牛胚胎移植的基本程序如图，请据图回答：
（1）图中a、b过程分别是指 、 。
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是 。
（3）a过程中为一次获得多个卵细胞，往往需要向供体母牛内注入促性腺激素，而不是性激素，原因是 。
（4）为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是 ；此方法应选择发育良好、形态正常的 进行处理，理由是 。
(10分)下图示牛胚胎移植的基本程序，请据图回答：
（1）图中a、c过程分别是 、 。
（2）胚胎移植的意义
（3）为了提高胚胎的利用率，常采用的方法是 ，处理的时期是 。
Ⅰ．基因工程基本操作流程如下图，请据图分析回答。
（1）在基因工程的操作过程中，遵循碱基互补配对原则的步骤可能有 （用图解中的序号表示）。
（2）下列属于基因表达载体组成的是（ ）
A目的基因 B终止密码 C启动子 D标记基因 E终止子 F起始密码
（3）可用 方法将目的基因导入动物细胞。
Ⅱ．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法： 
请根据图示信息回答。
（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的生物技术有 和 。
（2）试管牛培育过程特有的生物技术是 ，克隆牛培育过程特有的生物技术是 。
Ⅲ．请回答单克隆抗体制备的有关问题：
（1）单克隆抗体制备为什么要向小鼠注入特定的抗原？ 。
（2）单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是 。
（3）选出的杂交瘤细胞必须具备 特点。
（5分，每空1分）下图为哺乳动物胚胎分割和性别鉴定示意图。请据图回答：
（1）胚胎分割时，一般采用发育良好、形态正常的_____ _。对胚胎进行分割时，要特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育。来自同一胚胎分割产生的后代具有相同的遗传物质，因此，胚胎分割可以看作动物________的方法之一。
（2）①过程分割出的少量胚体细胞用来做性别鉴定，该技术常采用的方法是__________。
（3）哺乳动物的胚胎干细胞通常可以从________________________（写出两种方法）中分离得到。
（7分，每空1分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________（填字母代号）。
A．ampR B．启动子 C．终止子 D．复制原点
（3）过程①可采用的操作方法是_______ _(填字母代号)。
A．农杆菌转化 B．显微注射 C．大肠杆菌转化 D．细胞融合
（4）过程②采用的生物技术是____ ____。
（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______ __性。
（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_____ ___（填字母代号）技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．PCR D．抗原—抗体杂交
(15分)
材料一：毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KlFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（1）过程①构建的重组表达载体除具有KlFⅡ基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。其中标记基因的作用是 。
（2）在过程②中，用__________处理能将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞.在培养过程中，需将成纤维细胞置于pH值约为 培养液中，并且放在含95％的空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
（3）在过程③中，卵母细胞除可从活体输卵管中采集外．还可以从已宰杀的母羊___________中获取；成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行去核处理，同时用微型吸管吸走 。
材料二：近年来我省大庆市太康县对大棚农业的发展，收到了很好的经济效益。请据图回答有关问题。
(4)从生态学角度分析，人们建立图示的农业生态系统的主要目的是 _________________________________________，图中生态农业主要是借鉴了“无废气物农业”，主要体现了生态工程__________原理。与此密切相关的生物为_____ _________。
(5)在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，不仅提高了农民经济收入，还使保护环境和发展经济相互协调，体现了生态工程的__________原理。
下图为胚胎移植的基本程序及早期胚胎发育过程，请据图回答：
（1）对供体母牛和受体母牛进行同期发情处理的原因是 。
（2）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射_____________。
（3）冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的_________________冲洗出来。
（4）图中标号3为______________，它将来可发育为 。
（5）若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗? ___________，
为什么? _____________________________________________________。
（6）D叫做 。若对E进行分割，操作时要注意 。
（7）从1中分离出的胚胎干细胞在功能上的特点是 。
人的血清白蛋白在临床上需求量很大，通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV) 等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。大致过程如下
a．将人体血清白蛋白基因导入将来发育成雌性奶牛的胚胎细胞，形成重组细胞①；
b．取出重组细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成重组细胞②；
c．电脉冲刺激重组细胞②促使其形成早期胚胎；
d．将胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
(1)重组细胞①和②哪一个实现了基因的重组？ 。
(2)实验过程a的关键步骤是 。
(3)实验过程b利用的技术是 ，从牛卵巢中取出的卵母细胞需要体外培养到 时期再去核。
(4) 实验过程c形成的早期胚胎一般是 胚胎，胚胎工程操作中最后环节是 。
(5)血清白蛋白基因表达包括 和 两个过程。
(6)上述整个过程实现了 工程、 工程和胚胎工程的综合应用。
请回答与转基因小鼠的培育过程相关的问题。
（1）获取外源基因常用的工具酶是 ，若需在短时间内获得大量的某种外源基因，通常采用 技术。
（2）在供体雌鼠发情周期的某一阶段，用一激素处理促使卵巢里大量卵泡成熟并排出，称为超数排卵。在让供体母鼠与健康公鼠交配的同时，让代孕母鼠与结扎公鼠进行交配，使代孕母鼠与供体母鼠的生理条件达到同步或者一致，称为 处理。
（3）将基因表达载体导入受精卵常用的方法是 。
（4）将注射有外源DNA的受精卵移人发育培养液中继续培养至桑椹胚或 ，再进行胚胎移植。进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和 。
（5）待代孕母鼠产出幼仔后，取幼鼠尾巴细胞提取基因组DNA，可用 法等分析以确定是否为转基因鼠。
毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。
（１）过程①所需要的酶是 和 。
（２）在过程②中，用 处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于95%的空气和 的混合气体环境中培养。
（３）在过程③中，可用 （激素）处理以获取更多的卵（母）细胞，还可从刚宰杀的山羊 中获取。
（4）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是 。在胚胎移植前，通过 技术可获得较多胚胎。
（5）下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是
| A．种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 |
| B．转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中 |
| C．种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性 |
| D．转基因植物的抗除草剂基因可能通过花粉传播到杂草中 |
现代生物技术的发展，人们对细胞有了更多的认识，回答下列问题：胚胎干细胞在基础生物学、畜牧学和医学上具有十分重要的应用价值。囊胚期胚胎由 、囊胚腔和滋养层组成。前者将产生胚胎的所有组织和胚外结构，后者形成胎盘。首先用免疫外科方法去掉囊胚外围的滋养外胚层，再将得到的细胞平铺于 细胞上以防止分化，在高血清浓度条件下培养数天后，ES集落开始形成，大约每隔7d 进行分散和重新平铺，分散的方法可以是微吸管机械分散，也可以用 消化分散。目前已得到未分化状态、具正常双倍体核型及多向分化潜能的干细胞，已传三十多代并可 保存。
（2）Weiss等用细胞融合实验证明，分化的细胞中存在“闲置不用”的结构基因。他们把大鼠肝肿瘤细胞和小鼠成纤维细胞融合成 细胞，筛选出含有两套肝细胞染色体和一套成纤维细胞染色体的细胞。这些细胞既保持了合成 细胞3种特异蛋白的能力，也合成了小鼠肝细胞的这3种蛋白，但是在正常的成纤维细胞中从不合成这些。由此可见，融合实验证实了小鼠成纤维细胞 。
（3）由于细胞体积小，要通过显微操作装置在显微镜下进行解剖手术和微量注射。显微操作技术可用于 、 等技术。
2n/4n 嵌合体胚胎是指用四倍体 (4n )胚胎与二倍体胚胎(2n )或胚胎干细胞 (ES 细胞)进行聚合，形成由二倍体和四倍体细胞组成的嵌合体。2n/4n 嵌合体胚胎的构建常用方法如下图，请据图分析回答：
（1）受精卵是胚胎发育的开端，图中的卵细胞达到 时期，才具备受精的能力，而精子需经过 过程才能和卵细胞结合。
（2）2N的ES细胞来自胚胎发育过程的 期，本实验中从功能上说明了该细胞 。
（3）2n/4n 嵌合体胚胎的构建用到的现代生物工程技术主要有：
（4）ES细胞经嵌合体方法培育的动物与核移植方法培育的动物相比，遗传物质来源的区别主要是什么？ 。
回答下列有关动物细胞培养、胚胎工程和基因工程方面的问题：
（1）在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 ，要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
（2）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是 。
（3）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作
进行攻击。
（4）应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”。试管牛的培育需经过体外受精、_______ ___、___ __________以及在母体中发育和产出等过程。
（5）通常奶牛每次排出一枚卵母细胞，采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞，常使用的激素是__________。
（6）利用基因工程可以获得转基因牛，从而改良奶牛的某些性状。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素，则所构建的基因表达载体必须包括：某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、终止子、__________、__________和复制原点等。为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是__________。
(7分)产前诊断是优生的主要措施之一，其中的羊水检查是对孕妇进行检查的一种手段。检查羊水和羊水中的胎儿脱落细胞，能反映胎儿的病理情况。下列甲图是羊水检查的主要过程，据图回答。
甲
(1)抽取的羊水离心后得到的胎儿脱落细胞需进行细胞培养，除了给予一定量的O2维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体以 。在细胞培养过程中，需定期更换培养液，原因是 。
(2)对培养的胎儿脱落细胞进行染色体分析时，通常选用处于有丝分裂 (时期)的细胞，主要观察染色体的 。对培养细胞用低渗溶液处理，可以使细胞中的染色体释放出来。下列疾病可以通过此方法检测的有
| A．原发性高血压 | B．苯丙酮尿症 | C．猫叫综合征 | D．镰刀型细胞贫血症 ) |
(3)若要对脱落细胞中某目的基因进行扩增，所采用的技术是 。检测目的基因是否转录出mRNA的具体方法是使用 与提取出的mRNA做分子杂交。
下图为胚胎移植的基本程序、早期胚胎发育过程（图甲），及经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程（图乙）．请回答下列问题：
（图甲）
（图乙）
（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射 。冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的 冲洗出来。
（2）图乙中②指的是 。进行胚胎分割时，应选择发育到 时期的胚进行操作。
（3）图甲中标号3为 ，它将来可发育为 。
（4）若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗? ，为什么? 。通过胚胎分割产生的两个或多个个体共有的根本特点是 。
（5）图乙中A细胞是 ，在进行体外受精前要对精子进行 处理。哺乳动物受精过程有哪些机制阻止多精子入卵受精？（ ）
| A．顶体反应 |
| B．精子穿越卵子透明带触及卵黄膜，导致透明带反应 |
| C．精子触发卵黄膜表面微绒毛的抱合反应 |
| D．精子入卵后，触发卵黄膜封闭作用 |
（6）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意 。
（7）受体母牛必须和供体牛属于 。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 。
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