精子入卵后，卵黄膜会立即发生一种生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，这种生理反应称作 ，可看作是防止多精子入卵受精的第二道屏障。
（4）精子入卵后的另一个变化，是尾部脱离，并且原有的核膜破裂；随后，精子形成一个新的核膜，最后形成一个比原来精子核还大的核，叫做_______。与此同时，精子入卵后被激活的卵子完成____________，排出__________后，形成雌原核，雌原核一般略小于雄原核。
雄、雌原核充分发育后，相互移动，彼此接触，二者体积缩小、合并，两组染色体合为一组，形成一个含二倍染色体的合子，就是受精卵。受精作用至此结束，受精卵的发育也由此开始。
下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答：
（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至______期的内细胞团或胎儿的____ 中分离得到的一类细胞。
（2）图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下，培养液中加入__ _因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
（3）在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。
（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓移植治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。
（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞、神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________，其原因是___________。
（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。
（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用__________细胞与骨髓细胞融合，经多次筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。
下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答问题：
(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是__________________。
(2)图甲中②过程常用的诱导因素有______________________________等（至少回答三项）。
(3)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗? _____________。原因是_______________________________________________。
（4）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为哪个是最主要原因 （ ）
| A．卵细胞大，便于操作 | B．卵细胞含有的营养物质多 |
| C．卵细胞的细胞质可使体细胞胞核全能性得到表达 | D．重组细胞才具有全能性 |
（5）图甲中有两次筛选过程，第一次可以筛选出 ，第二次可筛选出 。
（6）单克隆抗体最主要的优点在于___________________________________________。
（7）静脉注入而不是口服单克隆抗体的原因是 。
下图表示胚胎移植的基本程序、早期胚胎发育过程。请回答下列问题：
(1)请在图中空格处将内容补充完整：① ，② 。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射 。
(3)冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的 冲洗出来。
(4)如果胚胎发育到了F期，这时的 细胞就是胚胎干细胞。
（5）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其________。另外，培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期，该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和________。
“今又生”是我国为数不多的首创基因治疗药物之一，其本质是利用腺病毒和人P53基因（抑癌基因）拼装得到的重组病毒。人的P53蛋白可对癌变前的DNA损伤进行修复，使其恢复正常，或诱导其进入休眠状态或细胞凋亡，阻止细胞癌变。“今又生”的载体采用第一代人5型腺病毒，其致病力很弱，其基因不整合到宿主细胞的基因组中，无遗传毒性；载体经基因工程改造后，只对细胞实施一次感染，不能复制，不能污染。请回答下列问题：
（1）在“今又生”的生产中，为了获得更高的安全性能，在载体一般应具备的条件中，科学家选择性地放弃了一般载体都应该具有的 。检测P53基因的表达产物，还可以采用 技术。
（2）如果要获取人类基因组中抑癌基因P53，可以采取的方法通常包括 和通过化学方法人工合成。目的基因的大量扩增则可以采用 ，该技术中需使用的一种特殊的酶是 。
（3）在研究中如果要获得胚胎干细胞进行研究，则胚胎干细胞可来源于囊胚期
的 _，或胎儿的原始性腺，也可以通过 技术得到重组细胞后在进行相应处理获得。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是 。
随着人们生活水平的提高，乳制品需求越来越大，为了扩大生产，提高产崽率，要进行良种牛的培育。下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程，请据图回答：
(1)用_______________激素处理使供，受体母牛同期发情。
(2)冲卵实质上是用特定装置将供体母牛子宫内的_______________冲洗出来。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有_______________。
(4)图中标号3为_______________，它将来发育为胎膜和胎盘。
(5)若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗？为什么？
________________________________________________________。
(6)若对A细胞利用基因工程技术加以改造，将人的血清白蛋白基因导入，在成体的雌牛的乳汁中提取出人血清白蛋白。该基因工程操作的基本步骤是
提取目的基因→_______________→将目的基因导入受体细胞→_______________
(7)对于植物来说，导入外源基因，容易引起基因污染，科学家就将外源基因导入叶绿体或线粒体内，原因是________________________________
牛奶、牛奶制品、牛肉制品中含有丰富的营养，因此人们对之的需求量越来越大。我们可以用引进的少量优良品种牛进行快速繁殖，以满足人们的需要。
（1）快速繁殖优良牛的方法之一是培育试管动物，其主要操作程序是采集卵母细胞和精子并进行获能处理、_______________、________________、胚胎移植 。若培育肉用牛，采集卵母细胞的常用的方法是______________________和 。
（2）良种化胚胎工程进行胚胎移植过程中，对供体母牛的基本要求是_______________________，对受体母牛的基本要求是_______________________。
（3）在进行人工授精和活体采卵前，都要对母牛进行_______________处理。
（4）一般在桑椹胚或囊胚期进行胚胎移植，囊胚中的____________将发育成胎儿的各种组织。
（5）胚胎分割移植要在受精卵培养到8个细胞的卵裂期时进行，其主要原因是此时还未出现 ，此时的细胞属于 干细胞的一类。
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